海南潭牛一養(yǎng)殖池塘出現(xiàn)羅非魚暴發(fā)性死亡，發(fā)病初期死亡40-60尾/天，高峰期死亡700-800尾/天，通過采樣、實(shí)驗室診斷治療，取得了較好的效果。

 

    2015年11月中下旬，海南潭牛一養(yǎng)殖池塘出現(xiàn)羅非魚暴發(fā)性死亡，發(fā)病初期死亡40-60尾/天，高峰期死亡700-800尾/天，情況嚴(yán)重。水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病防控技術(shù)國家地方聯(lián)合工程實(shí)驗室（簡稱“國家工程實(shí)驗室”）通過對該地區(qū)的羅非魚進(jìn)行現(xiàn)場采樣，并進(jìn)行實(shí)驗室診斷治療，取得了較好的效果，本文就此病診療情況介紹如下，以期對今后羅非魚嗜水氣單胞菌病的防治提供借鑒。

 

一、發(fā)病魚的臨床癥狀

 

    池塘水溫為26-28℃，暴發(fā)疾病的魚規(guī)格主要為400-500g，發(fā)病初期死亡40-60尾/天，而后逐漸增多，高峰期死亡量達(dá)800尾/天以上。患病魚主要表現(xiàn)為食欲下降，離群獨(dú)游，反應(yīng)遲鈍，在水面上層漂浮游動。病魚鰓蓋出血、肛門紅腫、鰭條、上下頜和腹部充出血。解剖后觀察發(fā)現(xiàn)，有胃出血、膽囊變大、膽囊壁變薄、肝臟充血或出血或呈現(xiàn)花斑癥狀，腸道內(nèi)無食物的癥狀。發(fā)病初期，養(yǎng)殖戶認(rèn)為可能是鏈球菌病感染所致，就使用了磺胺類抗生素，但死亡量并未減少。后送樣至本國家工程實(shí)驗室進(jìn)行診斷。

 

二、實(shí)驗室診斷

 

    實(shí)驗室診斷未發(fā)現(xiàn)寄生蟲，使用通威股份最新研發(fā)的無乳鏈球菌快速診斷試紙條未檢測到無乳鏈球菌。而通過對病原菌分離，采用腦心浸液（BHI）培養(yǎng)基在患病魚體內(nèi)分離到一株革蘭氏陰性短桿菌，菌體兩端鈍圓，菌株大小為（0.3-0.6）μm×（1.0-1.5）μm，在28℃條件恒溫培養(yǎng)18-24h，形成針尖狀、直徑約為1mm左右、表面光滑、邊緣整齊、圓形半透明的菌落。

 

    通過16SrDNA基因擴(kuò)增，得到約1500bp的擴(kuò)增條帶，測序后在NCBI上進(jìn)行BLAST比對，分離菌株與嗜水氣單胞菌的同源性最高，序列相似性達(dá)到99.5%。將分離到的細(xì)菌接種到健康羅非魚，在36h內(nèi)實(shí)驗組出現(xiàn)死亡，且體表有點(diǎn)狀出血、鰭條出血、剖解見內(nèi)臟充血或出血。并從人工接種感染的羅非魚肝臟組織分離到1株細(xì)菌，經(jīng)16SrDNA基因擴(kuò)增對比分析該菌株同樣為嗜水氣單胞菌。因而判斷該病為嗜水氣單胞菌感染所致。

 

三、藥敏試驗與治療

 

    利用紙片擴(kuò)散法，對該嗜水氣單胞菌株分別進(jìn)行藥敏試驗，發(fā)現(xiàn)其對強(qiáng)力霉素、恩諾沙星、四環(huán)素、氟苯尼考敏感，而對卡那霉素、磺胺嘧啶、鏈霉素耐藥，丁胺卡那、慶大霉素、新霉素、壯觀霉素中度敏感。結(jié)合發(fā)病情況和藥用史，按照內(nèi)服抗生素氟苯尼考（20mg/kg魚體重），同時內(nèi)服維生素K3以6mg/kg魚體重，連續(xù)投喂5天；外用潑灑使用聚維酮碘消毒（1-2次）。藥物使用4天后，病情得到有效控制，死亡量降至70-80尾，連續(xù)使用2天后，死亡量減少到10余尾。

 

    同時，簡易水質(zhì)試劑盒測定該塘口后氨氮1.8mg/L、亞鹽高于0.3mg/L，因此先后使用底質(zhì)改水解毒產(chǎn)品（如通威改水解毒寶，主要成分為吸附劑、絡(luò)合劑、表面活性劑等）和培藻產(chǎn)品（如通威伴侶Ⅳ，主要成分為藻種、多種微生物、多肽、礦物元素）對水質(zhì)進(jìn)行調(diào)節(jié)。經(jīng)過處理，病情得到有效處置。

 

四、小結(jié)

 

    羅非魚已經(jīng)成為我國主要的淡水魚類品種之一，而疾病的發(fā)生逐漸成為制約羅非魚養(yǎng)殖業(yè)健康、持續(xù)、快速發(fā)展的瓶頸。目前，羅非魚鏈球菌病已成為危害羅非魚的最主要疾病，而無乳鏈球菌病是其主要病原，但也有嗜水氣單胞菌、熒光假單胞、愛德華氏菌感染羅非魚的報道。該羅非魚嗜水氣單胞菌病發(fā)生在11月份，據(jù)報道羅非魚鏈球菌病主要流行于6-8月，經(jīng)實(shí)驗室初步診斷、分子生物學(xué)診斷、回歸試驗，最終確認(rèn)是由于嗜水氣單胞菌感染所致。

 

    從魚體發(fā)病的癥狀來看，鏈球菌病與羅非魚嗜水氣單胞菌兩者之間都有體表充、出血，羅非魚肝臟出血、膽囊腫大的癥狀，僅從肉眼無法做出準(zhǔn)確判斷。而如需進(jìn)一步確診病因需使用分子生物學(xué)等檢測手段，而無乳鏈球菌快速診斷試紙條因其具有操作簡單、方便、準(zhǔn)確性高，診斷時間短，能夠有效確診是否為無乳鏈球菌病，降低了藥物亂用所帶來的養(yǎng)殖風(fēng)險。

 

    通過對患病池塘的水質(zhì)檢測發(fā)現(xiàn)，池塘的水質(zhì)較差，氨氮、亞鹽偏高，且水質(zhì)較為渾濁、老化，投料后羅非魚自身產(chǎn)生的排泄物較多，投料產(chǎn)生的殘餌增加與水質(zhì)變化加快有關(guān)系。嗜水氣單胞菌是屬于條件性致病菌，水體中氨氮、亞鹽的超標(biāo)，或天氣的變化導(dǎo)致魚體處于應(yīng)激狀態(tài)，自身抵抗力下降，導(dǎo)致了疾病的暴發(fā)。

 

    在魚類疾病防控中，一直以來倡導(dǎo)“以防為主、快診早治、合理用藥”的防控理念，加強(qiáng)對養(yǎng)殖水體的管理，提高魚體自身的免疫抵抗力。在平時的養(yǎng)殖過程中，需要充分使用增氧機(jī)增氧，特別是在養(yǎng)殖中后期，以保持水體氧氣的充足，有條件的可以根據(jù)水質(zhì)情況進(jìn)行換水，日�？墒褂梦⑸鷳B(tài)制劑（EM菌、芽孢菌和光和菌等）對水質(zhì)進(jìn)行調(diào)節(jié)，保持水體處于良好的狀態(tài)。并可以通過對魚體內(nèi)服保�。ㄈ缍嗑S和黃芪多糖等）來增強(qiáng)魚體免疫能力。對于發(fā)病池塘，因盡早確定病因，才能對癥下藥，及時有效的采取相應(yīng)措施控制病情，降低養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)損失

 

作者：通威股份有限公司動物保健研究所、水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病防控技術(shù)國家地方聯(lián)合工程實(shí)驗室 王浩丞 劉天強(qiáng) 戴景輝；通威（海南）水產(chǎn)食品有限公司 王勇強(qiáng)