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常規(guī)組織傳代培養(yǎng)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

1. 吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。

2. 向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。

3. 置溫箱中2~5分鐘,當發(fā)現(xiàn)細胞質回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。

4. 吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。

5. 用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。

6. 計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。


 
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