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組織培養(yǎng)母液制備

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

  為了避免每次配制培養(yǎng)基都要對(duì)幾十種化學(xué)藥品進(jìn)行稱(chēng)量,應(yīng)該將培養(yǎng)基中的各種成分,按原量10倍、100倍或1000倍稱(chēng)量,配成濃縮液,這種濃縮液叫做母液。這樣,每次配制培養(yǎng)基時(shí),取其總量的1/10、1/100、1/1000,加以稀釋?zhuān)闯膳囵B(yǎng)液。現(xiàn)將培養(yǎng)液中各類(lèi)物質(zhì)制備母液的方法說(shuō)明如下。

  (1)大量元素。大量元素包括硝酸銨等用量較大的幾種化合物。制備時(shí),按表中排列的順序,以其10倍的用量,分別稱(chēng)出并進(jìn)行溶解,以后按順序混在一起,最后加蒸餾水,使其總量達(dá)到1升,此即大量元素母液。

  (2)微量元素。因用量少,為稱(chēng)量方便和精確起見(jiàn),應(yīng)配成100倍或1000倍的母液。配制時(shí),每種化合物的量加大100倍或1000倍,逐次溶解并混在一起,制成微量元素母液。

  (3)鐵鹽。鐵鹽要單獨(dú)配制。由硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O)5.57克和乙二胺四乙酸二鈉(Na—EDTA)7.45克溶于1升水中配成。每配1升培養(yǎng)基,加鐵鹽5毫升。

  (4)有機(jī)物質(zhì)。主要指氨基酸和維生素類(lèi)物質(zhì)。它們都是分別稱(chēng)量,分別配成所需的濃度(0.1~1.0毫克/毫升),用時(shí)按培養(yǎng)基配方中要求的量分別加入。

  (5)植物激素。最常用的有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。這類(lèi)物質(zhì)使用濃度很低,一般為0.01~10毫克/升?砂从昧康100倍或1000倍配制母液,配制時(shí)要單個(gè)稱(chēng)量,分別貯藏。

  配制植物生長(zhǎng)素時(shí),應(yīng)先按要求濃度稱(chēng)好藥品,置于小燒杯或容量瓶中,用1~2毫升0.1N(克當(dāng)量濃度)氫氧化鈉溶解,再加蒸餾水稀釋至所需濃度。配制細(xì)胞分裂素時(shí),應(yīng)先用少量0.5或1N的鹽酸溶解,然后加蒸餾水至所需量。

  以上各種混合液(母液)或單獨(dú)配制藥品,均應(yīng)放入冰箱中保存,以免變質(zhì)、長(zhǎng)霉。至于蔗糖、瓊脂等,可按配方中要求,隨稱(chēng)隨用。

 
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