編者按：在防治傳染性非典型肺炎醫(yī)源性交叉感染措施中，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全性管理及標(biāo)本的采集、運(yùn)送、檢測(cè)和處理的安全性是十分重要的環(huán)節(jié)。為此，中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)傳染性非典型肺炎實(shí)驗(yàn)室診斷專題委員會(huì)邀請(qǐng)有關(guān)專家召開了研討會(huì)，并制定了《檢驗(yàn)科SARS標(biāo)本檢測(cè)安全管理指南（暫行）》暫行辦法，供實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)人員在工作中參考。
傳染性非典型肺炎，世界衛(wèi)生組織（ＷＨＯ）稱為“嚴(yán)重急性呼吸道綜合征”（ＳＡＲＳ）。SARS是一種起病急、傳播快、病死率高、病因尚未完全確定的傳染病。根據(jù)SARS病原體的高傳染性和嚴(yán)重的致病性，應(yīng)定義為危險(xiǎn)組4病原體（高個(gè)體危險(xiǎn)，高群體危險(xiǎn)）。為科學(xué)有效地防護(hù)SARS院內(nèi)交叉感染，規(guī)范有序地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作，根據(jù)《傳染病防治法》、《醫(yī)學(xué)臨床實(shí)驗(yàn)室—醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的安全管理》（ 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)草案ISO/DIS 15190-2001），結(jié)合我國(guó)實(shí)際情況，特制定本《指南》。 建議作為臨床實(shí)驗(yàn)室在安全性管理及標(biāo)本的采集、運(yùn)送、檢測(cè)和處理中的參考。
一、安全教育與人員職責(zé)
1．科室主任：有責(zé)任對(duì)實(shí)驗(yàn)室全體員工進(jìn)行SARS相關(guān)知識(shí)培訓(xùn)和安全教育，使全體員工充分認(rèn)識(shí)SARS對(duì)人員安全的嚴(yán)重危害性和高度傳染性，具備自我防護(hù)意識(shí)和對(duì)SARS的預(yù)防、消毒、隔離的技術(shù)常識(shí)。為實(shí)驗(yàn)室提供信息和后勤保障。指定一位副主任負(fù)責(zé)科室預(yù)防、消毒、隔離措施的實(shí)施和監(jiān)控，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)反饋，并提出改進(jìn)措施。
2．安全員：在科主任的領(lǐng)導(dǎo)下，負(fù)責(zé)科室預(yù)防、消毒、隔離措施的指導(dǎo)、實(shí)施和監(jiān)控工作，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)反饋，并提出改進(jìn)措施。
3．全體員工：在科主任的領(lǐng)導(dǎo)和安全員的具體指導(dǎo)下，做好個(gè)人防護(hù)，在工作中認(rèn)真履行好對(duì)SARS的一切預(yù)防、消毒、隔離措施。
4．安全手冊(cè)：在實(shí)驗(yàn)室每個(gè)工作站都要準(zhǔn)備SARS專門的安全手冊(cè)。手冊(cè)應(yīng)包括對(duì)SARS病原體相關(guān)的危險(xiǎn)物處置，以及對(duì)工作區(qū)的通風(fēng)、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的消毒、清潔和滅活作出詳細(xì)說明。
5．健康管理：應(yīng)在科室營(yíng)造出團(tuán)結(jié)、奮進(jìn)、安定的氛圍，合理安排工作，充分保證每個(gè)員工良好的心態(tài)，健康的身體。
二、實(shí)驗(yàn)室安全要求
1．專用實(shí)驗(yàn)室或SARS工作區(qū)：建議有條件的醫(yī)院在發(fā)熱門診建立獨(dú)立的 SARS專用實(shí)驗(yàn)室，指定專人檢測(cè)。并（或） 在檢驗(yàn)科內(nèi)建立獨(dú)立的SARS專用實(shí)驗(yàn)室或SARS專用工作區(qū)，指定專人檢測(cè)。專用實(shí)驗(yàn)室或SARS專用工作區(qū)必須配有生物安全柜。
2．實(shí)驗(yàn)室管理：保持工作室整潔，物品放置有序。做到空氣流通清新，定時(shí)清掃，并做到衛(wèi)生用具專室專用。進(jìn)入專用實(shí)驗(yàn)室工作人員在處理病原體前要經(jīng)過專門培訓(xùn)，開展工作時(shí)不許外人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。
3．實(shí)驗(yàn)室消毒：（1）空氣消毒：室內(nèi)有人時(shí)，首選開窗通風(fēng)；不能開窗時(shí)（如沙塵天氣）安裝大功率排風(fēng)扇（盡量低位）強(qiáng)行通風(fēng)，并保證空氣的單向流通；另外，可采用乳酸加熱熏蒸，每日2次。室內(nèi)無人時(shí)可采用以下消毒方法：①低臭氧紫外線燈消毒：強(qiáng)度＞70 UW／cm3 ，照射60 min，每天２~３次。應(yīng)注意安裝適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)罩，避免醫(yī)務(wù)人員發(fā)生電光性眼炎和其他損傷。②化學(xué)消毒：含氯消毒劑：“健之素”1500 mg/L噴灑消毒，用量30 ml/m3,密閉30 min后通風(fēng)，每天3次（早、中、晚）。過氧乙酸：0.5%~1%過氧乙酸氣溶膠噴霧，用量30 ml/m3,密閉30 min后通風(fēng)，每天3次（早、中、晚）。過氧化氫：0.5%過氧化氫氣溶膠噴霧，用量30 ml/m3,密閉30 min后通風(fēng)，每天3次（早、中、晚）。③有條件的實(shí)驗(yàn)時(shí)可采用靜電吸附式空氣凈化器持續(xù)消毒，室內(nèi)有無人時(shí)均適用。(2) 地 面、墻壁、門窗：①墻壁、門窗消毒：用0.5%~1%過氧乙酸或“健之素”1500 mg/L噴霧。泥土墻吸液量為150~300 ml/m2，石灰墻為50~100 ml/m2，木板墻為10~50 ml/m2。對(duì)各種墻壁噴灑的消毒劑溶液不宜超過其吸液量。②地面消毒：用0.5%~1%過氧乙酸或“健之素”1500 mg/L噴霧。先由外向內(nèi)噴霧1次，用量為50~300 ml/m2，之后再由內(nèi)向外重復(fù)噴霧一次。以上各種方式的消毒處理，作用時(shí)間不少30 min。 (3)檢驗(yàn)臺(tái)、桌面、椅子及門把等物品：每日用0.2％~0.5%過氧乙酸或“健之素”1500 mg/L擦試1~2次。（4）檢測(cè)儀器：當(dāng)檢測(cè)儀器完成檢測(cè)后，儀器表面及進(jìn)樣口應(yīng)用2000 mg/L健之素擦拭數(shù)遍.之后再用沖洗劑擦拭或沖洗數(shù)遍，等待下次檢測(cè)。（5）檢測(cè)樣本用具：檢測(cè)樣本過程中所用一次性耗品在檢測(cè)完成后，經(jīng)10％漂白水浸泡消毒后放入廢物容器內(nèi)，再經(jīng)高壓消毒之后，作為廢品丟棄。操作完畢后，工作臺(tái)進(jìn)行消毒，所有用過的器具用消毒水消毒，再用龍頭水沖洗晾干，放好待用。（6）檢驗(yàn)報(bào)告單：檢驗(yàn)報(bào)告單需經(jīng)過消毒后方可發(fā)出，可用環(huán)氧乙烷氣體熏蒸，也可用微波爐消毒處理。具體方法是：先將被消毒的報(bào)告單用塑料袋密封，然后在塑料袋外用濕毛巾包裹，放入微波爐內(nèi)，用低、中火檔照射5 min。如有條件，建議設(shè)立專門的清潔區(qū)打印報(bào)告單。（7）安全離開實(shí)驗(yàn)室：離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)將手套，口罩等放置于有“生物廢品”標(biāo)記的容器，經(jīng)高壓消毒后丟棄，并將隔離衣物留在室內(nèi)，放在污物袋中消毒。檢測(cè)樣品不能擅自帶離實(shí)驗(yàn)室，如必須移出，應(yīng)妥善覆蓋，以防在轉(zhuǎn)移過程中污染環(huán)境和他人。實(shí)驗(yàn)室的物品固定使用，未經(jīng)消毒或隔離包裝不得移出實(shí)驗(yàn)室。所用物品需消毒后方可轉(zhuǎn)用。污染物品應(yīng)裝在雙層加厚堅(jiān)固污物袋，消毒后送出銷毀或洗消處理。工作人員在處理傳染性物品之后，離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手。（8）發(fā)生明顯或可能與傳染物接觸的濺溢及事故時(shí)，要立即向科主任報(bào)告，以作出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)評(píng)價(jià)，進(jìn)行監(jiān)測(cè)和治療。（9） 在使用紫外線照射消毒和各種化學(xué)消毒劑消毒過程中，應(yīng)特別注意防止消毒劑對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員和實(shí)驗(yàn)室儀器、物品的損害。
三、人員防護(hù)
1．基本要求：建議臨床檢驗(yàn)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室穿戴工作衣、鞋、帽、口罩、防護(hù)鏡及橡膠手套，著裝規(guī)范；檢驗(yàn)工作后，以0.1％有效氯消毒液泡手1~2 min后用肥皂流動(dòng)水洗手；離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)應(yīng)脫去隔離衣、鞋、帽、口罩及手套。進(jìn)入辦公室或?qū)W習(xí)室應(yīng)脫去工作衣； 禁止將食物、飲料帶入實(shí)驗(yàn)室。
2．為避免交叉污染，檢驗(yàn)人員原則上不直接進(jìn)入病區(qū)采集標(biāo)本，如必須進(jìn)入時(shí)，應(yīng)穿隔離衣加一次性防護(hù)服、戴20層棉紗口罩、防護(hù)鏡。接觸污物時(shí)需戴雙層橡膠手套。有條件的實(shí)驗(yàn)室建議檢測(cè)人員戴N95口罩。
3．接觸標(biāo)本者應(yīng)穿雙層隔離衣、戴12層以上棉紗口罩（最好N95口罩）、防護(hù)鏡。接觸污物時(shí)需戴雙層橡膠手套。
4．手與皮膚的消毒：可用0.2% 過氧乙酸溶液浸泡擦拭，也可用0.5%碘伏溶液（含有效碘5 000 mg/L）涂擦，作用1~3 min。當(dāng)手被血液、體液污染或可能污染后，應(yīng)立即消毒液浸泡后洗手。必要時(shí)用消毒液洗手。如果工作人員在操作過程中，意外被針刺、刀割或其他形式的割傷，以致傷口與病毒標(biāo)本直接接觸，或者帶病毒樣本碰到皮膚部位，必須用消毒肥皂洗傷口，再用清水沖洗，隨即向有關(guān)負(fù)責(zé)人報(bào)告。若標(biāo)本濺入或接觸到眼粘膜、口粘膜上，立即用滴眼液或漱口液清洗。
四、SARS 標(biāo)本的采集、運(yùn)輸、檢測(cè)、保存、處理
SARS臨床檢測(cè)標(biāo)本包括：體液、血液、分泌物排泄物及組織。 病毒標(biāo)本在標(biāo)本中存活時(shí)間長(zhǎng)于單獨(dú)存在時(shí)間，因此，一切取自SARS患者標(biāo)本均應(yīng)視為帶病毒強(qiáng)傳染性樣品，依據(jù)傳染病法處理。
1．標(biāo)本的采集：詳細(xì)登記有關(guān)病例的姓名、性別、年齡等基本信息，發(fā)病日期、采樣日期等。（1） 尿液標(biāo)本的采集：將2~5 ml 尿液裝入帶蓋收集容器內(nèi)，蓋緊蓋子，加注特別標(biāo)識(shí)（建議紅色SARS字樣），密封送檢。（2）分泌物的采集：體液標(biāo)本極具傳染性，原則上盡量減少此類標(biāo)本采集和檢測(cè)。① 咽拭子：用無菌濕棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，再將棉簽放入無菌試管中，加注特別標(biāo)識(shí)，密封送檢。② 痰液：讓患者直接將痰液咳入無菌平皿中，加注特別標(biāo)識(shí)，密封送檢。（3）糞便標(biāo)本的采集：將10~50 cm3的糞便裝入糞便杯或尿液收集容器內(nèi)，蓋緊蓋子，加注特別標(biāo)識(shí)，密封送檢。(4) 血液標(biāo)本的采集：建議血液標(biāo)本一律使用負(fù)壓靜脈采血，不使用末梢血，以免在采集過程中造成更大范圍的污染。標(biāo)本采集后加注特別標(biāo)識(shí)，密封送檢。
2．標(biāo)本的運(yùn)輸：送檢的標(biāo)本，要求密封包裝，放在專門為運(yùn)輸用的容器內(nèi)，加蓋，由專人運(yùn)送。運(yùn)送過程中嚴(yán)防遺撒。送入檢驗(yàn)科，由專人簽收。
3．標(biāo)本前處理：任何有可能產(chǎn)生細(xì)顆粒氣溶膠的操作步驟，標(biāo)本處理原則上在有合格證的生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，普通平流超凈臺(tái)不適于SARS 標(biāo)本的處理。處理標(biāo)本使用專用離心機(jī)，離心時(shí)應(yīng)使用密閉的離心機(jī)轉(zhuǎn)頭或密閉樣品杯。理想情況下，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)取出離心機(jī)轉(zhuǎn)頭或樣品杯。離心機(jī)使用完畢，立即用1 500 mg/L健之素進(jìn)行表面消毒。
4．標(biāo)本的檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室工作人員做好個(gè)人防護(hù)措施。標(biāo)本盡量集中專用區(qū)域內(nèi)由專人進(jìn)行檢測(cè)，以便于標(biāo)本、儀器、環(huán)境集中消毒和處理。盡量避免標(biāo)本分散到多個(gè)實(shí)驗(yàn)室。
（1）下列操作必須在生物安全3級(jí)（BSL3）或以上級(jí)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行：用細(xì)胞培養(yǎng)的方法分離病毒；收集或濃縮病毒或其培養(yǎng)產(chǎn)物；用活病毒或病毒的全基因接種動(dòng)物；咽拭子樣品的診斷檢測(cè)。
（2）下列操作必須在生物安全2級(jí)（BSL2）或以上級(jí)實(shí)驗(yàn)室或全排式生物安全柜中進(jìn)行：含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測(cè)；溶解、固定或用其他方法處理滅活的病毒和（或）無傳染性的的病毒基因片斷；常規(guī)的細(xì)菌和毒素檢查；可能產(chǎn)生氣溶膠的樣品處理；臨床樣品的包裝、分裝；離心管和離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的封閉和開啟。
5．檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告：以實(shí)現(xiàn)計(jì)算及網(wǎng)絡(luò)化的醫(yī)院建議采用網(wǎng)絡(luò)信息報(bào)告，由接收單位打出報(bào)告單，盡量不從有SARS 標(biāo)本污染的實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)出報(bào)告單。如確需由實(shí)驗(yàn)室發(fā)報(bào)告單，必須確保報(bào)告單消毒完全后再發(fā)放。
6．標(biāo)本檢測(cè)后處理：（1） 檢測(cè)后標(biāo)本（痰、咽拭子、糞便、尿液、血）以及檢測(cè)過程中所使用過的污染廢棄物（試管、痰盒、尿杯等）一律集中放入帶蓋專用污物桶內(nèi)，用2 000 mg/L健之素或0.5%過氧乙酸消毒劑覆蓋或混勻，作用10 min以上，然后高壓30 min，取出后，直接焚燒。每4 h消毒處理1次。(2) 廢液：所有廢液（包括儀器檢測(cè)后廢液）都用2 500 mg/L健之素浸泡1 h以上，高壓，再送到醫(yī)院污水站合理消毒處理。注意保證污水氯余量大于6.5 mg/L.
7．標(biāo)本的保存：分析前標(biāo)本根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要合理保存。分析后已發(fā)出報(bào)告的標(biāo)本原則上不保存；如有特殊需要保存的標(biāo)本，應(yīng)保存在加鎖的專用冰箱，專人管理并作特殊紀(jì)錄。杜絕將SARS 標(biāo)本放入普通冰箱內(nèi)，以免造成其他物品的污染。
注：參與本《指南》制定的專家有（按單位筆劃排序）：上海復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院 潘伯申教授，衛(wèi)生部中日友好醫(yī)院 張遠(yuǎn)春 主任、于雪瑩博士，北京大學(xué)人民醫(yī)院張正教授，北京地壇醫(yī)院 趙輝、肖元樸教授，北京佑安醫(yī)院 閔福援教授，北京軍區(qū)總院 王北寧主任，江蘇省人民醫(yī)院 童明慶主任，解放軍總醫(yī)院 叢玉隆、秦小玲教授，解放軍第三0二醫(yī)院 毛遠(yuǎn)麗教授。
