RNA干涉(RNA interference, RNAi)作為研究基因功能的一種有效方法已經(jīng)被全世界范圍內(nèi)的研究者廣泛接受。作為基因抑制的一種有力工具,與其他的方法相比,RNAi的操作過程更簡(jiǎn)單,成功率更高。通過RNAi,你可以實(shí)現(xiàn)對(duì)特定的mRNA的選擇性降解,進(jìn)而抑制其翻譯過程。例如,Eg5是有絲分裂正常進(jìn)行所必需的蛋白,當(dāng)用RNAi方法抑制其表達(dá)后,在細(xì)胞的有絲分裂過程中就會(huì)產(chǎn)生不正常的三極紡錘體(圖1),這一結(jié)果表明,RNAi技術(shù)可以用來確定參與有絲分裂過程的蛋白質(zhì),同時(shí)證明了相關(guān)基因的功能。
在對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的研究中,最常用的RNAi方法是向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染短的雙鏈RNA分子(double-standed RNA,dsRNA),又稱為小的干涉RNA分子(short interfering, siRNA)。但是,在應(yīng)用siRNA的實(shí)驗(yàn)中,存在著以下三個(gè)方面的潛在問題,或者說是挑戰(zhàn):
· siRNA會(huì)引起非特異性的細(xì)胞壓力反應(yīng)(stress response),導(dǎo)致細(xì)胞的死亡或改變?cè)S多基因的正常表達(dá)水平,致使對(duì)RNA干涉結(jié)果的分析變的很困難;
· siRNA的正負(fù)鏈的任何可能的非特異的同源性都要盡力避免,否則目標(biāo)mRNA的翻譯就不會(huì)被有效抑制;
· dsRNA在細(xì)胞培養(yǎng)以及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定時(shí)間都比較短。
Stealth RNAi是新一代的RNA干涉分子,解決了以上所提到的問題,同時(shí)也保持了RNAi的高效性。它是經(jīng)過化學(xué)修飾的dsRNA分子,有效地消除了細(xì)胞的壓力反應(yīng),使實(shí)驗(yàn)的結(jié)果更加清晰;這種修飾也提高了其靶向特異性及其穩(wěn)定性。
Stealth RNAi的優(yōu)點(diǎn)概述如下:
· 消除或減少了細(xì)胞的非特異性壓力反應(yīng);
· 提高了靶向特異性;
· 提高了在血液中的穩(wěn)定性。
使用Stealth RNAi可以得到更加清晰的結(jié)果,加速基因功能的研究進(jìn)程!