轉(zhuǎn)錄依賴的擴(kuò)增系統(tǒng)(Transcript-based amplification system，TAS)，是Kwen等人于1989年研究報(bào)道的，主要用于擴(kuò)增RNA合成A、B引物，引物A的3'末端與待擴(kuò)增RNA互補(bǔ)，其5'端有T7RNA多聚酶的啟動(dòng)子信息.逆轉(zhuǎn)錄酶以A引物為起點(diǎn)合成cDNA;引物B與此cDNA3'端互補(bǔ)合成cDNA第二鏈.逆轉(zhuǎn)錄酶除具有逆轉(zhuǎn)錄活性外，還有DNA多聚酶的活性及RNaseH的活性.T7RNA多聚酶又以此雙鏈DNA為模板.轉(zhuǎn)錄出與待擴(kuò)增RNA一樣的RNA，這些RNA又可作為下輪反應(yīng)的模板.T7RNA多聚酶的催化效率很高，一個(gè)模板可轉(zhuǎn)錄10～103個(gè)RNA拷貝，因而反應(yīng)液中待檢RNA的數(shù)量以10的指數(shù)方式擴(kuò)增.
TAS的主要特點(diǎn)是擴(kuò)增效率高，因?yàn)槠銻NA拷貝數(shù)呈10的指數(shù)方式增加，只需6個(gè)循環(huán)靶序列的拷貝數(shù)就能達(dá)到2×106.它的另一個(gè)特點(diǎn)是特異性高，由于TAS只能進(jìn)行6次溫度循環(huán)，錯(cuò)摻率低，加之用葡聚糖珠夾心雜交，因而特異性也高.雖然本法有較高的特異性和敏感性，但其循環(huán)過程復(fù)雜，需重復(fù)加入逆轉(zhuǎn)錄酶和T7RNA多聚酶，有待進(jìn)一步研究.
TAS的主要特點(diǎn)是擴(kuò)增效率高，因?yàn)槠銻NA拷貝數(shù)呈10的指數(shù)方式增加，只需6個(gè)循環(huán)靶序列的拷貝數(shù)就能達(dá)到2×106.它的另一個(gè)特點(diǎn)是特異性高，由于TAS只能進(jìn)行6次溫度循環(huán)，錯(cuò)摻率低，加之用葡聚糖珠夾心雜交，因而特異性也高.雖然本法有較高的特異性和敏感性，但其循環(huán)過程復(fù)雜，需重復(fù)加入逆轉(zhuǎn)錄酶和T7RNA多聚酶，有待進(jìn)一步研究.
