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樣品RNA的分離與純化

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-02

  含106個(gè)細(xì)胞液加等量純化溶液[4mol/L胍基硫氰酸鹽,25mmol/L檸檬酸pH7.0,0.5%肌氨酸(sarcosyl),0.1mol/l 2-巰基乙醇]。總體積為細(xì)胞沉淀4-5倍,混勻。加0.1體積2ml/L乙酸鈉(pH4.1),1體積酚(重蒸水上封),0.2體積CIAA,混勻器劇烈混合10秒鐘。冰水浴15分鐘。10000xg4℃,20分鐘。離心(不用剎車)。小心取出上清液。加等量丙酮(或2倍乙醇),-20℃,60分鐘以上。10000xg,4℃,20分鐘離心。棄上清液。用1.5ml離心管約加0.3ml純化溶液,重復(fù)3)步驟,離心10分鐘,棄上清液。加75%乙醇,10000xg,4℃,10分鐘離心。棄上清液。真空干燥15分鐘,備用。

 

 
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