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IEF/SDS-PAGE雙向電泳

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-02
1975年O′Farrall等人根據(jù)不同組份之間的等電點差異和分子量差異建立了IEF/SD S-PAGE雙向電泳。其中IEF電泳(管柱狀)為第一向,SDS-PAGE為第二向(平板)。在進行第一向IEF電泳時,電泳體系中應加入高濃度尿素、適量非離子型去污劑NP-40。蛋白質(zhì)樣品中除含有這兩種物質(zhì)外還應有二硫蘇糖醇以促使蛋白質(zhì)變性和肽鏈舒展。
  IEF電泳結(jié)束后,將圓柱形凝膠在SDS-PAGE所應用的樣品處理液(內(nèi)含SDS、β-巰基乙醇)中振蕩平衡,然后包埋在SDS-PAGE的凝膠板上端,即可進行第二向電泳。
  IEF/ SDS-PAGE雙向電泳對蛋白質(zhì)(包括核糖體蛋白、組蛋白等)的分離是極為精細的,因此特別適合于分離細菌或細胞中復雜的蛋白質(zhì)組分。
 
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