（1）將200mg組織在冰浴條件下用消毒剪刀充分剪碎，加4ml 1×RSB緩沖液（10mmol/L Tris, pH7.4;10mmol/l NaCl;25mmol/L EDTA,pH7.4）放入10ml帶蓋的塑料管中。
�。�2）加SDS至濃度為1%（可加0.4ml10%SDS），混勻。由于DNA從核中釋放出來(lái)，樣品變得粘稠。
�。�3）加10mg/ml蛋白酶k 44μl，終濃度為100μl/ml，37℃保溫1～3d，直到組織完全解體。中間可振動(dòng)樣品管幾次。加0.4ml 5mol/L NaCl。
�。�4）用等體積飽和酚、1/2體積飽和酚和1/2體積氯仿-異戊醇及等體積氯仿-異戊醇（24：1）各抽提一次，3000rpm離心5min，用大口鈍緣吸管小心吸取上層水相。
�。�5）加2.5倍體積預(yù)冷無(wú)水乙醇沉淀DNA。用一玻璃棒收集白色纖維絲狀的大片段DNA，并移入一新管，吸干DNA中的無(wú)水乙醇。
�。�6）DNA溶于4ml 0.1×SSC中，4℃過(guò)夜可作進(jìn)一步純化。
�。�7）加20μl RNase A(10mg/ml),37 ℃保溫5h。加0.4ml 5mol/L NaCl。
�。�8）同上法用飽和酚、氯仿-異戊醇抽提，乙醇沉淀離心，棄上清。
（9）75%乙醇洗滌2次，離心，棄上清，真空抽干。適量1×TE溶解，保存在4℃。
�。�2）加SDS至濃度為1%（可加0.4ml10%SDS），混勻。由于DNA從核中釋放出來(lái)，樣品變得粘稠。
�。�3）加10mg/ml蛋白酶k 44μl，終濃度為100μl/ml，37℃保溫1～3d，直到組織完全解體。中間可振動(dòng)樣品管幾次。加0.4ml 5mol/L NaCl。
�。�4）用等體積飽和酚、1/2體積飽和酚和1/2體積氯仿-異戊醇及等體積氯仿-異戊醇（24：1）各抽提一次，3000rpm離心5min，用大口鈍緣吸管小心吸取上層水相。
�。�5）加2.5倍體積預(yù)冷無(wú)水乙醇沉淀DNA。用一玻璃棒收集白色纖維絲狀的大片段DNA，并移入一新管，吸干DNA中的無(wú)水乙醇。
�。�6）DNA溶于4ml 0.1×SSC中，4℃過(guò)夜可作進(jìn)一步純化。
�。�7）加20μl RNase A(10mg/ml),37 ℃保溫5h。加0.4ml 5mol/L NaCl。
�。�8）同上法用飽和酚、氯仿-異戊醇抽提，乙醇沉淀離心，棄上清。
（9）75%乙醇洗滌2次，離心，棄上清，真空抽干。適量1×TE溶解，保存在4℃。
