(一)RIA的優(yōu)點(diǎn)
放射免疫分析具有許多其它分析方法無(wú)可比擬的優(yōu)點(diǎn)。它既具有免疫反應(yīng)的高特異性,又具有放射性測(cè)量的高靈敏度,因此能精確測(cè)定各種具有免疫活性的極微量的物質(zhì)。
1.靈敏度高一般化學(xué)分析法的檢出極限為10-3~10-6g,而RIA通常為10-9(毫微克,ng)、10-12g(微微克,pg),甚至10-15g(毫微微克,fg)、10-18g(微微微克,ag)。
2.特異性強(qiáng)由于抗原—抗體免疫反應(yīng)專一性強(qiáng),所被測(cè)物一定是相應(yīng)的抗原。良好的特異性抗體,能識(shí)別化學(xué)結(jié)構(gòu)上非常相似的物質(zhì),甚至能識(shí)別立體異構(gòu)體。
3.應(yīng)用范圍廣據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),目前至少已有300多種生物活性物質(zhì)已建立了RIA。它幾乎能應(yīng)用于所有激素的分析(包括多肽類和固醇類激素),還能用于各種蛋白質(zhì)、腫瘤抗原、病毒抗原、細(xì)菌抗原、寄生蟲(chóng)抗原以及一些小分子物質(zhì)(如環(huán)型核苷酸等)和藥物(如地高辛、毛地黃甙等)的分析,應(yīng)用范圍還在不斷擴(kuò)展。近年來(lái)由于小分子半抗原制備抗體的技術(shù)有很大的發(fā)展,有人預(yù)測(cè)幾乎所有的生物活性物質(zhì),只要其含量不低于RIA的探測(cè)極限,都可建立適當(dāng)?shù)腞IA法。
4.操作簡(jiǎn)便RIA所需試劑品種不多,可制成配套試劑盒;加樣程序簡(jiǎn)單一次能分析大量標(biāo)本,標(biāo)本用量也少;反應(yīng)時(shí)間不長(zhǎng);測(cè)量和數(shù)據(jù)處理易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化;RIA屬體外分析技術(shù),對(duì)患者無(wú)任何輻射危害。
。ǘ㏑IA的缺點(diǎn)
1.只能以免疫反應(yīng)測(cè)得具有免疫活性的物質(zhì),對(duì)具有生物活性百失去免疫活性的物質(zhì)是測(cè)不出的。因此RIA結(jié)果與生物測(cè)定結(jié)果可能不一致。
2.由于使用了生物試劑,其穩(wěn)定性受多種因素影響,需要有一整套質(zhì)量控制措施來(lái)確保結(jié)果的可靠性。
3.靈敏度受方法本身工作原理的限制,對(duì)體內(nèi)某些含量特別低的物質(zhì)尚不能測(cè)定。
4.由于放射免疫分析是競(jìng)爭(zhēng)性的反應(yīng),被測(cè)物和標(biāo)準(zhǔn)物都不能全部參與反應(yīng),測(cè)得的值是相對(duì)量而非絕對(duì)量。
5.存在放射線輻射和污染等問(wèn)題。
盡管RIA存在以上缺點(diǎn),但它畢竟是定量分析方法的先進(jìn)技術(shù)。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,放射免疫分析技術(shù)將會(huì)得到更加廣泛、更加深入的發(fā)展。