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基因槍法 particle bombardment

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06

  該法又稱粒子轟擊(particle bombardment),高速粒子噴射技術(shù)(High-velocity particle microprojection)或基因槍轟擊技術(shù)(gene gun bombardment),是由美國Comel大學(xué)生物化學(xué)系John.C.Santord等于1983年研究成功。并在1987年,Vlein首先報道了應(yīng)用此技術(shù)將TMV(煙草花葉病毒)RNA吸附到鎢粒表面,轟擊洋蔥表皮細(xì)胞,經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)病毒RNA能進(jìn)行復(fù)制,并以同樣技術(shù)將CAT(Chloraphericol acetyltransferase氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因)基因?qū)胙笫[表皮細(xì)胞,F(xiàn)在,該技術(shù)已在煙草、水稻、小麥、黑麥草、甘蔗、棉花、大豆、菜豆、洋蔥、番木瓜、甜橙、葡萄等多種作物上成功。

  這一方法是依靠一種基因槍來幫助導(dǎo)入外源基因;驑尭鶕(jù)動力系統(tǒng)可分為火藥引爆、高壓放電和壓縮氣體驅(qū)動三類。其基本原理是通過動力系統(tǒng)將帶有基因的金屬顆粒(金;蜴u粒),將DNA吸附在表面,以一定的速度射進(jìn)植物細(xì)胞,由于小顆粒穿透力強(qiáng),故不需除去細(xì)胞壁和細(xì)胞膜而進(jìn)入基因組,從而實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的目的。它具有應(yīng)用面廣,方法簡單,轉(zhuǎn)化時間短,轉(zhuǎn)化頻率高,實(shí)驗(yàn)費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)。對于農(nóng)桿菌不能感染的植物,采用該方法可打破載體法的局限。基因槍的轉(zhuǎn)化頻率與受體種類、微彈大小、轟擊壓力、制止盤與金顆粒的距離、受體預(yù)處理、受體轟擊后培養(yǎng)有直接關(guān)系。

 
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