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點(diǎn)樣法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06

點(diǎn)樣法在多聚物的設(shè)計(jì)方面與原位合成技術(shù)相似。只是合成工作用傳統(tǒng)的DNA、多肽合成儀或PCR擴(kuò)增或體內(nèi)克隆等方法完成。大量制備好的核酸探針、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自動化微量點(diǎn)樣裝置將其以較高密度互不干擾地印點(diǎn)于經(jīng)過特殊處理的玻片、尼龍膜、硝酸纖維素膜上,并使其與支持物牢固結(jié)合。支持物需預(yù)先經(jīng)過特殊處理,例如多聚賴氨酸或氨基硅烷等。亦可用其它共價(jià)結(jié)合的方法將這些生物大分子牢牢地附著于支持物上,F(xiàn)在已經(jīng)有比較成型的點(diǎn)樣裝置出售,例如美國Biodot公司的“噴印”儀以及Cartesian Technologies公司的Pix-Sys NQ/PA系列“打印”儀。這些自動化儀器依據(jù)所配備的“打印”或“噴印”針將生物大分子從多孔板吸出直接“打印”或“噴印”于芯片片基上。“打印”時(shí)針頭與芯片片基表面發(fā)生接觸而“噴印”時(shí)針頭與片基表面保持一定的距離[1]。所以,“打印”儀適宜制作較高密度的微陣列(例如2500點(diǎn)/cm2),“噴印”法由于“噴印”的斑點(diǎn)較大,所以只能形成較低密度的探針陣列,通常400點(diǎn)/cm2。點(diǎn)樣法制作芯片的工藝比較簡單便于掌握、分析設(shè)備易于獲取,適宜用戶按照自己的需要靈活機(jī)動地設(shè)計(jì)微點(diǎn)陣,用于科研和實(shí)踐工作。 目前,除了在生物芯片研制方面享有盛譽(yù)的Affymetrix公司等個別公司使用原位合成技術(shù)制造芯片外,大多中小型公司普遍采用點(diǎn)樣技術(shù)制作生物芯片。

 

 
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