ELISA檢測(cè)試劑盒使用指南 | ||
步驟 | 常見(jiàn)問(wèn)題 | 解決方案 |
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 | 1 加樣器不準(zhǔn)確;尤其10ul以下的加樣器,對(duì)結(jié)果影響極大; | 1 校正加樣器;10ul以下加樣器最好采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國(guó)等); |
2 保溫設(shè)備不良; | 2 仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳; | |
3 洗滌用水不規(guī)范。 | 3 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來(lái)水、礦泉水等。 | |
4 認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書。 | ||
樣品加樣 | 1 加樣不準(zhǔn)確; | 1 加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。 |
2 沒(méi)有混勻。 | 2 加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。 | |
洗滌 | 洗滌不徹底 | 1 每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘; |
2 選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分; | ||
3 可選用塑料洗滌瓶。 | ||
加酶反應(yīng) | 漏加 | 滴加后,認(rèn)真檢查各孔 |
結(jié)果判斷 | 1 包括陰性對(duì)照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深; | 1 可能是洗滌不充分;加樣過(guò)量;溫育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)溫度過(guò)高;按說(shuō)明書重新操作。如無(wú)改善,可與生產(chǎn)廠家聯(lián)系; |
2 包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi),各孔均無(wú)顯色; | 2 可能是漏加樣本或酶液;溫育時(shí)間過(guò)短溫度過(guò)低;試劑保存不當(dāng)活性下降;按說(shuō)明書重新操作。如無(wú)改善,可與生產(chǎn)廠家聯(lián)系; | |
3 陽(yáng)性對(duì)照不顯色,而其它樣本顯色正常; | 3 陽(yáng)性對(duì)照漏加、錯(cuò)加或失效。重新操作。如無(wú)改善,可與廠家聯(lián)系,索要對(duì)照品; | |
4 有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽(yáng)性困難。 | 4 重新操作。最好使用酶標(biāo)儀,測(cè)定光吸收度,按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷。 | |
試劑保存 | 保存不規(guī)范 | 一定要在2-8℃存放。不得過(guò)高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。 |
對(duì)照品 | 對(duì)照品為凍干品 | 按對(duì)照管標(biāo)示,加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶,充分溶解混勻?砂凑f(shuō)明書使用。 |