移液槍在實驗室不可或缺,
移液槍使用訣竅
移液槍是實驗操作上不可缺少的工具,對于頂尖高手而言,重要的就是實驗的誤差最小,重復(fù)再現(xiàn)性好,那就要注意正確移液槍使用。
1.影響移液槍精度因素
(1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發(fā)生誤差 (2)氣密性:tip和槍體的結(jié)合部,以及槍內(nèi)柱體之間的長期磨損,造成誤差 (3)吸速:容易造成tip內(nèi)氣泡產(chǎn)生,而且會污染槍頭 (4)試劑的揮發(fā):吸揮發(fā)性高的試劑時,蒸汽進(jìn)入槍頭,內(nèi)壓增高,結(jié)果在壓出液體時,壓力變大,而產(chǎn)生誤差。解決辦法:反復(fù)抽吸4-5次就可改善。
2.具體使用方法
更換tip法:最精確。 (1)調(diào)節(jié)旋鈕到所需刻度位置,訣竅:首先可略超過一些,再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度,避免人為誤差。
(2)插上tip:無菌操作時,要注意動作迅速正確,不能用手碰tip,動作的力度要保持一致,禁止廢動作。普通操作時,可用拇指食指上緊,但手不能碰tip尖端處。
(3)指壓到第一段,tip尖端接觸試劑。白色tip進(jìn)到液面1mm一下,黃色tip2-3mm,藍(lán)色tip2-4mm,避免液壓的影響造成的誤差。
(4)緩慢吸試劑,禁止速度過快,液體進(jìn)入槍頭。
(5)移出tip后,先在容器內(nèi)壁輕輕靠住,使tip外壁液體流下。
(6)將tip貼在目標(biāo)容器內(nèi)壁,輕輕按到第一段,壓出液體。
(7)tip尖端在容器內(nèi)壁略上滑動,保留尖端少量液體,移出目標(biāo)容器,手指卸掉tip,注意不要使試劑濺出。
一只tip分注法:不適用于揮發(fā)性,有毒性試劑。
(1)同上述A-D,移出液面后,先緩慢按到第一段,在用力按到第二段,將試劑全壓出。
(2)同上述C,緩慢吸出液體。
(3)在目標(biāo)容器液體上空,壓出試劑到第二段,注意壓的力度要和A相同,還應(yīng)注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段,可重復(fù)上述操作。達(dá)到目標(biāo)容器原有液體不污染tip的目的。
轉(zhuǎn)移數(shù)ul的貴重試劑時的方法:
(1)同上述A-D,移出液面后,在容器內(nèi)壁輕按幾下,使外壁液體流下。白色tip進(jìn)到液面1mm以下,這最重要。
(2)tip尖端浸入目標(biāo)容器的液面下,緩慢壓到第一段。
(3)松開,返回到第一段,重新吸入液體,反復(fù)4-5次,,洗凈tip內(nèi)壁液體。
(4)將tip尖端移出液面,在內(nèi)壁輕輕靠住,壓出液體到第二段。
移液六部曲
1.裝吸頭
移液器套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉(zhuǎn)即可。
錯誤操作:用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。
2.量程設(shè)定
操作之前請先選擇正確的移液器,移液器可在10-100%量程范圍內(nèi)操作,但在10%量程處操作對于移液技巧要求高,故推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。
量程調(diào)節(jié):當(dāng)由小量程調(diào)節(jié)至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當(dāng)由大量程調(diào)節(jié)至小量程時,直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。
3.潤洗
用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次,潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面,保證操作的一致性。
注意:高溫或者低溫液體請不要潤洗!
4.吸頭浸入角度
吸液時盡量保持垂直狀態(tài),傾斜角度不能超過20°。
5.吸頭浸入深度
6.吸頭浸入時間
吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開,這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
7.吸液速度
勻速連貫移液,控制好移液速度,太快會造成噴液,液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部,污染活塞等部件。
8.排液及吹液
先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進(jìn)行吹液。 排液四種方式:
9.手溫
移液器不宜長時間握在手里,不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。
移液器錯誤操作及處理方法
做為液體操作中最常用的手動可調(diào)精密移液器,在使用過程中有些錯誤的操作會給操作本身帶來誤差,有些會造成機器的損壞等,在這里簡單總結(jié)如下:
錯誤:裝配吸頭時用移液器反復(fù)撞擊吸頭,以上緊
正確:插入吸頭,左右輕轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)上緊吸頭
分析:撞擊會造成移液器內(nèi)部齒輪組合的松動,長期操作會對移液器的精確性造成影響。
錯誤:吸頭與移液器不匹配,影響氣密性正確:選用與移液器匹配的,有質(zhì)量保證的吸頭
分析:吸頭的不匹配,主要表現(xiàn)為對氣密性的影響。會直接影響移液器的精確性,通常會移液操作會小于設(shè)定量。
錯誤:吸液時,移液器傾斜吸液
正確:垂直吸液
分析:傾斜的狀態(tài)會造成氣壓面的改變。會對移液精度造成影響。
錯誤:吸頭內(nèi)含有未打出的液體時,移液器平置于桌面
正確:將移液器垂直掛在移液器支架上
分析:吸頭內(nèi)含有未打出液體,移液器平放之后液體有可能會流到移液器體內(nèi)部,這會對移液器內(nèi)部組件造成影響,嚴(yán)重的回造成損壞,較差污染等情況的發(fā)生。
錯誤:用大量程的移液器移取小體積的液體
正確:移液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內(nèi)才符合不準(zhǔn)確度和不精確度的要求
分析:因為空氣墊的存在,是造成移液器不準(zhǔn)確度的主要原因。移液器的選擇應(yīng)該是最大量程,最接近目的液體轉(zhuǎn)移量的選型原則。
錯誤:吸取具有強揮發(fā)性的液體
正確:不建議用普通移液器做強揮發(fā)型液體轉(zhuǎn)移
分析:如果一定要移取強揮發(fā)性的液體,應(yīng)該在移液結(jié)束后立刻拆開移液器,讓蒸汽揮發(fā),同時,建議使用外置活塞式移液器。
錯誤:吸液速度和放液速度過快
正確:慢吸慢放
分析:快吸對于1mL及以上量程的移液器,很容易造成液體上沖。過快的放液會增加液體的殘留量。
反復(fù)操作難免有失誤,
優(yōu)秀的檢驗人員
都是從正確使用移液槍開始的。
我們一起來學(xué)習(xí)一下吧!