運(yùn)用PCR方法檢測肉毒神經(jīng)毒素基因以鑒定肉毒梭菌,只需2~3天。特別是基層CDC在購買不到試驗(yàn)動物的情況下,PCR所具有快速、簡便、特異型強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)無疑可作為肉毒中毒的輔助檢測手段和一項(xiàng)有價值的指標(biāo)。
P.Fach(1993)報道,應(yīng)用PCR可檢出食品樣品的肉毒梭菌A型菌株。趙晉、郭宗琪、楊小蓉等(2006)報道,應(yīng)用PCR可檢出肉毒食物中毒的病原菌。用1對人工合成的寡核苷酸引物擴(kuò)增A型、B型、C型、D型、E型、F型和G型肉毒神經(jīng)毒素基因的一段264bp的DNA片段,并對兩個食物中毒樣品的增菌產(chǎn)毒培養(yǎng)液及分離的菌株進(jìn)行檢測,結(jié)果從食物中毒樣品中檢出了肉毒梭菌。從而證明PCR方法能快速、準(zhǔn)確地鑒定肉毒食物中毒樣品中病原菌。
PCR診斷還存在如下一些問題。如只能檢測肉毒梭菌,當(dāng)中毒食品中只有毒素而無肉毒梭菌存在時,PCR的檢測沒有診斷價值;其次,按照肉毒食物中毒的判定依據(jù):WS/T83-1996“肉毒梭菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)和處理原則”,并未將PCR方法納入其中。因此,在實(shí)際工作中,PCR方法不能取代GB/T4789.12-2003,只能作為一種有價值的輔助檢測方法。