蛋白濃度測定的方法有很多,但每種方法都有其特點(diǎn)和局限性,因而需要在了解各種方法的基礎(chǔ)上根據(jù)不同情況選用恰當(dāng)?shù)姆椒,以滿足不同的要求。例如凱氏定氮法結(jié)果精確,但操作復(fù)雜,用于大批量樣品的測試則不太合適;Lowry法精確度較高,但是比較費(fèi)時(shí),且每步的時(shí)間要求相對(duì)嚴(yán)格;Bradford法靈敏簡便,但易受去垢劑的影響;BCA法以其試劑穩(wěn)定,抗干擾能力強(qiáng),結(jié)果穩(wěn)定,靈敏度高而受歡迎。
4. 瓊脂糖凝膠電泳:
原理:通過比較待測樣品與已知濃度標(biāo)準(zhǔn)品的相對(duì)強(qiáng)度,估算待測樣品中蛋白質(zhì)的含量。
優(yōu)點(diǎn):
1. 瓊脂糖凝膠電泳測蛋白濃度簡單易行,不需要昂貴的儀器設(shè)備。
2. 可以同時(shí)測定多個(gè)樣品的蛋白質(zhì)濃度。
3. 可以測定不同分子量的蛋白質(zhì)濃度。
缺點(diǎn):
1. 瓊脂糖凝膠電泳測蛋白濃度的準(zhǔn)確性不如其他方法,誤差較大。
2. 測定時(shí)間較長,需要等待凝膠電泳完成。
3. 不能測定低濃度的蛋白質(zhì),因?yàn)闇y定靈敏度較低。