測(cè)定方法
試劑盒,通常采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行測(cè)定。具體步驟如下:
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品。
加樣:設(shè)空白孔和待測(cè)樣品孔,加入樣品稀釋液和待測(cè)樣品。
溫育:用封板膜封板后置于適宜溫度(如37℃)溫育一定時(shí)間(如30分鐘)。
洗滌:揭掉封板膜,棄去液體,加入洗滌液洗滌多次。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外)。
再次溫育和洗滌:重復(fù)溫育和洗滌步驟。
顯色:加入顯色劑A和B,避光顯色一定時(shí)間(如15分鐘)。
終止:加入終止液終止反應(yīng)。
測(cè)定:在酶標(biāo)儀上,通常選擇450nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔的吸光度(OD值)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度和對(duì)應(yīng)的OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后根據(jù)待測(cè)樣品的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對(duì)應(yīng)的濃度。
試劑盒,通常采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行測(cè)定。具體步驟如下:
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品。
加樣:設(shè)空白孔和待測(cè)樣品孔,加入樣品稀釋液和待測(cè)樣品。
溫育:用封板膜封板后置于適宜溫度(如37℃)溫育一定時(shí)間(如30分鐘)。
洗滌:揭掉封板膜,棄去液體,加入洗滌液洗滌多次。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外)。
再次溫育和洗滌:重復(fù)溫育和洗滌步驟。
顯色:加入顯色劑A和B,避光顯色一定時(shí)間(如15分鐘)。
終止:加入終止液終止反應(yīng)。
測(cè)定:在酶標(biāo)儀上,通常選擇450nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔的吸光度(OD值)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度和對(duì)應(yīng)的OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后根據(jù)待測(cè)樣品的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對(duì)應(yīng)的濃度。