購買前
【方法一】向廠家索要或從其網(wǎng)站下載說明書,查找ELISA的性能指標(biāo):準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。一般來說,除了校準(zhǔn)不一定每份說明書都有外,其余的指標(biāo)一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的,可能沒有準(zhǔn)確度這個指標(biāo))。如果無法提供這些性能指標(biāo),則說明該試劑盒可能是假貨,或者試劑盒開發(fā)過程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn),有可能無法檢測出真實的樣本值。
【方法二】對于夸大ELISA涵蓋的指標(biāo)的范圍,尤其是不常見的種屬,可先去國際ELISA試劑盒供應(yīng)商(如eBioscience、R&D)網(wǎng)站上搜索,如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒,則有可能是假貨,需要小心謹(jǐn)慎。
【方法三】將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站等會有打假曝光臺。
購買后
【方法一】檢查說明書、包裝盒的質(zhì)量,通常偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會比較差。其次仔細(xì)閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。
【方法二】
、.利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
(1)將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody:antigen=1:2的混合孵育液
(2)37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3)后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物
(4)實驗完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5)如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
Ⅱ.如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1)取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2)一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(3)另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4)后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5)實驗完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6)如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。