細(xì)胞周期檢測(cè)的原理:
PI法是經(jīng)典的周期檢測(cè)方法。PI為插入性核酸熒光染料,能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA雙鏈螺旋的堿基之間與之結(jié)合,其結(jié)合的量與DNA的含量成正比例關(guān)系,用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,就可以得到細(xì)胞周期各個(gè)階段的DNA分布狀態(tài),從而計(jì)算出各個(gè)期的百分含量。PI染色后,假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2,正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1-2之間。
常用的細(xì)胞染色方法有:
1.簡(jiǎn)單染色法,常用堿性染料如美藍(lán)等進(jìn)行簡(jiǎn)單染色;
2.革蘭氏染色法,主要包括結(jié)晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復(fù)染四個(gè)過(guò)程;
3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍(lán)組成;
4.吉姆薩染色法,吉姆薩染色原理與結(jié)果和瑞特染色法基本相同;
5.細(xì)胞免疫熒光染色法,免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結(jié)合。