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【操作技巧】光潔平整不產(chǎn)氣泡的血平板怎么制作?小技巧送您!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2021-05-14  來源:食品微生物檢測公眾號
核心提示:血平板培養(yǎng)基血瓊脂平板培養(yǎng)基血瓊脂平板培養(yǎng)基,主要用于鏈球菌及其他苛養(yǎng)菌(對生長環(huán)境、營養(yǎng)要求較苛刻的細(xì)菌)的分離、培養(yǎng)
 血平板培養(yǎng)基

 


 

血瓊脂平板培養(yǎng)基

血瓊脂平板培養(yǎng)基,主要用于鏈球菌及其他苛養(yǎng)菌(對生長環(huán)境、營養(yǎng)要求較苛刻的細(xì)菌)的分離、培養(yǎng)或用于細(xì)菌溶血現(xiàn)象的觀察(如金黃色葡萄球菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌等)。


 


1.成分

其中的蛋白胨和牛肉粉主要提供細(xì)菌生長所需要的碳源、氮源、氨基酸及維生素。氯化鈉維持培養(yǎng)基中的滲透壓,瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血一方面提供一些特殊的生長因子,另一方面用于觀察溶血反應(yīng)。

 

2.制法

根據(jù)要求選擇取不同的學(xué)瓊脂平板基礎(chǔ),如營養(yǎng)瓊脂、豆粉瓊脂或哥倫比亞瓊脂(用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn))等,加蒸餾水溶解后,高壓滅菌。冷卻至50~55℃,加入一定量的羊血,緩慢混勻后傾注平板。注意一定要冷卻后再加入羊血,否則紅細(xì)胞有可能會破碎。

 

3.制備光潔平整不產(chǎn)氣泡的血平板技巧

自制的血平板有時會出現(xiàn)氣泡,坑洼凹凸不平的現(xiàn)象,如圖所示。

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原因分析:

很有可能是傾注培養(yǎng)基時培養(yǎng)基帶有氣泡,傾注平板,凝固后所致。


解決步驟:

(1)培養(yǎng)基滅菌后置水浴50-55℃保溫。

(2)血液一般冷藏。提前取出血液放置在室溫下,自然升溫至室溫。

(3)向培養(yǎng)基中添加血液。移液管吸取血液后加入培養(yǎng)基時,緩慢放液,同時緩慢搖動三角瓶使相互混勻。

(4)傾注培養(yǎng)基后,找平穩(wěn)地方(越水平越好)冷卻。

(5)收皿疊放保存。


錯誤操作:

(1)培養(yǎng)基滅菌后高溫直接加血傾注,皿蓋水汽很多,造成后續(xù)影響。

(2)血液如果直接從冰箱里拿出來就馬上加入培養(yǎng)基,由于溫差較大,加入后很容易形成片狀凝固。

(3) 放液太快容易形成片狀凝固。搖動太劇烈會形成氣泡,培養(yǎng)基粘度大氣泡形成后很難消除。

(4)如果不是平面,液體保持水平,而皿是斜的,最后造成培養(yǎng)基在某一直徑上形成一邊高一邊低的現(xiàn)象。   

(5)不可急著收皿或急脾氣急著查看皿凝固了沒有。有時候看似凝固了,只是表面,倒過來或移動后以會造成培養(yǎng)基坍塌或坑洼不平。

 

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編輯:songjiajie2010

 
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