1、培養(yǎng)基煮沸溶解后再高壓滅菌,還是直接高壓滅菌存在疑惑。
拿麥康凱瓊脂舉個(gè)例子,溶解后滅菌,平板上沒(méi)有不溶的結(jié)晶紫,沒(méi)有紫色的斑點(diǎn);相對(duì)比未溶解滅菌的,平板上有結(jié)晶紫和紫色的斑點(diǎn)。所以正確的做法是先煮沸溶解后再高壓滅菌。
2、培養(yǎng)基PH值為什么不在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)?
其實(shí)出現(xiàn)這個(gè)情況的問(wèn)題有很多種,大致我分為這么6大點(diǎn):
①質(zhì)量不好(生產(chǎn)廠家出廠時(shí)pH就不正確);
②滅菌問(wèn)題(高壓滅菌溫度過(guò)高或滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng),導(dǎo)致葡萄糖類焦化從而pH降低);
③保存時(shí)間(超過(guò)保質(zhì)期或結(jié)塊);
④水質(zhì)出現(xiàn)問(wèn)題(可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來(lái)水);
⑤保存溫度(保存溫度過(guò)高);
⑥光線直射總結(jié)本人認(rèn)為以上6點(diǎn)都可能導(dǎo)致培養(yǎng)基pH出現(xiàn)偏差,如果出現(xiàn)此類問(wèn)題,建議逐一排查,直到問(wèn)題解決。
3、培養(yǎng)基高壓滅菌時(shí)為什么會(huì)焦化?
不少檢驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)滅菌的培養(yǎng)基有焦化現(xiàn)象,我認(rèn)為引起此現(xiàn)象的主要原因有以下4點(diǎn):
①可能你滅菌的時(shí)候溫度超過(guò)了121℃(正常115-116℃20min即可);
②滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng);
③培養(yǎng)基在容器中裝的太多(不要超過(guò)容器容量的80%);
④滅完菌的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中保存的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這些都會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基發(fā)生焦化現(xiàn)象。
4、培養(yǎng)基PH怎么測(cè)定?
通常分兩種情況:
①對(duì)于無(wú)需高壓滅菌的培養(yǎng)基,先煮沸溶解后再冷卻至25℃時(shí),測(cè)定其pH值(固體培養(yǎng)基至少測(cè)2個(gè)點(diǎn),取其平均值);
②對(duì)于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,高壓滅菌后,冷卻至25℃測(cè)其pH(固體培養(yǎng)基至少測(cè)2個(gè)點(diǎn),取其平均值)。
5、含瓊脂培養(yǎng)基在倒平板為什么有時(shí)候不凝固或凝固不好?
針對(duì)以上情況,我做了分析:
①針對(duì)需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,倒平板時(shí)候要先搖勻(因?yàn)榄傊肿恿勘容^大,在冷卻過(guò)程中容易沉淀到底部,導(dǎo)致瓊脂分散不均勻);
②針對(duì)無(wú)需高壓滅菌的培養(yǎng)基,一次煮沸溶解后不能直接倒平板,應(yīng)重復(fù)煮沸溶解3-5次(因?yàn)橐淮尾荒艽_保瓊脂完全溶解)。
6、為什么同一品牌的不同批號(hào),粉末顏色有差別?
分析可能有3個(gè)原因:
①此培養(yǎng)基成分含有染料或指示劑;
②不同批次粉末培養(yǎng)基含水量不同,一般要求≤6%,含水量越高,顏色越深;
③加工時(shí)球磨時(shí)間越長(zhǎng)顏色越深。
此次分享,主要是對(duì)微生物培養(yǎng)基使用這塊會(huì)遇到的常見(jiàn)問(wèn)題進(jìn)行簡(jiǎn)單分析,希望通過(guò)短短幾行字,能夠幫助廣大在實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)過(guò)此類問(wèn)題的同仁,其中若有不對(duì)的地方忘諸位指正,謝謝!
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