食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)

微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基pH值監(jiān)控的注意事項(xiàng)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2023-03-23
核心提示: pH值是培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目,微生物的生長(zhǎng)不僅依賴豐富的營養(yǎng),還需要在適宜的pH值范圍內(nèi)才能正常生長(zhǎng)繁殖或體現(xiàn)其生物特
 pH值是培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目,微生物的生長(zhǎng)不僅依賴豐富的營養(yǎng),還需要在適宜的pH值范圍內(nèi)才能正常生長(zhǎng)繁殖或體現(xiàn)其生物特性,因此培養(yǎng)基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果。

培養(yǎng)基配置:

配料
溶解調(diào)PH過濾分裝包扎滅菌擺斜面貯存

1.配料

配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀

加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

3.調(diào)PH

1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

4.過濾

濾紙或棉花進(jìn)行過濾。(有時(shí)可以省去)

5.分裝

一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

(1)三角瓶

若作靜置培養(yǎng),則100mL培養(yǎng)基/250mL的三角瓶,最多不能超過150mL培養(yǎng)基/250mL的

三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20mL培養(yǎng)基/250mL的三角瓶,保證通氣良好。

(2)試管分裝

液體培養(yǎng)基一般裝4-5mL,約試管的1/4高度;

固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4mL,約試管的1/5高度。

6.包扎

分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)

基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。

9.貯存

培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用

注意事項(xiàng):

在配制時(shí),首先要確保培養(yǎng)基未結(jié)塊、顏色未發(fā)生變化或其他物理性狀明顯改變;應(yīng)按照使用說明上的要求操作,稱量應(yīng)達(dá)到相應(yīng)的精確度;純化水是配制培養(yǎng)基最常用的溶劑,應(yīng)確保溶劑的質(zhì)量符合要求;配制培養(yǎng)基應(yīng)采用干凈且不會(huì)對(duì)培養(yǎng)基理化特性產(chǎn)生改變的容器。

在分裝前,應(yīng)確保培養(yǎng)基完全溶解混勻,加熱助溶是最常用的方法,應(yīng)注意不要過度加熱,尤其是含糖量較高的培養(yǎng)基,糖類不耐熱的特性會(huì)使糖類在高溫條件下產(chǎn)生有機(jī)酸而使pH值下降。

2
培養(yǎng)基的pH控制

培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。

 

雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì)成分,能使培養(yǎng)基的pH盡可能的保持在要求的范圍內(nèi),但是配出的培養(yǎng)基若不符合要求,就要進(jìn)行必要的調(diào)整。如果有已校準(zhǔn)pH計(jì),可用pH計(jì),如果沒有,可用精密的pH試紙,再根據(jù)需要用1 moL/L氫氧化鈉或1moL/L鹽酸(微調(diào)可用0.1氫氧化鈉或0.1moL/L鹽酸)調(diào)制所需的pH。培基的pH一般為7.4~7.6,也有酸性或堿性的。用氫氧化鈉調(diào)整的需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,在調(diào)整pH時(shí)要調(diào)至高出所需0.1個(gè)~0.2個(gè)單位,因用氫氧化鈉調(diào)整時(shí),高壓滅菌后,培養(yǎng)基的pH要降低0.1~0.2。如培養(yǎng)基中含有碳酸鈣成分,可不pH。

圖片

03
pH電極的維護(hù)保養(yǎng)

目前,實(shí)驗(yàn)室使用pH計(jì)電極大部分都是復(fù)合電極。其優(yōu)點(diǎn)是使用方便,不受氧化-還原物質(zhì)的影響,且平衡速度快。使用時(shí)應(yīng)注意以下事項(xiàng):

復(fù)合電極不用時(shí),可充分浸泡飽和氯化鉀溶液中。切忌用洗滌液或其他吸水性試劑浸洗。

使用前,檢查玻璃電極前端的球泡。正常情況下,電極應(yīng)該透明而無裂紋;球泡內(nèi)要充滿溶液,不能有氣泡存在。

測(cè)量濃度較大的溶液時(shí),盡量縮短測(cè)量時(shí)間,用后仔細(xì)清洗,防止被測(cè)液粘附在電極上而污染電極。

清洗電極后,不要用濾紙擦拭玻璃膜,而應(yīng)用濾紙吸干避免損壞玻璃薄膜、防止交叉污染,影響測(cè)量精度。

測(cè)量中注意電極的銀氯化銀內(nèi)參比電極應(yīng)浸入到球泡內(nèi)氯化物緩沖溶液中,避免電計(jì)顯示部分出現(xiàn)數(shù)字亂跳現(xiàn)象。使用時(shí),注意將電極輕輕甩幾下。

電極不能用于強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或其他腐蝕性溶液。

嚴(yán)禁在脫水性介質(zhì)如無水乙醇、重鉻酸鉀等中使用

編輯:songjiajie2010

 
分享:
 

 
 
推薦圖文
推薦檢驗(yàn)技術(shù)
點(diǎn)擊排行
檢驗(yàn)技術(shù)
 
 
Processed in 0.177 second(s), 17 queries, Memory 0.99 M