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致病菌常見問題解答

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2023-03-23
核心提示:Q 1、關(guān)于分離平板如何分離劃線?A分離平板劃線最好采用分區(qū)劃線的方法,目的是將不同菌分離開,便于后續(xù)挑取單菌落鑒定。根
Q

 1、關(guān)于分離平板如何分離劃線?


A

分離平板劃線最好采用分區(qū)劃線的方法,目的是將不同菌分離開,便于后續(xù)挑取單菌落鑒定。根據(jù)增菌液濃度決定不同區(qū)之間是否需要燒環(huán)或者更換接種環(huán),保證菌落不會過密集或者過于稀疏。

Q

2、選擇性分離平板上有的不長菌,有的有典型菌落,如何判斷?


A

標(biāo)準(zhǔn)中為了避免漏檢,選用了兩種或兩種以上的選擇性分離平板。由于不同種類的沙門在平板上生長有差異,所以某些沙門氏菌會出現(xiàn)在某一種平板上生長,其他平板不生長或者生長不典型的情況。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn),任何一種分離平板上出現(xiàn)可疑菌落都需要進(jìn)行后續(xù)的鑒定,不能直接判定。根據(jù)后續(xù)生化和血清結(jié)果再報告檢出或者未檢出。

Q

 

3、培養(yǎng)基滅菌前后如何測定pH?


A

培養(yǎng)基pH值測定是完全溶解,滅菌后,冷卻至25℃進(jìn)行測量。我司不推薦滅菌前測定,因?yàn)闇缇^程中,溫度和成分間的化學(xué)反應(yīng),會影響pH值。所以,推薦客戶滅菌冷卻后測量。如果是含瓊脂的培養(yǎng)基可以采用固體電極進(jìn)行測量。

Q

4、血清學(xué)鑒定時H血清鑒定使用的半固體瓊脂配置及挑菌問題


A

轉(zhuǎn)接半固體培養(yǎng)后,由于瓊脂含量低、平板軟,所以建議采用一次性接種環(huán)輕輕刮取擴(kuò)散邊緣菌苔進(jìn)行后續(xù)操作。金屬接種環(huán)質(zhì)地堅硬容易戳破瓊脂。

Q

5、血清學(xué)鑒定是否需要做分型?


A

按照標(biāo)準(zhǔn)要求報告結(jié)果只需報告檢出或未檢出沙門氏菌,不需要報告具體血清型,所以只需要做O多價和H多價就可以了。如果需要后續(xù)進(jìn)行分型,需要購買群血清及單因子血清。

Q

6、生化鑒定使用的菌懸液濁度要求?


A

生化鑒定套裝為微量鑒定系統(tǒng),對于菌懸液濃度有要求。使用0.5M濁度進(jìn)行接種。菌懸液濃度過大或者過小對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度有影響。

Q

7、鼠傷寒沙門氏菌接種三糖鐵瓊脂斜面變黑的問題?


A

可能是由于接種量過大或者培養(yǎng)時間過長導(dǎo)致的,建議減少接菌量或縮短培養(yǎng)時間。

Q

8、BPW在增菌時必需加熱到44℃嗎?室溫的溫度可以增菌嗎?


A

培養(yǎng)基預(yù)熱至44℃主要目的是保證乳粉的充分溶解,室溫條件下加入樣品可能會導(dǎo)致部分樣品聚集成團(tuán),不易溶解。


Q
9、TSA平板上的可疑菌落沒有產(chǎn)黃色素也有可能是阪崎嗎?為什么TSA要25℃培養(yǎng)?
A

10、不同克羅諾桿菌的產(chǎn)黃色素能力不同,并且有文獻(xiàn)報道約10%的克羅諾菌屬的菌株不具有產(chǎn)黃色素的能力,所以僅根據(jù)產(chǎn)黃色素進(jìn)行判定會有漏檢的情況,建議結(jié)合生化試驗(yàn)進(jìn)行判斷。在25℃時更易觀察黃色素的產(chǎn)生,溫度過高黃色素顏色會變淡(出自《伯杰氏細(xì)菌手冊》)。

Q
11、怎么控制0.5麥?zhǔn)蠞岫饶兀?#160;
A

根據(jù)我們生化干制套裝中提供的0.5麥?zhǔn)蠞岫缺葷峁茏鳛閰⒈龋部梢赃x用濁度儀。

Q

12、為什么用同一株標(biāo)準(zhǔn)菌株 ATCC29544 做陽性添加后做阪崎干制時西蒙氏檸檬酸有陰性也有陽性?

A

如果操作正確,保證菌株活性及純度的情況下,ATCC29544 這株模式菌株的西蒙氏檸檬酸鹽反應(yīng)應(yīng)該呈現(xiàn)陽性。

Q
13、乳粉檢驗(yàn)中用哪一種顯色培養(yǎng)基好?如何選擇?
A

ESM015可以進(jìn)行準(zhǔn)確的篩選,相比較而言ESM016 培養(yǎng)基上生長的菌株特異性更強(qiáng),結(jié)果更易觀察。

Q
14、為什么這么多溫度呢?不同溫度的作用能明確嗎?
A

不同過程的溫度的作用是不一樣的。BPW進(jìn)行36±1℃,主要是為了使得產(chǎn)品中的微生物進(jìn)行復(fù)蘇;選擇性增菌44±0.5℃是為了提高選擇性;TSA 25℃利于黃色素的產(chǎn)生;生化試驗(yàn)30℃是為了提供適宜的溫度更利于目標(biāo)菌的生長并觀察生化反應(yīng)。

Q
15、ESM015培養(yǎng)基對陰溝腸桿菌的選擇性效果?
A

目前我們實(shí)驗(yàn)室的陰溝腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株在ESM015上為白色菌落,但是1%的陰溝腸桿菌是具有α-葡萄糖苷酶的活性,所以極少的陰溝腸桿菌也會呈現(xiàn)藍(lán)綠色菌落。

Q
16、請問兩種檢測方法該如何選擇呢?
A

根據(jù)限量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行選擇,目前限量標(biāo)準(zhǔn)中要求一段奶粉進(jìn)行定量檢測。

Q
17、在檢測過程中陽性對照用ATCC29544 那有陰性對照嗎 ?
A

陰性對照試驗(yàn)不用全過程添加,只需在部分生化實(shí)驗(yàn)時添加陰性對照菌株。

Q
18、萬古霉素的添加可以不過濾嗎?
A

我公司成品萬古霉素已經(jīng)過過濾除菌,可直接使用,如果自行配制建議進(jìn)行過濾除菌。

Q
19、阪崎腸桿菌檢出,可以原樣復(fù)檢嗎?原樣復(fù)檢咋又檢不出了?
A

由于微生物的數(shù)量和分布不均勻?qū)е拢⑸锊荒軓?fù)檢。

Q
20、自立袋封上后是否制造了無氧環(huán)境?阪崎腸桿菌還能很好的生長嗎?
A

21、自立袋的封口不會造成無氧環(huán)境,阪崎腸桿菌能夠正常生長。

Q
22、如果DFI滅菌后有黑色沉淀能繼續(xù)使用嗎?有什么影響嗎?
A

培養(yǎng)基高壓前進(jìn)行煮沸即可避免黑色沉淀的產(chǎn)生。

 

編輯:songjiajie2010

 
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