1.范圍:
用高效液相色譜法測(cè)定辣椒及辣椒制品中辣椒素類(lèi)物質(zhì)的方法及辣度表示方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于辣椒和辣椒制品中辣椒素類(lèi)物質(zhì)的測(cè)定及辣度的表示。
本方法的檢出限:辣椒素、二氫辣椒素均為1mg/Kg,線(xiàn)性范圍為1mg/L-150mg/L。
2.試樣提。
在樣品中加入甲醇—四氫呋喃混合溶劑25ml,用保鮮膜封口,用針扎幾個(gè)小孔,然后在60度水浴條件下,使用超聲波震蕩器提取30min。用濾紙過(guò)濾,收集濾液,然后將濾渣連同濾紙重新加甲醇—四氫呋喃混合溶劑25ml,使用超聲波震蕩器提取10min,重復(fù)兩次,將三次過(guò)濾收集的濾液合并,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在70度溫度下濃縮至10ml—20ml,然后用甲醇—四氫呋喃混合溶劑定容至50ml,經(jīng)0.45?m濾膜過(guò)濾后進(jìn)行色譜分析。根據(jù)樣品中辣椒素類(lèi)物質(zhì)總量和檢測(cè)器的靈敏度,必要時(shí)可以適當(dāng)調(diào)整稀釋倍數(shù)。
3.色譜參考條件:
色譜柱:KromasilC-18(4.6mm*250mm5um)
流動(dòng)相:甲醇:水=65:35
進(jìn)樣量:10?l
流速:1.0ml/min
紫外檢測(cè)波長(zhǎng):280nm
柱溫箱溫度:30℃
4.結(jié)果:
按照色譜條件,進(jìn)行HPLC分析,用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜峰的保留時(shí)間定性;根據(jù)辣椒素、二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及試樣中的峰面積定量。具體的色譜圖及結(jié)果顯示見(jiàn)下圖: