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糖類的提取與澄清

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-10-08

.提取

常用溶劑有:水和乙醇,在提取糖類時,先將樣品磨碎浸泡成溶液,若有脂肪的樣品用石油醚提取,撤去其中的脂肪和葉綠素。

1.      水作提取劑

用水作提取劑,溫度控制在45-50,利用水作提取劑時,還有pro、氨基酸、多糖、色素干擾,影響過濾時間,所

以用水作提取劑應(yīng)注意三個的

注意:

1)溫度過高:是可溶性淀粉及糊精提取出來 。

2)酸性樣品:酸性使糖水解(轉(zhuǎn)化),所以酸性樣品用碳酸鈣中和,提取但應(yīng)控制在中性。

3)萃取的液體:有酶活性時,同樣是使糖水解,加二氯化汞可防止(二氯化汞可抑制酶活性)

2. 乙醇(水溶液)作提取液

乙醇作提取液適用于含酶多的樣品 ,這樣避免唐被水解。乙醇的濃度70-80%。濃度過高,糖溶在乙醇中,用乙醇的目的,降低酶的作用,避免糖被酶水解。

.澄清劑

1.  作用:

使沉淀一些干擾物質(zhì),是提取液清亮透明,達到準確的測量糖類。(常用澄清劑來澄清)

2.     對澄清劑的要求:

1)除干擾物質(zhì)完全,不吸附被側(cè)物質(zhì)糖

2)過量澄清劑不影響糖的測量

3)沉淀顆粒要小,操作簡便

4)不改變糖類的比旋光度及理化性質(zhì)

3.    實驗室常用的澄清劑

1)中性醋酸鉛:適用于植物性的萃取液,它可除去蛋白質(zhì)、丹寧、有機酸、果膠。

缺點:脫色力差,不能用于深色糖液的澄清,否則加活性炭處理。

2)堿性醋酸鉛

適用深色的蔗糖溶液,可除色素,有機酸,蛋白質(zhì)

缺點:沉淀顆粒大,可帶走果糖。

3)醋酸鋅和亞鐵氰化鉀

用于富含蛋白質(zhì)的提取液,常用于沉淀蛋白質(zhì),對乳制品最理想。主要是生成的亞鐵氰酸鋅(白色沉淀)與蛋白質(zhì)共同沉淀。所以使動物性樣品的沉淀劑。

4AL(OH)3乳劑是輔助澄清劑。

5CuSO4-NaOH這種澄清劑用于牛乳等樣品。

4.澄清劑的用量。

以上的澄清劑用于較少的中性硅酸鋁和硅酸鋅和亞鐵氰化鉀。在一般操作時,加澄清劑量多少一定要恰當,用量太少,達不到澄清的目的,用量太多使分析結(jié)果產(chǎn)生誤差,不同的物質(zhì),因干擾物質(zhì)種類和含量的不同,

所以添加量也不同。過量以后,糖液中有Zn2+,  Pb2+, 等。

過量的Pb+還原糖(果糖)生成鉛糖。這樣使測得糖量降低。所以要加除鉛劑,防止生成鉛糖,降低糖的濃度。

三. 常用的除鉛劑

K2CrO4(苯酸鉀);Na2CrO4(苯酸鈉)Na2HPO4(磷酸氫二鈉);Na2SO4(硫酸鈉);[使用時可加少量固體即可]

 
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