HIV-1新發(fā)感染率的估算方法主要有隊列研究、數(shù)學(xué)模型和實驗室方法。其中實驗室方法主要是通過檢測HIV 感染者樣本中HIV-1抗體陽轉(zhuǎn)后的免疫標志物來區(qū)分是否為新發(fā)感染，進而計算發(fā)病率。本文簡要介紹實驗室檢測HIV-1新發(fā)感染的方法及發(fā)展過程。

1998年，美國研究人員基于人體感染HIV后產(chǎn)生的抗體滴度隨感染時間延長而升高的原理，在HIV抗體初篩實驗的基礎(chǔ)上，建立了低敏酶聯(lián)免疫法（less-sensitiveenzyme immunoassay，LS-EIA），又名“確定HIV新發(fā)感染的血清學(xué)檢測規(guī)程”(serologic testing algorithm for recent HIV seroconversion，STARHS)。美國疾控中心采納此法，商品化的試劑(3A11-LS和Vironostika-LS)開始用于H1V-1新發(fā)感染檢測及監(jiān)測。此方法檢測時需要將樣本稀釋1:20000 ，其包被抗原也單一，存在著實驗不易操作，準確度相對低，僅適用于B亞型等缺點。

為了解決低敏酶聯(lián)免疫法的局限性，2001年美國疾控中心根據(jù)HIV IgG抗體在總抗體中所占比例隨感染時間延長而逐漸增加的特性，將HIV的B、E和D等多個亞型的gp41合成肽連接起來作為抗原，從而建立了BED-捕獲酶聯(lián)免疫試驗(BED capture enzyme immunoassay，BED-CELA)。該方法操作簡便，具有良好的穩(wěn)定性，對HIV-1的A、B、C、D和E亞型均適用。我國于2005年底引入了該方法用于HIV-1發(fā)病率估算。此方法受CD4細胞計數(shù)、病毒載量值、抗病毒治療等因素影響較大，會導(dǎo)致HIV發(fā)病率的高估，因此使用該方法需要排除一些影響因素，如CD4細胞計數(shù)＜200個/μl和接受抗病毒治療人群。

抗體親和力作為抗體自身的一種屬性，所受影響因素相對于BED-CELA較少，根據(jù)HIV-1感染者血清陽轉(zhuǎn)后抗體親和力會隨著感染時間延長而逐漸增加的原理，建立了雙孔親和力指數(shù)(AI)方法和單孔的限制性抗原親和力酶聯(lián)免疫試驗（Limiting antigen acidity enzyme immunoassay,LAg-avidity EIA）。2001年研究人員發(fā)現(xiàn)應(yīng)用親和力試驗可以用來識別HIV新發(fā)感染，該方法最早使用的是商品化親和力指數(shù)試劑盒——AxSYM親和力指數(shù)法，隨后美國疾病預(yù)防控制中心在2010年用大腸桿菌表達了一種高親和力基因重組gp41抗原(recombinant immunodominant region of gp41 of HIV-1group M，rIDR-M),由此研發(fā)了特異性高，估算結(jié)果更為準確的限制性抗原親和力酶聯(lián)免疫實驗，應(yīng)用于HIV-1發(fā)病率的估算。2013年，我國研發(fā)的HIV-1新發(fā)感染檢測試劑盒（限制性抗原親和力法）應(yīng)用于HIV-1發(fā)病率檢測，和國外試劑相比，該方法的窗口期和誤判率更適用于我國人群。