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RNA酶A切割法(RNase A cleavage)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
在一定條件下,氨基源雙鏈核酸分子RNA:RNA或RNA:DNA中的錯配堿基可被RNaseA切割,切割產(chǎn)物可通過變性凝膠電泳分離。當(dāng)RNA探針上錯配的堿基為嘌呤時,RNaseA在錯配處的切割效率很低,甚至不切割,而當(dāng)錯配堿基為嘧啶時,則其切割效率較高。故如果僅分析被檢DNA的一個條鏈,突變檢出率只有30%,如同時分析正義和反義二條鏈,檢出率可達(dá)70%。該法需要制備RNA探針,增加了操作的復(fù)雜性,但可用于1-2kb的大片段進(jìn)行檢測,并能確定突變位點。于這些優(yōu)越性,它仍被作為一種經(jīng)典方法用于對未知突變進(jìn)行分析。
 
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