一、 分析靈敏度（檢測(cè)限）
1． 檢測(cè)的最低分析物濃度為檢測(cè)系統(tǒng)的分析靈敏度或稱(chēng)檢測(cè)限。這個(gè)濃度限值對(duì)毒檢驗(yàn)在法庭上特別重要，希望通過(guò)檢測(cè)知道樣品中究竟有無(wú)藥物，這是很關(guān)鍵的。另外，腫瘤標(biāo)志物及許多特定蛋白應(yīng)該有一個(gè)可檢測(cè)的最低濃度或某個(gè)量；如：前列腺特異蛋白（PSA），這是病人治療后監(jiān)視復(fù)發(fā)的重要信息；長(zhǎng)期以來(lái)，臨床對(duì)報(bào)告的前列腺特異蛋白有意義的最小量要求予以明確。核酸檢測(cè)報(bào)告的陰、陽(yáng)性也要求說(shuō)明，能檢出的最小拷貝的核酸量相當(dāng)于多少病毒。因此，確定檢測(cè)系統(tǒng)的可報(bào)告低限是重要的分析性能。
2． 當(dāng)前，檢測(cè)限術(shù)語(yǔ)混亂。廠商使用各種詞語(yǔ)，如：靈敏度（sensitivity）,分析靈敏度(analyticalsensitivity),最小檢測(cè)限(minimum detection limit)，功能靈敏度(functional sensitivity)，檢測(cè)限度(limit of detction)定量限度（limit of quantitation）等。迄今尚無(wú)標(biāo)準(zhǔn)定義，所以有必要了解每個(gè)詞語(yǔ)的實(shí)際含義和確定這個(gè)含義的實(shí)驗(yàn)方式，怎樣處理數(shù)據(jù)，怎樣由數(shù)據(jù)作出估計(jì)，以及這個(gè)估計(jì)對(duì)該檢驗(yàn)的醫(yī)學(xué)應(yīng)用是否有用。以下介紹的分析靈敏度分為具有定性含義的檢測(cè)低限，和具有定量含義的生物檢測(cè)限及功能靈敏度。
二、 檢測(cè)低限（Lower Limit of Detection，LLD）
每次檢測(cè)，總是做一個(gè)空白樣品。檢測(cè)方法常以空白響應(yīng)量校準(zhǔn)至零點(diǎn)，再檢測(cè)各個(gè)檢測(cè)樣品的反應(yīng)響應(yīng)量。這些樣品的反應(yīng)響應(yīng)量在扣除了空白樣品響應(yīng)量后，是分析物的對(duì)應(yīng)響應(yīng)量。但是，空白響應(yīng)量也有波動(dòng)。若重復(fù)多次作空白檢測(cè)，以空白（響應(yīng)量）均值和標(biāo)準(zhǔn)差表示這些空白均值的離散程指標(biāo)。在確定方法性能或繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)時(shí)，常常以空白均值表示空白響應(yīng)量大于或小于空白均值，各有50%的可能性。當(dāng)空白響應(yīng)量小于空白均值，對(duì)同一個(gè)樣品檢測(cè)響應(yīng)量（未扣除空白響應(yīng)量），似乎反映分析物要多一點(diǎn)，檢測(cè)方法好象靈敏些。當(dāng)空白響應(yīng)量大于空白均值，似乎原先可以檢測(cè)出來(lái)的分析物現(xiàn)在測(cè)不出了。因此，檢測(cè)方法必須說(shuō)清楚：究竟怎樣才算是可檢測(cè)出來(lái)的分析物量？標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)從零開(kāi)始，是不是報(bào)告的分析物量 可以從零開(kāi)始？這就是檢測(cè)低限要回答的問(wèn)題。統(tǒng)計(jì)說(shuō)明，如果空白響應(yīng)量的波動(dòng)服從正態(tài)分布規(guī)律：各個(gè)單次檢測(cè)的空白響應(yīng)量x空白有95%的可能性為：
—2.s空白≤x空白≤ —空白 2.s空白
即:∣x空白- 空白∣≤2.s空白
其中較空白均值小的一半會(huì)使分析物更易檢測(cè)出來(lái),這不是檢測(cè)不出,不必考慮.若有一個(gè)檢測(cè)響應(yīng)量較空白響應(yīng)量均值大2s空白，仍然認(rèn)為是空白響應(yīng)量的可能性只有5%;有95%的可能性屬于樣品內(nèi)有分析物形成的檢測(cè)響應(yīng)檢測(cè)響應(yīng)量；它較空白均值差2s空白
以上。同理，響應(yīng)量較空白均值相差3s空白以上的，還認(rèn)為是空白響應(yīng)量的可能性?xún)H0.3;而有99.7%的可能性是樣品內(nèi)有分析物形成的響應(yīng)量.所以若檢測(cè)樣品的反應(yīng)響應(yīng)量較空白均值大的,但和空白均值相差2s空白或3s空白以下的,只能說(shuō)這些響應(yīng)量是空白樣品單次檢測(cè)的響應(yīng)量,樣品沒(méi)有分析物,或者表示:分析物量為零.超過(guò)2s空白或3s空白的響應(yīng)量才認(rèn)為樣品中真的含有分析物.
檢測(cè)低限定義為樣品單次檢測(cè)可以達(dá)到的檢測(cè)響應(yīng)量對(duì)應(yīng)的分析物量。檢測(cè)系統(tǒng)或方法對(duì)小于或等于檢測(cè)低限的分析物量只能報(bào)告“無(wú)分析物檢出”。通常估計(jì)95%或99.7%的兩種可能性：
95% 可能性：LLD= 空白 2.s空白
99.7% 可能性:LLD= 空白 3.s空白
要注意的是,直接讀出濃度單位的檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)低于零的檢測(cè)將報(bào)告零,其分布不是正態(tài)的,因此計(jì)算的均值和標(biāo)準(zhǔn)差不能如實(shí)表達(dá)檢測(cè)低限的真實(shí)情況.若檢測(cè)響應(yīng)可以用初始值表示,如:吸光度、熒光、等，此時(shí)s空白是有效的。所以應(yīng)使用初始值來(lái)計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，然后再轉(zhuǎn)換成濃度單位。
三、 生物檢測(cè)限度（Biologic Limit of Detection，BLD）
大于檢測(cè)低限的響應(yīng)信號(hào)說(shuō)明這個(gè)樣品內(nèi)有分析物，但是方法還不能正確報(bào)告定量結(jié)果。因?yàn)樵谶@樣低的濃度或其他量值范圍內(nèi)，單次檢測(cè)樣品的反應(yīng)響應(yīng)量重復(fù)性較差。那么在多少檢測(cè)響應(yīng)量時(shí)才能較好地報(bào)告定量結(jié)果呢？現(xiàn)介紹兩種方式：生物檢測(cè)限度和功能靈敏度。原則上，對(duì)多個(gè)近于檢測(cè)限濃度的樣品（肯定不是空白樣品）作重復(fù)檢測(cè)，對(duì)扣除了空白響應(yīng)量后的樣品檢測(cè)響應(yīng)量以均值和標(biāo)準(zhǔn)差歸納。按正態(tài)分布規(guī)律，單次檢測(cè)樣品具有的響應(yīng)量有95%或99.7%的可能性與不檢測(cè)響應(yīng)量均值相差2或3倍的響應(yīng)量標(biāo)準(zhǔn)差。較均值還大的單次響應(yīng)量肯定沒(méi)問(wèn)題；但是較均值小的那些單次響應(yīng)量，若和檢測(cè)低限（空白響應(yīng)量上限）交叉，說(shuō)明檢測(cè)方法還不能單憑一次檢測(cè)區(qū)分出這是空白還是有分析物。因此，這些樣品檢測(cè)響應(yīng)量的95%或99.7%單次檢測(cè)量最低值也較檢測(cè)低限(LLD)大,這樣就可保證樣品在任何情況下,單次檢測(cè)響應(yīng)量一定不是空白的響應(yīng)量;這個(gè)樣品具有的分析物濃度可以定量地報(bào)告出來(lái).在多個(gè)近于檢測(cè)限的樣品中,符合這樣條件的最低分析物濃度(或其他量值)就是檢測(cè)系統(tǒng)或方法的生物檢測(cè)低限.
生物檢測(cè)低限定義為:以檢測(cè)低限加2或3倍檢測(cè)限樣品標(biāo)準(zhǔn)差的方式,確定檢測(cè)系統(tǒng)或方法可定量報(bào)告分析物提取低濃度或其他量值的限值。
生物檢測(cè)低限（BLD）的具體度量方式為：
95% 的可能性：BLD=LLD 2s檢測(cè)限樣品
99.7%的可能性: BLD=LLD 3.s檢測(cè)限樣品
本詞語(yǔ)較完善地表示實(shí)際樣品的檢測(cè)限度,如什么濃度才是零值或沒(méi)有分析物有差異.在證實(shí)廠商的BLD說(shuō)明時(shí)，應(yīng)使檢測(cè)限樣品和濃度的廠商的說(shuō)明相同。
四、 功能靈敏度（Functional Sensitivity ，F(xiàn)S）
功能靈敏度定義為：以天間重復(fù)CV為20%時(shí)對(duì)應(yīng)檢測(cè)限樣品具有的平均濃度，確定檢測(cè)系統(tǒng)或方法可定量報(bào)告分析物的最低濃度或其他量值的限值。為了估計(jì)FS，須用多個(gè)檢測(cè)限濃度來(lái)確定在低濃度處的精密度表現(xiàn)，從中選擇具20%CV的濃度。在證實(shí)廠商的FS的明時(shí)，使用的檢測(cè)限樣品濃度應(yīng)和廠商的說(shuō)明相同。
五、 實(shí)驗(yàn)須考慮的因素
一般制備兩種不同類(lèi)型的樣品。一個(gè)是“空白”樣品，即不含有分析物，分析物濃度為零。另一個(gè)是“檢測(cè)限”樣品，即含有低濃度的分析物。在有些場(chǎng)合下，需要制備幾份“檢測(cè)限”樣品�？瞻缀蜋z測(cè)限樣品由檢驗(yàn)方法作重復(fù)檢測(cè)。計(jì)算各自的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。不同的檢測(cè)限由空白和檢測(cè)限樣品數(shù)據(jù)計(jì)算出來(lái)。
1． 空白液：一份空白液用作空白，其他用于制備檢測(cè)限樣品。理想的空白液應(yīng)具有和檢驗(yàn)的病人樣品相同的基體。但是，常使用檢測(cè)系統(tǒng)的系列標(biāo)準(zhǔn)品中的“零標(biāo)準(zhǔn)”作為空白。對(duì)某些項(xiàng)目，可使用術(shù)后無(wú)某疾病的病人樣品（如：前列腺腫瘤術(shù)后病人的無(wú)PSA血清）為空白樣品。
2． 檢測(cè)限樣品：在證實(shí)某方法的靈敏度性能時(shí)，對(duì)空白液加入分析物配制成檢測(cè)樣品，。加入的分析物量應(yīng)是廠商說(shuō)明的檢測(cè)濃度。在建立檢測(cè)限度時(shí)，有必要制備幾份檢測(cè)限樣品，它們的濃度應(yīng)界于預(yù)期檢測(cè)限度高低一些的范圍內(nèi)。重復(fù)檢測(cè)數(shù)：沒(méi)有具體規(guī)定，但常推薦做20次。符合臨床檢驗(yàn)對(duì)重復(fù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的要求。廠商常推薦10次，為減少開(kāi)支實(shí)驗(yàn)室也常采納作10次
3． 實(shí)驗(yàn)需要時(shí)間：如果主要從空白液的重復(fù)性了解檢測(cè)低限，常常就做批內(nèi)或短期實(shí)驗(yàn)。如果主要從“檢測(cè)限”樣品的重復(fù)性了解定量的檢測(cè)限，推薦作較長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)，代表天間測(cè)定性能。實(shí)際就做10次檢測(cè)（10d）。
計(jì)算示例：
某酶標(biāo)法的甲狀腺球蛋白試劑盒的分析靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
1． 用甲狀腺切除后恢復(fù)健康的病人血清為無(wú)甲狀腺球蛋白的空白血清。將純化的甲狀腺球蛋白加入該血清，并用空白血清作系列稀釋?zhuān)M成0，0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0ug/L的甲狀腺球蛋白樣品.
2． 空白血清作12次批內(nèi)重復(fù)測(cè)定;對(duì)其它系列樣品作天間重復(fù)測(cè)定,做了12d.記錄所有結(jié)果,列表如下:
表1 甲狀腺球蛋白分析靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1． 檢測(cè)的最低分析物濃度為檢測(cè)系統(tǒng)的分析靈敏度或稱(chēng)檢測(cè)限。這個(gè)濃度限值對(duì)毒檢驗(yàn)在法庭上特別重要，希望通過(guò)檢測(cè)知道樣品中究竟有無(wú)藥物，這是很關(guān)鍵的。另外，腫瘤標(biāo)志物及許多特定蛋白應(yīng)該有一個(gè)可檢測(cè)的最低濃度或某個(gè)量；如：前列腺特異蛋白（PSA），這是病人治療后監(jiān)視復(fù)發(fā)的重要信息；長(zhǎng)期以來(lái)，臨床對(duì)報(bào)告的前列腺特異蛋白有意義的最小量要求予以明確。核酸檢測(cè)報(bào)告的陰、陽(yáng)性也要求說(shuō)明，能檢出的最小拷貝的核酸量相當(dāng)于多少病毒。因此，確定檢測(cè)系統(tǒng)的可報(bào)告低限是重要的分析性能。
2． 當(dāng)前，檢測(cè)限術(shù)語(yǔ)混亂。廠商使用各種詞語(yǔ)，如：靈敏度（sensitivity）,分析靈敏度(analyticalsensitivity),最小檢測(cè)限(minimum detection limit)，功能靈敏度(functional sensitivity)，檢測(cè)限度(limit of detction)定量限度（limit of quantitation）等。迄今尚無(wú)標(biāo)準(zhǔn)定義，所以有必要了解每個(gè)詞語(yǔ)的實(shí)際含義和確定這個(gè)含義的實(shí)驗(yàn)方式，怎樣處理數(shù)據(jù)，怎樣由數(shù)據(jù)作出估計(jì)，以及這個(gè)估計(jì)對(duì)該檢驗(yàn)的醫(yī)學(xué)應(yīng)用是否有用。以下介紹的分析靈敏度分為具有定性含義的檢測(cè)低限，和具有定量含義的生物檢測(cè)限及功能靈敏度。
二、 檢測(cè)低限（Lower Limit of Detection，LLD）
每次檢測(cè)，總是做一個(gè)空白樣品。檢測(cè)方法常以空白響應(yīng)量校準(zhǔn)至零點(diǎn)，再檢測(cè)各個(gè)檢測(cè)樣品的反應(yīng)響應(yīng)量。這些樣品的反應(yīng)響應(yīng)量在扣除了空白樣品響應(yīng)量后，是分析物的對(duì)應(yīng)響應(yīng)量。但是，空白響應(yīng)量也有波動(dòng)。若重復(fù)多次作空白檢測(cè)，以空白（響應(yīng)量）均值和標(biāo)準(zhǔn)差表示這些空白均值的離散程指標(biāo)。在確定方法性能或繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)時(shí)，常常以空白均值表示空白響應(yīng)量大于或小于空白均值，各有50%的可能性。當(dāng)空白響應(yīng)量小于空白均值，對(duì)同一個(gè)樣品檢測(cè)響應(yīng)量（未扣除空白響應(yīng)量），似乎反映分析物要多一點(diǎn)，檢測(cè)方法好象靈敏些。當(dāng)空白響應(yīng)量大于空白均值，似乎原先可以檢測(cè)出來(lái)的分析物現(xiàn)在測(cè)不出了。因此，檢測(cè)方法必須說(shuō)清楚：究竟怎樣才算是可檢測(cè)出來(lái)的分析物量？標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)從零開(kāi)始，是不是報(bào)告的分析物量 可以從零開(kāi)始？這就是檢測(cè)低限要回答的問(wèn)題。統(tǒng)計(jì)說(shuō)明，如果空白響應(yīng)量的波動(dòng)服從正態(tài)分布規(guī)律：各個(gè)單次檢測(cè)的空白響應(yīng)量x空白有95%的可能性為：
—2.s空白≤x空白≤ —空白 2.s空白
即:∣x空白- 空白∣≤2.s空白
其中較空白均值小的一半會(huì)使分析物更易檢測(cè)出來(lái),這不是檢測(cè)不出,不必考慮.若有一個(gè)檢測(cè)響應(yīng)量較空白響應(yīng)量均值大2s空白，仍然認(rèn)為是空白響應(yīng)量的可能性只有5%;有95%的可能性屬于樣品內(nèi)有分析物形成的檢測(cè)響應(yīng)檢測(cè)響應(yīng)量；它較空白均值差2s空白
以上。同理，響應(yīng)量較空白均值相差3s空白以上的，還認(rèn)為是空白響應(yīng)量的可能性?xún)H0.3;而有99.7%的可能性是樣品內(nèi)有分析物形成的響應(yīng)量.所以若檢測(cè)樣品的反應(yīng)響應(yīng)量較空白均值大的,但和空白均值相差2s空白或3s空白以下的,只能說(shuō)這些響應(yīng)量是空白樣品單次檢測(cè)的響應(yīng)量,樣品沒(méi)有分析物,或者表示:分析物量為零.超過(guò)2s空白或3s空白的響應(yīng)量才認(rèn)為樣品中真的含有分析物.
檢測(cè)低限定義為樣品單次檢測(cè)可以達(dá)到的檢測(cè)響應(yīng)量對(duì)應(yīng)的分析物量。檢測(cè)系統(tǒng)或方法對(duì)小于或等于檢測(cè)低限的分析物量只能報(bào)告“無(wú)分析物檢出”。通常估計(jì)95%或99.7%的兩種可能性：
95% 可能性：LLD= 空白 2.s空白
99.7% 可能性:LLD= 空白 3.s空白
要注意的是,直接讀出濃度單位的檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)低于零的檢測(cè)將報(bào)告零,其分布不是正態(tài)的,因此計(jì)算的均值和標(biāo)準(zhǔn)差不能如實(shí)表達(dá)檢測(cè)低限的真實(shí)情況.若檢測(cè)響應(yīng)可以用初始值表示,如:吸光度、熒光、等，此時(shí)s空白是有效的。所以應(yīng)使用初始值來(lái)計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，然后再轉(zhuǎn)換成濃度單位。
三、 生物檢測(cè)限度（Biologic Limit of Detection，BLD）
大于檢測(cè)低限的響應(yīng)信號(hào)說(shuō)明這個(gè)樣品內(nèi)有分析物，但是方法還不能正確報(bào)告定量結(jié)果。因?yàn)樵谶@樣低的濃度或其他量值范圍內(nèi)，單次檢測(cè)樣品的反應(yīng)響應(yīng)量重復(fù)性較差。那么在多少檢測(cè)響應(yīng)量時(shí)才能較好地報(bào)告定量結(jié)果呢？現(xiàn)介紹兩種方式：生物檢測(cè)限度和功能靈敏度。原則上，對(duì)多個(gè)近于檢測(cè)限濃度的樣品（肯定不是空白樣品）作重復(fù)檢測(cè)，對(duì)扣除了空白響應(yīng)量后的樣品檢測(cè)響應(yīng)量以均值和標(biāo)準(zhǔn)差歸納。按正態(tài)分布規(guī)律，單次檢測(cè)樣品具有的響應(yīng)量有95%或99.7%的可能性與不檢測(cè)響應(yīng)量均值相差2或3倍的響應(yīng)量標(biāo)準(zhǔn)差。較均值還大的單次響應(yīng)量肯定沒(méi)問(wèn)題；但是較均值小的那些單次響應(yīng)量，若和檢測(cè)低限（空白響應(yīng)量上限）交叉，說(shuō)明檢測(cè)方法還不能單憑一次檢測(cè)區(qū)分出這是空白還是有分析物。因此，這些樣品檢測(cè)響應(yīng)量的95%或99.7%單次檢測(cè)量最低值也較檢測(cè)低限(LLD)大,這樣就可保證樣品在任何情況下,單次檢測(cè)響應(yīng)量一定不是空白的響應(yīng)量;這個(gè)樣品具有的分析物濃度可以定量地報(bào)告出來(lái).在多個(gè)近于檢測(cè)限的樣品中,符合這樣條件的最低分析物濃度(或其他量值)就是檢測(cè)系統(tǒng)或方法的生物檢測(cè)低限.
生物檢測(cè)低限定義為:以檢測(cè)低限加2或3倍檢測(cè)限樣品標(biāo)準(zhǔn)差的方式,確定檢測(cè)系統(tǒng)或方法可定量報(bào)告分析物提取低濃度或其他量值的限值。
生物檢測(cè)低限（BLD）的具體度量方式為：
95% 的可能性：BLD=LLD 2s檢測(cè)限樣品
99.7%的可能性: BLD=LLD 3.s檢測(cè)限樣品
本詞語(yǔ)較完善地表示實(shí)際樣品的檢測(cè)限度,如什么濃度才是零值或沒(méi)有分析物有差異.在證實(shí)廠商的BLD說(shuō)明時(shí)，應(yīng)使檢測(cè)限樣品和濃度的廠商的說(shuō)明相同。
四、 功能靈敏度（Functional Sensitivity ，F(xiàn)S）
功能靈敏度定義為：以天間重復(fù)CV為20%時(shí)對(duì)應(yīng)檢測(cè)限樣品具有的平均濃度，確定檢測(cè)系統(tǒng)或方法可定量報(bào)告分析物的最低濃度或其他量值的限值。為了估計(jì)FS，須用多個(gè)檢測(cè)限濃度來(lái)確定在低濃度處的精密度表現(xiàn)，從中選擇具20%CV的濃度。在證實(shí)廠商的FS的明時(shí)，使用的檢測(cè)限樣品濃度應(yīng)和廠商的說(shuō)明相同。
五、 實(shí)驗(yàn)須考慮的因素
一般制備兩種不同類(lèi)型的樣品。一個(gè)是“空白”樣品，即不含有分析物，分析物濃度為零。另一個(gè)是“檢測(cè)限”樣品，即含有低濃度的分析物。在有些場(chǎng)合下，需要制備幾份“檢測(cè)限”樣品�？瞻缀蜋z測(cè)限樣品由檢驗(yàn)方法作重復(fù)檢測(cè)。計(jì)算各自的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。不同的檢測(cè)限由空白和檢測(cè)限樣品數(shù)據(jù)計(jì)算出來(lái)。
1． 空白液：一份空白液用作空白，其他用于制備檢測(cè)限樣品。理想的空白液應(yīng)具有和檢驗(yàn)的病人樣品相同的基體。但是，常使用檢測(cè)系統(tǒng)的系列標(biāo)準(zhǔn)品中的“零標(biāo)準(zhǔn)”作為空白。對(duì)某些項(xiàng)目，可使用術(shù)后無(wú)某疾病的病人樣品（如：前列腺腫瘤術(shù)后病人的無(wú)PSA血清）為空白樣品。
2． 檢測(cè)限樣品：在證實(shí)某方法的靈敏度性能時(shí)，對(duì)空白液加入分析物配制成檢測(cè)樣品，。加入的分析物量應(yīng)是廠商說(shuō)明的檢測(cè)濃度。在建立檢測(cè)限度時(shí)，有必要制備幾份檢測(cè)限樣品，它們的濃度應(yīng)界于預(yù)期檢測(cè)限度高低一些的范圍內(nèi)。重復(fù)檢測(cè)數(shù)：沒(méi)有具體規(guī)定，但常推薦做20次。符合臨床檢驗(yàn)對(duì)重復(fù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的要求。廠商常推薦10次，為減少開(kāi)支實(shí)驗(yàn)室也常采納作10次
3． 實(shí)驗(yàn)需要時(shí)間：如果主要從空白液的重復(fù)性了解檢測(cè)低限，常常就做批內(nèi)或短期實(shí)驗(yàn)。如果主要從“檢測(cè)限”樣品的重復(fù)性了解定量的檢測(cè)限，推薦作較長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)，代表天間測(cè)定性能。實(shí)際就做10次檢測(cè)（10d）。
計(jì)算示例：
某酶標(biāo)法的甲狀腺球蛋白試劑盒的分析靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
1． 用甲狀腺切除后恢復(fù)健康的病人血清為無(wú)甲狀腺球蛋白的空白血清。將純化的甲狀腺球蛋白加入該血清，并用空白血清作系列稀釋?zhuān)M成0，0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0ug/L的甲狀腺球蛋白樣品.
2． 空白血清作12次批內(nèi)重復(fù)測(cè)定;對(duì)其它系列樣品作天間重復(fù)測(cè)定,做了12d.記錄所有結(jié)果,列表如下:
表1 甲狀腺球蛋白分析靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1. 檢測(cè)低限
空白”0”組的均值為0.098,標(biāo)準(zhǔn)差為0.0137。這里采用99.7%的可能性來(lái)計(jì)算檢測(cè)低限。如上所述：
LLD= 0 3s0，現(xiàn) 0=0.098,SO=0.0137,
∴ LLD= 0 3s0=0.098 3×0.0137=0.139
實(shí)際上,若以空白吸光度均值為檢測(cè)的起點(diǎn)0,那么有99.7%的可能性,每次只做一個(gè)空白時(shí),出現(xiàn)最高的空白吸光度較該空白吸光度均值高0.0137的3倍,即0.041A。這些吸光度相當(dāng)于樣品具有的甲狀腺球蛋白即為本法的檢測(cè)低限。
其實(shí)，上述的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以畫(huà)出該檢測(cè)系統(tǒng)在低濃度范圍的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。將上面所有的吸光度減去空白吸光度均值，然后求每組的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。見(jiàn)表2。
現(xiàn)在0.25ug/L組減去空白后的吸光度均值為0.07625A.假定這段范圍內(nèi)甲狀腺球蛋白量和吸光度間呈線(xiàn)性.因此0.041A相當(dāng)于
0.25× 0.041 =0.13ug/L
0. 07625
所以本法的檢測(cè)低限為0.13ug.L
表2 甲狀腺球蛋白由檢測(cè)系統(tǒng)分析靈敏度計(jì)算
1、生物檢測(cè)限
由前述,空白血清如以現(xiàn)有的吸光度均值為準(zhǔn),有99.7%的可能性出現(xiàn)的空白吸光度可高到0.139A.0.25ug/L甲狀腺蛋白組減去空白后的吸光度均值為0.07625A,標(biāo)準(zhǔn)差為0.0253A;可推測(cè),有99.7%的可能性出現(xiàn)最小的吸光度為0.07625 -3×0.0253A,即0.0019A;而空白吸光度減去空白吸光度均值可能有的最高值為0.0411A.這0.0019A在空白吸光度涉及的范圍內(nèi).因此0.25ug/L不是本法的生物檢測(cè)限。0.5ug/L的99.7%的最低吸光度0.025A(已減去空白),也在空白涉及的范圍內(nèi).1.0ug/L的99.7%的最低吸光度為0.0518A(已減去空白),在0.0411A之外,說(shuō)明1.0ug/L的樣品吸光度有99.7%的可能性,一定大于空白的吸光度,能定量地報(bào)告結(jié)果。1.0ug/L為本法的生物檢測(cè)限.
3、功能靈敏底
從上面的表中可知,1.0ug/L組的重復(fù)檢測(cè)變異系數(shù)CV為19.3%,最接近20%.所以,本法的功能靈敏度為1.0ug/L.它也正好等于生物檢測(cè)限估計(jì)的限值.