要培養(yǎng)微生物,首先就需要接種,而接種必須在無菌條件下進行。這就需要建造無菌室或接種箱,為接種創(chuàng)造必要的條件。
無菌室可以建在實驗室內,作為實驗室的一個小套間。面積為4~5平方米,高2.5米左右。無菌室外應連接一個小緩沖間,面積為2平方米左右。緩沖間和無菌室的門不要建在同一條直線上,以減少空氣中雜菌進入無菌室。
無菌室和緩沖間應作到清潔、密閉性好,室內最好有換氣設備,以便在工作結束后更換室內空氣。兩個房間中應各安裝l盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈,無菌室的紫外線燈應懸吊在工作臺的正上方,距臺面1米,以發(fā)揮最大的消毒功能。無菌室內的工作臺等用具用品,應經常保持清潔,避免雜菌污染。
如果沒有條件建造無菌室,可以用木制的接種箱代替。接種箱結構簡單,容易制作,其正面安裝玻璃,便于觀察。箱前方開兩個圓洞各接連1只套袖,操作時將兩臂從套袖伸入箱內進行操作。箱內也應懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。接種箱的尺寸規(guī)格見圖9-1。
恒溫箱
用于恒溫條件下培養(yǎng)微生物。恒溫箱的調溫范圍一般為20~45℃之間。培養(yǎng)酵母菌和霉菌時,一般可調至28℃,培養(yǎng)細菌和放線菌時,可根據(jù)菌種的生長溫度進行調溫,一般為30~37℃。
電烘箱(干燥箱)
用于玻璃器皿等物的烤干和滅菌。電烘箱的調溫的范圍一般為40~180℃,對玻璃器皿等物進行滅菌時,可將溫度調至160℃,滅菌4小時,即可將器皿上的微生物全部殺死。滅菌完畢后,在電烘箱溫度還沒有降到50~70℃以前,不要打開電烘箱,以免器皿破裂。
冰箱
用于保藏菌種和需要低溫保存的藥品。
高壓蒸汽滅菌鍋
是微生物學實驗中最重要的滅菌工具,用于一般培養(yǎng)基和玻璃器皿等物的滅菌。在15磅/英寸2壓力下(121.6℃),滅菌15~30分鐘,可以殺死包括芽孢在內的全部微生物。
離心機
用它使菌體和液體培養(yǎng)基分開。一般多使用普通小型“蘑菇”式離心機,最高轉數(shù)為4000轉/分,用電力啟動。如果沒有條件置備電動離心機,可用手搖離心器代替。
接種針
用于接種和分離微生物。根據(jù)不同用途做成針狀、環(huán)狀、鉤狀、刀狀和鏟狀等。接種針由針頭和針柄兩部分組成。針頭由白金或鉻鎳合金(細電爐絲)制成,長約7厘米。針柄可用玻璃棒或鋁管制成,長約20厘米。將針頭燒結在針柄上即成。
天平
用于稱量各種試劑。托盤天平或扭力天平均可,感量應為0.01克。
酒精燈
用于接種時對接種工具進行滅菌。酒精燈火焰上部熱度最高,應利用這一最高溫度區(qū)燒灼接種針或試管口。
顯微鏡
用于觀察微生物的形態(tài)結構,顯微鏡應配備油鏡頭,以便能看清細菌的形態(tài)。
常用玻璃器皿
(1)培養(yǎng)皿(平皿):用于盛放固體培養(yǎng)基,是培養(yǎng)微生物和觀察微生物的主要器皿。一般直徑為9厘米。可根據(jù)活動規(guī)模準備若干個。
(2)試管:用于盛放斜面培養(yǎng)基(固體),是接種微生物的主要器皿。常用的有兩種。較大的長220毫米,直徑20毫米;較小的長150毫米,直徑15毫米。可根據(jù)需要選用其中一種,并準備若干個。
(3)錐形瓶:用于盛放液體培養(yǎng)基。是用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的主要器皿。一般容量為50、100、250、300、500、1000毫升?筛鶕(jù)活動需要選擇和準備。
(4)量筒、量杯:用于定量量取各種液體。
(5)移液管(吸管):一般容量為0.5、1、5、10毫升等,可根據(jù)需要選擇和準備。
(6)其它:燒杯、漏斗等。