先區(qū)分幾個(gè)小概念

保留時(shí)間(T)：

從進(jìn)樣開始到某個(gè)組分的色譜頂點(diǎn)的時(shí)間間隔稱為該組分的保留時(shí)間。即從進(jìn)樣到柱后某組分出現(xiàn)濃度極大時(shí)的時(shí)間間隔。

死時(shí)間(t)：

分配系數(shù)為0的組分的保留時(shí)間稱為死時(shí)間。通常將空氣或者甲烷視為此種組分，用來測定死時(shí)間。

調(diào)整保留時(shí)間（t）：

某組分由于溶解（或者吸附）于固定相，比不溶解（或者不吸附）的組分在柱中多停留的時(shí)間稱為調(diào)整保留時(shí)間；

調(diào)整保留時(shí)間=保留時(shí)間—死時(shí)間；（Vd）。

※在實(shí)驗(yàn)室條件下（溫度，固定相等）一定時(shí)，調(diào)整保留時(shí)間僅決定于組分的性質(zhì)，因此調(diào)整保留時(shí)間是定性的基本參數(shù)。

液相色譜中保留時(shí)間的波動(dòng)

與哪些因素有關(guān)

一般而言，與如下因素有關(guān)：
1 操作因素；
2 色譜柱的質(zhì)量；
3 儀器系統(tǒng)，尤其是輸液泵的性能。

氣相色譜儀保留時(shí)間不重復(fù)故障排除方法

引起保留時(shí)間不重復(fù)的最可能原因只有兩個(gè):

柱溫不穩(wěn)定；

流速有變化。

※檢測器的故障不會(huì)造成保留時(shí)間不重復(fù),造成保留時(shí)間不重復(fù)的其它原因有進(jìn)樣技術(shù)不佳，進(jìn)樣量過大及柱損傷等。

排除保留時(shí)間不重復(fù)故障的步驟如下：

（1）重復(fù)進(jìn)樣檢查：

為了進(jìn)一步證實(shí)保留時(shí)間不重復(fù)故障，應(yīng)首先檢查進(jìn)樣的重復(fù)性。在重復(fù)進(jìn)樣時(shí)最好由一人獨(dú)立操作，這樣能較好地解決進(jìn)樣時(shí)間的重復(fù)性問題；如果重復(fù)進(jìn)樣后保留時(shí)間仍然不能重復(fù)，則應(yīng)轉(zhuǎn)入下一步。

（2）溫控精度及程序升溫重復(fù)性檢查：

恒溫分析時(shí)應(yīng)首先檢查柱室溫度是否穩(wěn)定在原分析操作所要求的設(shè)定值上。

必要時(shí)要檢查柱室溫度的穩(wěn)定性，如,設(shè)定值及實(shí)際柱溫與原分析條件有偏差，應(yīng)以原分析條件為準(zhǔn)；

如果柱室溫度在運(yùn)行中有突然跳動(dòng)，應(yīng)進(jìn)行溫度控制故障檢查與排除。

在應(yīng)用程序升溫的場合下，要檢查程序升溫過程起始、終止柱溫及升溫速率與原分析條件是否一致。

在檢查時(shí)應(yīng)注意，每次重新升溫時(shí)，是否有足夠的時(shí)間使起始溫度保持一致，特別是起始溫度很接近室溫時(shí)，更應(yīng)如此。

程序升溫的升溫速率可以通過先測定升溫中始、終兩點(diǎn)間所需時(shí)間值，然后用終溫與始溫之差除以該時(shí)間值而加以驗(yàn)證。

程序升溫中還有一種情況不易為操作者所發(fā)現(xiàn)：那就是在升溫過程中溫度的變化很不均勻，忽快忽慢，但總的升溫速率卻看不出變化。

對此現(xiàn)象可采取記錄程序升溫曲線而加以比較。

如無自動(dòng)記錄方式可用手工法逐段加以記錄，程序升溫結(jié)束時(shí)再逐段加以對照，即可。

（3）載氣流速檢查：

載氣流速的改變是引起保留時(shí)間不重復(fù)的另一個(gè)重要原因。

可用皂膜流量計(jì)測定柱后或檢測器之后的實(shí)際流速加以證實(shí)。

對于恒溫分析來說，主要檢測實(shí)測值與預(yù)定值之間的偏差，必要時(shí)重新調(diào)整設(shè)定值使流速達(dá)到預(yù)定值要求。

對于程序升溫來說，必須檢查溫度處于始、終兩點(diǎn)時(shí)載氣流速是否有較大的變化。如果在始、終兩點(diǎn)間流速之差超過2mL/s（當(dāng)柱內(nèi)徑為4mm時(shí)）即認(rèn)為穩(wěn)流特性不好，這時(shí)需進(jìn)一步檢查系統(tǒng)是否漏氣，穩(wěn)流閥、穩(wěn)壓閥工作壓力是否合乎要求。

系統(tǒng)漏氣不論對程序升溫色譜，還是恒溫色譜說來都是產(chǎn)生保留值不重復(fù)的一個(gè)不應(yīng)忽略的原因。

在系統(tǒng)漏氣中進(jìn)樣口隔墊的漏氣是經(jīng)常產(chǎn)生的，在高溫操作下頻繁進(jìn)樣時(shí)要注意及時(shí)更換。

（4）色譜柱檢查：

如果在氣密性及載氣流速方面均無異常，就應(yīng)懷疑是色譜柱本身出了問題，對色譜柱進(jìn)行檢查。

首先注意色譜峰形有否拖尾，如拖尾則應(yīng)減少進(jìn)樣量或稀釋樣品濃度，以免色譜柱過載。

如減少進(jìn)樣量后保留值重復(fù)性提高，則說明原柱固定相有少量流失或充填欠佳；此時(shí)原色譜柱還仍能使用。

如果上述方法也無效，則說明色譜柱已發(fā)生損壞，必須更換新柱子。

怎樣解決液相色譜保留時(shí)間的漂移？

為什么會(huì)漂移？

保留時(shí)間飄移可能的原因有：
1 柱子沒有達(dá)到平衡；
解決：

平衡更長的時(shí)間來解決。

2 實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度發(fā)生變化；保留時(shí)間和溫度有很大的關(guān)系，一般溫度高，出峰快。
解決：

這里的溫度不僅指柱溫，其實(shí)還包括流動(dòng)相溫度。柱溫一般都有規(guī)定，用柱溫箱就可以平衡了，但是流動(dòng)相溫度沒有規(guī)定，很多人不知道也要保持不變。在空調(diào)房里做，保持住室溫不變，一般會(huì)好很多。

3 流動(dòng)相比例發(fā)生變化；
解決：

配置時(shí)盡量混合均勻；配置時(shí)盡量保證比例沒有偏離；使用時(shí)盡量保證導(dǎo)管接口處不揮發(fā)泄漏；長時(shí)間不用的要密封，最好廢棄不用。

4 長期使用后柱子損耗；
解決：

重新，再生柱子，或更換新的。

你要如何鎖定保留時(shí)間？

所謂保留時(shí)間鎖定，就是使特定化合物的保留時(shí)間在不同儀器、不同色譜柱（但標(biāo)稱固定相和相比相同）之間保持不變。為了討論這一技術(shù)的基本原理，要從影響保留時(shí)間重現(xiàn)性的因素說起！

決定保留時(shí)間的因素都有啥？

化合物的性質(zhì)、固定液的性質(zhì)和操作條件；

如果前兩個(gè)因素不變（對于特定的化合物和GC儀器系統(tǒng)，這當(dāng)然是成立的）；

只有操作條件會(huì)變，即，載氣流速、柱溫、毛細(xì)管柱規(guī)格和檢測器類型等。

載氣控制：

對于同種載氣來說，壓力和流速是影響保留時(shí)間的參數(shù)；

不同廠家的壓力表和流量計(jì)的制造精度有所不同，故當(dāng)不同儀器的壓力和流量顯示完全一致時(shí)，柱內(nèi)流量也不盡相同；

現(xiàn)在有了EPC，這一問題基本得到了解決；

雖然同一廠家制造的EPC不可能每項(xiàng)都嚴(yán)格一致，但差異微小，通過壓力的自動(dòng)調(diào)節(jié)完全可以補(bǔ)償這一差異。

溫度控制：

保留時(shí)間對溫度極為敏感，過去采用水銀溫度計(jì)測量柱溫時(shí)，重現(xiàn)性顯然有問題�，F(xiàn)在都用熱敏元件與電子線路來控制溫度，精度大為提高。不同儀器間溫度重現(xiàn)性令人滿意。即使有0.5℃的溫度差異，我們?nèi)阅芡ㄟ^調(diào)節(jié)柱前壓的辦法來使保留時(shí)間達(dá)到重現(xiàn)。

色譜柱規(guī)格：

一、不同廠商的色譜柱，盡管標(biāo)稱規(guī)格一致，但難免有內(nèi)徑的不均勻、固定液膜厚的變化、以及柱長的不精確，這些都會(huì)造成保留時(shí)間的波動(dòng)。

二、同一根色譜柱在使用過程中會(huì)發(fā)生變化，比如，重新安裝或因柱污染而截去1～2cm后，若其他操作條件不變，保留時(shí)間就不能重現(xiàn)了。

目前，同一廠商的色譜柱制造重現(xiàn)性已相當(dāng)高，而不同廠家的色譜柱尚不能完全重現(xiàn)，尤其是極性柱。但我們?nèi)绻�采用同一廠家的色譜柱，就可基本解決這一問題。至于色譜柱長度的變化，可以通過調(diào)節(jié)柱前壓來補(bǔ)償。

檢測器類型：

常規(guī)檢測器：

常壓下工作；

MS：

高真空下工作；

AED：

高于大氣壓（如，10kPa）下工作。這樣，當(dāng)比較常規(guī)檢測器和MS或AED所得結(jié)果時(shí)，即使柱前壓嚴(yán)格一致，柱壓降也不同，保留時(shí)間就不能重現(xiàn)。采用EPC時(shí)，就很容易通過調(diào)節(jié)壓力使柱壓降保持相同。
通過上述分析我們可以得出結(jié)論，只要儀器的載氣和溫度控制精度足夠高，只要色譜柱標(biāo)稱規(guī)格一致，就可以通過調(diào)節(jié)柱前壓的方法來補(bǔ)償操作參數(shù)的微小變化，從而實(shí)現(xiàn)保留時(shí)間的重現(xiàn)，這就是RTL的基礎(chǔ)。

小結(jié)

保持保留時(shí)間的重復(fù)性是重中之重！同時(shí)，也要盡可能避免保留時(shí)間的漂移！關(guān)注保留時(shí)間的穩(wěn)定性也能反映流動(dòng)相、檢測器等的正常情況！