移液器又稱移液槍,是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具,被廣泛用于食品、生物、化學(xué)等領(lǐng)域。
疑惑:
實(shí)驗(yàn)中,需要用移液槍來移液,槍頭滅菌了但槍不能滅菌,怎么實(shí)現(xiàn)無菌操作?要移的液體量只有幾十微升用移液管不好實(shí)現(xiàn),主要是擔(dān)心槍里面的無菌情況,在吸打時(shí)那些空氣是直接接觸液體的呀。
支招:
1.有可以滅菌的移液槍,如果沒有 還是用吸管好 別圖省事~或者可以用紫外線進(jìn)行照射,表面滅菌還可以。
2.槍頭滅菌,移液槍70%酒精擦拭。移液時(shí)注意慢吸快打,移液量不超過槍頭2/3即可。
3.你可以在槍頭上部塞上脫脂棉再去滅菌,然后再使用。
4.我看用移液槍的問題關(guān)鍵在于你要求的無菌級(jí)別高低以及操作的規(guī)范和熟練程度。我現(xiàn)在做活菌計(jì)數(shù)就用移液槍做梯度稀釋,沒有問題,很少有雜菌污染。
體會(huì):
1.移液槍頭可以浸泡在75%酒精中過夜,甚至更長(zhǎng)時(shí)間。
2.移液時(shí)槍盡量不要碰到器皿壁。
3.最好在超凈工作臺(tái)上操作,超凈工作臺(tái)內(nèi)的空氣可以認(rèn)為是無菌的,這樣吸進(jìn)槍管中的空氣很少,可以認(rèn)為樣品不會(huì)被污染。
4.操作熟練程度關(guān)系實(shí)驗(yàn)成敗,建議你先用普通肉湯培養(yǎng)基,和其他非實(shí)驗(yàn)菌進(jìn)行操作練習(xí),熟練后再進(jìn)行你的正式試驗(yàn)。
5.關(guān)鍵是滅菌的tip頭是要有脫脂棉的tip頭,然后對(duì)移液槍進(jìn)行表面消毒就行了。
6.其實(shí)不用那么麻煩,你可以將一般的移液槍放在超凈臺(tái)中,打開紫外燈滅菌半小時(shí),使用時(shí)先將移液槍用(70%-75%)酒精棉擦拭表面,然后在酒精燈火焰上2cm左右處將移液槍反復(fù)吹打幾次即可。有網(wǎng)友是這么操作的,也沒有出現(xiàn)染菌的問題!
7.移液槍放置在超凈臺(tái)中和臺(tái)子一起紫外滅菌半小時(shí);槍身用75%酒精擦拭;槍頭塞入脫脂棉一起滅菌;這樣使用應(yīng)該沒問題,以網(wǎng)友實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)來說。
8.槍頭是經(jīng)過高壓消毒的,直接接觸液體的是槍頭又不是別的,網(wǎng)友覺得剩下的無非就是無菌操作的問題了,紫外線消毒移液槍就足夠了,還泡啥泡,多余。
小結(jié)
關(guān)于如何保證移液器的無菌使用,不少朋友提出用紫外線照射,實(shí)際上并不恰當(dāng)。
首先,移液器的桿柄(通常為白色部分)是有機(jī)高分子化合物,說白了就是類似塑料的東西。日常生活中大家知道,露天暴曬的塑料容易變脆。經(jīng)常用大劑量、長(zhǎng)時(shí)間的紫外線照射移液器同樣會(huì)極度加速其老化。我們實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)有一把槍從前面的金屬圈處(圖中a處)斷掉,維修人員給出的解釋之一就是經(jīng)常照射使其脆性增加。
其次,將移液器放在超凈臺(tái)中照射時(shí),其靠近臺(tái)面的一側(cè)以及被金屬架遮蓋的部分并不能被照到,所以消毒是不徹底的。
有朋友提出將移液器在酒精燈2cm處反復(fù)吸吹幾次以消毒內(nèi)部空氣的方法。這樣操作時(shí)移液器的的末端同樣可能因溫度高而加速老化,天長(zhǎng)日久甚至可能導(dǎo)致局部變形,而一旦末端不是絕對(duì)的圓潤(rùn),且老化后喪失應(yīng)有的彈性,其與槍頭之間的密封性將不能得到保證。
另外對(duì)于實(shí)驗(yàn)室多人公用的移液器,有時(shí)會(huì)有人不注意就將培養(yǎng)液等吸入移液器桿柄而又未能及時(shí)清理,最后會(huì)在桿柄內(nèi)部形成衛(wèi)生死角,甚至成為污染源。
根據(jù)經(jīng)驗(yàn),針對(duì)移液器(或類似結(jié)構(gòu)者)推薦下列使用、保養(yǎng)方法:
1.日常消毒,用70%酒精棉球擦拭移液器桿柄表面。使移液器末端(a端)稍低于手持端(c端)并使金屬推桿在下方(如上圖),使用吸滿酒精的棉球,還能夠保證移液器的金屬退桿內(nèi)面被酒精覆蓋、消毒。按動(dòng)金屬退桿同時(shí)擦拭被退桿末端(a處)環(huán)柄包住的部分。對(duì)重要實(shí)驗(yàn)若需更加仔細(xì)消毒,可將金屬退桿拔下,徹底擦拭消毒。
2.不定期將金屬退桿拔下,將白色塑料桿柄從b處擰下,用酒精棉球清理?xiàng)U柄內(nèi)部。此時(shí)可能需要使用鈍頭鐵絲等挾持小棉球以便夠著末端較細(xì)的部位。