檢驗的基本步驟
1.樣品采集
樣品的采集又稱采樣、樣品的制備,是指抽取有一定代表性的樣品,供分析化驗用。樣品的采集一般包括三個內(nèi)容:即抽樣、取樣和制樣。采樣時必須注意樣品的生產(chǎn)日期、批號、代表性和均勻性。采樣數(shù)量應能滿足檢驗項目對試樣量的需要,采樣容器根據(jù)檢驗項目,選用硬質(zhì)玻璃瓶或聚乙烯制品。
采樣一般步驟為:①原始樣的采集;②原始樣的混合;③縮分原始樣至需要的量。對于不同的樣品應采用不同的方法進行樣品的采集。
液體樣品的采集:對于大型桶裝、罐裝的樣品,可采用虹吸法分別吸取上、中、下層樣品各0.5L,混勻后取0.5~1.0L。對于大池裝樣品可在池的四角、中心各上、中、下三層分別采樣0.5L,充分混勻后取0.5~1.0L。
固體樣品的采集:應充分均勻各部位樣品的原始樣,以使樣品具有均勻性和代表性。對于大塊的樣品,應切割成小塊或粉碎、過篩、粉碎,過篩時不能有物料的損失和飛濺,并全部過篩,然后將原始樣品充分混勻后,采用四分法進行縮分,一直至需要的樣品量,一般為0.5~1.0kg。
四分法的操作步驟為:先將樣品充分混合后堆積成圓錐形,然后從圓錐的頂部向下壓,使樣品被壓成75px以內(nèi)的厚度,然后從樣品頂部中心按“十”字型均勻地劃分成四部分,取對角的兩部分樣品混勻,如樣品的量達到需要的量即可作為分析用樣品。如樣品的量仍大于需要的量,則繼續(xù)按上述方法進行縮分,一直縮分到樣品需要量。
采樣后要立即密塞、貼上標簽,并認真填寫采樣記錄。采樣記錄須寫明樣品的名稱、采樣單位、地址、日期、樣品批號或編號、采樣條件、包裝情況、采樣數(shù)量、檢驗項目及采樣人。樣品應按不同的檢驗項目妥善包裝、保管。
一般樣品在檢驗結束后,應保留一個月,以備需要時復檢。易變質(zhì)食品不予保留。保存時應加封并盡量保持原狀。為防止樣品在保存中受潮、風干、變質(zhì),保證樣品的外觀和化學組成不發(fā)生變化,一般需要冷藏、避光保存。檢驗取樣一般取可食部分,以所檢驗的樣品計算。感官判斷不合格的樣品不必進行理化檢驗,直接判為不合格產(chǎn)品。
外地調(diào)入的食品應結合運貨單、獸醫(yī)衛(wèi)生人員證明、商品檢驗機關或衛(wèi)生部門的衛(wèi)生許可證、生產(chǎn)許可證及檢驗合格證或化驗單,了解起運日期、來源地點、數(shù)量、品質(zhì)及包裝情況,如在食品工廠、倉庫或商店采樣時,應了解食品的批號、制造日期、廠方化驗記錄及現(xiàn)場衛(wèi)生狀況,同時應注意食品的運輸、保管條件、外觀、包裝容器等情況。
2.樣品處理
樣品中往往含有一定的雜質(zhì)或其他干擾分析的成分,影響分析結果的正確性,所以在分析檢驗前,應根據(jù)樣品的性質(zhì)特點、分析方法的原理和特點,以及被測物和干擾物的性質(zhì)差異,使用不同的方法,把被測物與干擾物分離,或使干擾物分離除去,從而使分析測定得到理想的結果。
樣品處理的常用方法有:
①溶劑萃取法:其原理是利用被測物與干擾物溶解性的不同將它們分開。如棒曲霉毒素的測定,常用有機溶劑抽提棒曲霉毒素,然后再用高效液相色譜法測定。此法操作簡單、分離效果好,但萃取劑常易揮發(fā)、易燃、易爆且具有毒性,所以操作時應加以注意。
②有機質(zhì)分解法:其原理是利用高溫處理,將樣品中的有機質(zhì)氧化分解,其中C、H、O元素以CO2和H2O逸出,被測的金屬元素等成分被釋放出來,以利進一步測定。具體方法有干法灰化和濕法消化兩種。
干法灰化是將試樣放置在坩堝中,先在低溫小火下炭化,除去水分、黑煙后,再在高溫爐中以500~600℃的高溫灰化至無黑色炭粒。如果樣品不易灰化完全,可先用少量HNO3潤濕試樣,蒸干后再進行灰化,必要時也可加NH4NO3、NaNO3等助灰化劑一同灰化,以促進灰化完全,縮短灰化時間,減少易揮發(fā)性金屬(如Hg)的損失;一蟮幕曳謶獮榘咨珳\灰白色。這種方法有機質(zhì)破壞徹底,操作簡便,空白值小,常用于樣品中灰分的測定,但操作的時間較長。
濕法消化是在強酸性溶液中,利用H2SO4、HNO3、H2O2等氧化劑的氧化能力使有機質(zhì)分解,被測的金屬以離子狀態(tài)最后留在溶液中,溶液經(jīng)冷卻定容后供測定使用。這種方法在溶液中進行,加熱的溫度較干法灰化的溫度要低,反應較緩和,金屬揮發(fā)損失較少,常用于樣品中金屬元素的測定。消化過程中會產(chǎn)生大量的有害氣體,因此消化操作應在通風櫥或通風條件較好的地方進行。由于操作過程中添加了大量的試劑,容易引入較多的雜質(zhì),所以在消化的同時,應做空白試驗,以消除試劑等引入的雜質(zhì)的誤差。
③蒸餾法:蒸餾法是利用被測物質(zhì)中各組分揮發(fā)性的差異來進行分離的方法。既可以除去干擾組分,也可以用于被測組分蒸餾逸出,收集餾出液進行分析。如常量凱氏定氮法測蛋白質(zhì)含量,就是將蛋白質(zhì)消化處理后,轉(zhuǎn)變?yōu)閾]發(fā)性氮,再進行蒸餾,用HBO3吸收餾出的氨,然后測出吸收液中氨的含量,再換算成蛋白質(zhì)的含量。
蒸餾時加熱的方法可以根據(jù)被蒸餾物質(zhì)的沸點和特性來確定,被蒸餾的物質(zhì)性質(zhì)穩(wěn)定、不易爆炸或燃燒時,可用電爐直接加熱。對沸點小于90℃的蒸餾物,可用水浴;沸點高于90℃的液體,可用油浴、沙浴、鹽浴法。對于一些被測成分,常壓加熱蒸餾容易分解的,可采用減壓蒸餾,一般用真空泵或水力噴射泵進行減壓。
對某些具有一定蒸汽壓的有機成分,常用水蒸氣蒸餾法進行分離。如白酒中揮發(fā)酸的測定,在水蒸氣蒸餾時,揮發(fā)酸與水蒸氣按分有壓成正比地從樣品溶液中一起蒸餾出來,從而加速了揮發(fā)酸的蒸餾。
④鹽析法:利用向溶液中加入某種無機鹽,使溶質(zhì)在原溶劑中的溶解度大大降低,而從溶液中沉淀析出,這種方法叫鹽析。如在蛋白質(zhì)溶液中,加入大量的鹽類,特別是加入重金屬鹽,使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀出來。在進行鹽析操作時,應注意溶液中所要加入的物質(zhì)的選擇應是不會破壞溶液中所要析出的物質(zhì),否則達不到鹽析提取的目的。
⑤化學分離法主要有以下幾種方法:
a、磺化法和皂化法:常用來處理油脂或含脂肪的樣品。例如,農(nóng)藥殘留分析和脂溶性維生素測定中,油脂被濃H2SO4磺化或被堿皂化,由憎水性變成親水性,使油脂中需檢測的非極性物質(zhì)能夠較容易地被非極性或弱極性的溶劑提取出來。
b、沉淀分離法:是利用沉淀反應進行分離的方法。在試樣中加入適量的沉淀劑,使被測物質(zhì)沉淀出來,或?qū)⒏蓴_沉淀除去,從而達到分離的目的。
c、掩蔽法:利用掩蔽劑與樣液中干擾成分作用使干擾成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴桓蓴_成分,即被掩蔽起來。這種方法可以在不經(jīng)過分離干擾成分的操作條件下消除其干擾作用,簡化分析步驟,因而在食品分析中應用廣泛,常用于金屬元素的測定。
⑥澄清和脫色:澄清是用來分離樣品中的渾濁物質(zhì),以消除其對分析測定的影響。通常采用澄清劑,使渾濁物質(zhì)與其作用沉淀,從而將渾濁物質(zhì)除去。澄清劑應不和被測組分或不影響被測組分的分析。脫色是使樣品中易對測定結果產(chǎn)生干擾的有色物質(zhì)進行去除,以消除干擾的方法。通?刹捎妹撋珓﹣磉M行。常用的脫色劑有:活性炭、白土等。
⑦色層分離法(又稱為色譜分離法):是一種在載體上進行物質(zhì)分離的方法的總稱。根據(jù)分離的原理的不同,可分為吸附色層分離、分配色層分離和離子交換色層分離等。這類方法分離效果好,在食品分析中的應用逐漸廣泛。
⑧濃縮:食品樣品經(jīng)提取、凈化后,有時凈化后的溶液體積較大,在測定前需進行濃縮,以提高被測成分的濃度。常用的濃縮方法有常壓和減壓濃縮法兩種。其主要原理是利用在特定的條件下物質(zhì)中水分的蒸汽壓大于空氣的分壓,使水分從樣品中逸散,從而將樣品濃縮。
3.樣品檢測方法
樣品的分析檢測方法很多,同一檢測項目可以采用不同的方法進行測定,選擇檢測方法時,應根據(jù)樣品的性質(zhì)特點,被測組分的含量多少,以及干擾組分的情況,采取最適宜的分析方法,既要簡便又要準確快速。食品檢驗主要分析的對象是樣品中已明確的待檢成分。果汁生產(chǎn)中的分析方法一般較為固定。具體檢測方法將在后各面介紹。
4.分析結果的記錄與處理
分析結果應準確記錄,并按規(guī)定的方法進行處理,用正確的方式表示,才能確保分析結果的最終正確性,具體方法在后面詳細介紹。
對于結果的表述,平行樣的測定值報告其算術平均值,一般測定值的有效數(shù)字的數(shù)位應能滿足衛(wèi)生標準的要求,甚至高于衛(wèi)生標準的要求,報告結果應比衛(wèi)生標準多一位有效數(shù)字,如鉛的含量,衛(wèi)生標準為1mg/kg;報告值應為1.0mg/kg。
樣品測定值的單位,應與衛(wèi)生標準一致。常用的單位有:g/kg,g/L,mg/kg,mg/L,μg/kg,μg/L等。