1 主題內(nèi)容與適用范圍
本標準規(guī)定了測定有機肥料速效磷的檸檬酸浸提-釩鉬黃比色法。
本標準適用于含泥質(zhì)有機肥料中速效磷含量的測定。
2 引用標準
GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格及試驗方法
3 測定原理
檸檬酸是一種弱酸,它提取的磷被認為對作物有效。在一定酸度下,溶液中的磷與偏釩酸鹽和鉬酸鹽作用,形成黃色三元雜多酸。在一定范圍內(nèi)其黃色深淺與磷的濃度正相關(guān)。
4 試劑
所用試劑除注明者外,均為分析純。實驗用水應符合GB/T 6682 第五章中三級水的規(guī)格。
4.1 硫酸(GB 625)。
4.2 檸檬酸:2%(m/V)溶液
稱取20g檸檬酸(HG 3—1108)溶于水并稀釋至1L。此液使用前配制。
4.3 硫酸:5%(V/V)溶液
吸取5mL硫酸(4.1)緩緩加入到90mL水中,冷卻后加水至100mL。
4.4 氫氧化鈉:10%(m/V)溶液
稱取10g氫氧化鈉(GB 629)溶于100mL水中。
4.5 釩鉬酸銨試劑
A液:稱取25g鉬酸銨(GB 657)溶于400mL水中;
B液:稱取1.25g偏釩酸銨(HG 3—941)溶于300mL沸水中,冷卻后加250mL硝酸(GB 626),冷卻。
在攪拌下將A液緩緩傾入B液中,用水稀釋至1L,混勻,貯于棕色瓶中。
4.6 二硝基酚指示劑:0.2%(m/V)溶液
稱取0.2g2,4或2,6-二硝基酚溶于100mL水中。
4.7 磷標準貯備溶液:0.1mg/mL
稱取0.4390g經(jīng)105℃烘干2h的磷酸二氫鉀(GB 1274),用水溶解后,轉(zhuǎn)入1L容量瓶中,加入5mL硫酸(4.1),冷卻后加水定容。此溶液1mL含磷(P)0.1mg。
4.8 磷標準溶液:50μg/mL
吸取50.0mL磷標準貯備溶液(4.7)放入100mL容量瓶中,加水定容。此溶液1mL含磷(P)50μg。
5 儀器、設備
通常用實驗室儀器和
5.1 天平:感量0.01g。
5.2 振蕩機(往返式,160~170r/min)或其他相同效果的振蕩機。
5.3 分光光度計。
6 試樣的制備
取風干的實驗室樣品充分混勻后,按四分法縮減至約100g,粉碎,全部通過1mm孔徑篩,裝入樣品瓶中,備用。
7 分析步驟
7.1 試樣溶液制備
稱取試樣5.00g置于200mL塑料瓶或250mL三角瓶內(nèi),加入100.0mL25±1℃的檸檬酸溶液(4.2),加塞,在25±1℃下振蕩30min,用無磷濾紙干過濾入干燥的三角瓶中,棄去最初少量濾液。
同一試樣做兩個平行測定。
7.2 空白溶液制備
除不加試樣外,應用的試劑和操作步驟同7.1。
7.3 校準曲線繪制
吸取磷標準溶液(4.8)0,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00mL于7個50mL容量瓶中,加入與吸取試驗溶液等體積的空白溶液,加水至30mL左右,加入2滴2,4或2,6-二硝基酚指示劑溶液(4.6),用氫氧化鈉溶液(4.4)和硫酸溶液(4.3)調(diào)節(jié)溶液至剛呈微黃色,加入10.0mL釩鉬酸銨試劑(4.5),搖勻,加水定容。此溶液為1mL含磷(P)0,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00μg的標準溶液系列。在室溫15℃以上條件下,放置20min后(最長不超過4h),在分光光度計上波長440nm處用2cm光徑比色皿,以空白溶液調(diào)節(jié)儀器零點,進行比色,讀取吸光度。根據(jù)磷濃度和吸光度繪制校準曲線或求出直線回歸方程。
7.4 測定
吸取5.00mL試樣溶液(7.1)放入50mL容量瓶中,加水至30mL左右,與標準溶液系列同條件顯色、比色,讀取吸光度。
8 分析結(jié)果的表述
速效磷(P)含量以mg/kg表示,按下式計算:
速效磷(P)=c·V·D/m
式中:c── 由校準曲線查得或由回歸方程求得顯色液磷濃度,μg/mL;
V── 顯色液體積,50mL;
D── 分取倍數(shù),試樣提取液體積/分取體積,100/5;
m── 稱取試樣質(zhì)量,g。
所得結(jié)果保留整數(shù)。
9 允許差
9.1 兩平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值作為測定結(jié)果。
9.2 兩平行測定結(jié)果的差不得超過平均值的5%。