特殊樣品的移液技巧
1 移取揮發(fā)性樣品要注意兩點:
a.在移液前務(wù)必潤洗兩次;
b.在吸液完成后要盡快排液。
2 移取高粘度樣品
采用反向移液的模式:在吸液時把吸/排液按鈕按到第二檔(第二停止點),而在排液時把按鈕按到第一檔(第一停止點)。另外,在吸液和排液時均需要3-5秒的停留時間。
3 移取高密度/低密度樣品
移液器的精度數(shù)值都是基于轉(zhuǎn)移純水,如果樣品的密度與水的密度相差很大,那么精度也會相應(yīng)的差很多。因此,在移液前需要先搞清楚樣品的密度,然后把量程調(diào)節(jié)成待轉(zhuǎn)移樣品體積與密度的乘積。
舉例而言,如果一個樣品的密度是1.2g/cm3,您需要轉(zhuǎn)移300ul,那您應(yīng)該把量程設(shè)置為360ul。這只是粗略的調(diào)整方法,嚴(yán)格的調(diào)整方法還需要借助量器或天平作為輔助工具進(jìn)行準(zhǔn)確的計算。
4 移取高溫/低溫樣品
在移取高溫/低溫樣品時需要注意三點:
第一,在移液前絕對不可以潤洗吸頭;
第二,每次移液都要換一個新吸頭;
第三,吸液和排液都要盡快完成。
幾種常見取液故障Tips:
使用任何儀器都會出現(xiàn)一些故障,下面將為大家分析移液器出現(xiàn)故障的原因以及處理的方法:
一、移液器吸液嘴內(nèi)有殘液:
出現(xiàn)這種情況是由于吸液嘴不合適,應(yīng)立即更換移液器原配吸液嘴。
二、移液器堵塞,吸液量太少:
出現(xiàn)這種情況是由于液體已滲進(jìn)移液器其,應(yīng)清潔并潤滑活塞和吸液嘴連件。
三、超出限定的范圍:
出現(xiàn)這種情況是由于移液器被損壞了,應(yīng)送維修點修理。
四、移液器吸液嘴推出器卡死或工作不正常:
出現(xiàn)這種情況是由于吸液嘴連件污染,應(yīng)卸下推出器套管,用75%乙醇清潔。
五、移液器滲漏或者移液量太少:
出現(xiàn)這種情況有以下幾種原因:
1.活塞和O形環(huán)潤滑不充分。
2.移液器被污染。
3.移液器吸液嘴和連件間有異物。
4.移液器吸液嘴不合適。
5.移液器吸液嘴安裝不當(dāng)。
6.移液器吸液嘴塑料濕潤不均勻。
出現(xiàn)移液故障時應(yīng):
1.加適量硅油
2.清潔并潤滑活塞和吸液嘴連件
3.清潔吸液嘴連件,裝上新吸液嘴
4.使用原配吸液嘴
5.重新裝緊
6.裝上新吸液嘴。
移液器如何進(jìn)行消毒滅菌處理?
移液器雖小,但是作為實驗室常規(guī)儀器之一,對我們的實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和精確性還是起著不小的作用,因此為了提高我們的實驗效果,本文要說說移液器的消毒滅菌處理。對于移液器而言,移液器的消毒和滅菌這兩個概念經(jīng)常被大家混為一談。而事實上,兩者是有一定區(qū)別的:消毒只是要求使移液器上的活菌控制在一定范圍內(nèi),達(dá)到無害化水平即可;而滅菌則更嚴(yán)格些,要求消滅所有活菌。因此,滅菌的處理要求要高于消毒。
移液器消毒有兩種方法:
1.化學(xué)消毒。簡單說來,就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。這對于所有移液器品牌而言應(yīng)該是都可以做到的;如果說有某種移液器無法用化學(xué)消毒這種方法來進(jìn)行消毒的話,只能證明其外殼的材質(zhì)非常之差。
2.紫外線消毒。就是用紫外線照射移液器的表面,通過破壞細(xì)胞的DNA結(jié)構(gòu)來達(dá)到消毒的目的。紫外線消毒的時間取決于輻射強(qiáng)度和細(xì)菌對紫外線的抵抗力強(qiáng)弱。大多數(shù)品牌的移液器是可以用紫外線消毒的,但仍需要事先與供應(yīng)商進(jìn)行確認(rèn),并非所有的移液器都能進(jìn)行紫外線消毒。
移液器使用小常識
1.使用合適的吸頭
為確保更好的準(zhǔn)確性和精度,建議移液量在吸頭的35%-100%量程范圍內(nèi)。
2.吸頭的安裝
對于大多數(shù)品牌的移液器,特別是多道移液器,安裝吸頭并非易事:為追求良好的密封性,需要將移液套柄插入吸頭后,左右轉(zhuǎn)動或前后搖動用力上緊。也有人會用移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊,但這樣操作會導(dǎo)致吸頭變形而影響精度,嚴(yán)重的則會損壞移液器,所以應(yīng)當(dāng)避免出現(xiàn)這樣的操作。Dragonlab(京君龍)的多道移液器沒有O型環(huán),配合有前擋點的吸頭,只需輕壓一下即可達(dá)致理想密封,實在是多道移液器使用者的福音。
3.吸頭浸入角度和深度
吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內(nèi),保持豎直為佳;吸頭浸入深度建議如下所示:移液器規(guī)格 吸頭浸入深度2µL和10µL 1 mm20uL和100uL2-3 mm200uL和1000uL 3-6 mm5000 µL和10mL6-10 mm
4.吸頭潤洗
對常溫樣品,吸頭潤洗有助于提高準(zhǔn)確性;但是對于高溫或低溫樣品,吸頭潤洗反而降低操作準(zhǔn)確性,請使用者特別注意。
5.吸液速度
移液操作應(yīng)保持平順、合適的吸液速度;過快的吸液速度容易造成樣品進(jìn)入套柄,帶來活塞和密封圈的損傷以及樣品的交叉污染。
6.移液器使用建議
1)移液時保持正確的姿勢;不要時刻緊握移液器,使用帶指鉤的移液器幫助緩解手部疲勞;有可能的話經(jīng)常換手操作。
2)定期檢查移液器的密封狀況,一旦發(fā)現(xiàn)密封老化或出現(xiàn)漏液,須及時更換密封圈。
3)每年對移液器進(jìn)行1-2次校正(視使用頻率而定)。
4)絕大多數(shù)移液器,在使用前和使用一段時間后,要給活塞涂上一層潤滑油以保持密封性;而對于常規(guī)量程的移液器,不涂潤滑油也同樣擁有理想的密封性。