濕熱滅菌的原理以及影響因素
濕熱滅菌的原理:是使微生物的蛋白質(zhì)及核酸變形導致其死亡。這種變形首先是分子中的氫鍵分裂,當氫鍵斷裂時,蛋白質(zhì)及核酸內(nèi)部結(jié)構(gòu)被破壞,進而喪失了原有功能。濕熱滅菌法是在飽和蒸汽或沸水或流通蒸汽中進行滅菌的方法。以高溫高壓水蒸氣為介質(zhì),由于蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質(zhì)變性或凝固,最終導致微生物的死亡,所以滅菌效率比干熱滅菌法高。濕熱滅菌是應用最廣泛的一種滅菌方法,它具有滅菌可靠,操作方便,易于控制和經(jīng)濟等優(yōu)點,是藥物制劑生產(chǎn)過程中最常用的滅菌方法。
濕熱滅菌法可分為:煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法
影響因素主要有:
1)細菌的種類與數(shù)量:
不同細菌的不同發(fā)育階段對熱的抵抗力有所不同。細菌數(shù)越少,滅菌時間越短。
2)蒸汽的性質(zhì):
蒸汽有飽和蒸汽,濕飽和蒸汽和過熱蒸汽。飽和蒸汽熱含量較高,熱穿透力較大,因此滅菌效力高。濕飽和蒸汽帶有水分,熱含量較低,穿透力差,滅菌效力較低。過熱蒸汽溫度高于飽和蒸汽,但穿透力差,滅菌效率低。
3)介質(zhì)的性質(zhì):
制劑中含有營養(yǎng)物質(zhì),如糖類、蛋白質(zhì)等,增強細菌的抗熱性。細菌的生存能力也受介質(zhì)PH值的影響。一般中性環(huán)境耐熱性最大,堿性次之,酸性不利于細菌發(fā)育。
4)物品的性質(zhì)與滅菌時間:
一般來說,滅菌溫度越高滅菌時間越短。濕熱滅菌法一般采用121℃,滅菌20-30min,如果是產(chǎn)孢子的微生物則應采用滅菌后適宜溫度下培養(yǎng)幾小時,再滅菌一次,以用于殺死剛剛萌發(fā)的孢子。但考慮到被滅菌物的穩(wěn)定性,應在達到有效滅菌的前題下可適當降低滅菌溫度或縮短滅菌時間。
(1)流通蒸氣滅菌法:是指在常壓條件下,采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法,滅菌時間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌,但不能保證殺滅所有芽孢,是非可靠的滅菌方法。
(2)間歇蒸汽滅菌法:利用反復多次的流通蒸汽加熱,殺滅所有微生物,包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法,但要重復3次以上,每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過夜,目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫,可將溫度降至75℃~80℃,加熱延長為30~60分鐘,并增加次數(shù)。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。
(3)高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3℃,維持15-20分鐘。
濕熱滅菌法 濕熱法可在較低的溫度下達到與干熱法相同的滅菌效果,因為:①濕熱中蛋白吸收水份,更易凝固變性;②水分子的穿透力比空氣大,更易均勻傳遞熱能;③蒸汽有潛熱存在,每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能,可迅速提高物體的溫度。
濕熱滅菌法一般采用121℃,滅菌20-30min,如果是產(chǎn)孢子的微生物則應采用滅菌后適宜溫度下培養(yǎng)幾小時,再滅菌一次,以用于殺死剛剛萌發(fā)的孢子。
(4)巴氏消毒法:利用病原體不是很耐熱的特點,用適當?shù)臏囟群捅貢r間處理,將其全部殺滅。
巴氏滅菌法主要為牛奶的一種滅菌法,既可殺死對健康有害的病原菌又可使乳質(zhì)盡量少發(fā)生變化。巴氏殺菌不可能殺死所有細菌,它只能將致病菌的數(shù)量降低到對消費者不會造成危害的水平。巴氏滅菌法除牛奶之外,也可應用于發(fā)酵產(chǎn)品