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【答疑解惑】微生物培養(yǎng)基使用中常出現(xiàn)的問題分析解答

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-10-20
核心提示: 工作中發(fā)現(xiàn),有部分檢驗(yàn)員對培養(yǎng)基的使用存在一些障礙,借此機(jī)會和大家分享討論一下大家常見的對培養(yǎng)基存在的一些疑問。&#
 工作中發(fā)現(xiàn),有部分檢驗(yàn)員對培養(yǎng)基的使用存在一些障礙,借此機(jī)會和大家分享討論一下大家常見的對培養(yǎng)基存在的一些疑問。

 

1、培養(yǎng)基煮沸溶解后再高壓滅菌,還是直接高壓滅菌存在疑惑。

拿麥康凱瓊脂舉個(gè)例子,溶解后滅菌,平板上沒有不溶的結(jié)晶紫,沒有紫色的斑點(diǎn);相對比未溶解滅菌的,平板上有結(jié)晶紫和紫色的斑點(diǎn)。所以正確的做法是先煮沸溶解后再高壓滅菌。

 

2、培養(yǎng)基PH值為什么不在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)?

其實(shí)出現(xiàn)這個(gè)情況的問題有很多種,大致課分為這么6大點(diǎn):

①質(zhì)量不好(生產(chǎn)廠家出廠時(shí)pH就不正確);

②滅菌問題(高壓滅菌溫度過高或滅菌時(shí)間過長,導(dǎo)致葡萄糖類焦化從而pH降低);

③保存時(shí)間(超過保質(zhì)期或結(jié)塊);

④水質(zhì)出現(xiàn)問題(可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水);

⑤保存溫度(保存溫度過高);

⑥光線直射總結(jié)本人認(rèn)為以上6點(diǎn)都可能導(dǎo)致培養(yǎng)基pH出現(xiàn)偏差,如果出現(xiàn)此類問題,建議逐一排查,直到問題解決圖片。

 

3、培養(yǎng)基高壓滅菌時(shí)為什么會焦化?

不少檢驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基有焦化現(xiàn)象,個(gè)人認(rèn)為引起此現(xiàn)象的主要原因有以下4點(diǎn):

①可能你滅菌的時(shí)候溫度超過了121℃(正常115-116℃20min即可);

②滅菌時(shí)間過長;

③培養(yǎng)基在容器中裝的太多(不要超過容器容量的80%);

④滅完菌的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中保存的時(shí)間過長,這些都會導(dǎo)致培養(yǎng)基發(fā)生焦化現(xiàn)象。

 

4、培養(yǎng)基PH怎么測定?

通常分兩種情況:

①對于無需高壓滅菌的培養(yǎng)基,先煮沸溶解后再冷卻至25℃時(shí),測定其pH值(固體培養(yǎng)基至少測2個(gè)點(diǎn),取其平均值);

②對于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,高壓滅菌后,冷卻至25℃測其pH(固體培養(yǎng)基至少測2個(gè)點(diǎn),取其平均值)。

 

5、含瓊脂培養(yǎng)基在倒平板為什么有時(shí)候不凝固或凝固不好?

針對以上情況,我做了分析:

①針對需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,倒平板時(shí)候要先搖勻(因?yàn)榄傊肿恿勘容^大,在冷卻過程中容易沉淀到底部,導(dǎo)致瓊脂分散不均勻);

②針對無需高壓滅菌的培養(yǎng)基,一次煮沸溶解后不能直接倒平板,應(yīng)重復(fù)煮沸溶解3-5次(因?yàn)橐淮尾荒艽_保瓊脂完全溶解)。

 

6、為什么同一品牌的不同批號,粉末顏色有差別?

分析可能有3個(gè)原因:

①此培養(yǎng)基成分含有染料或指示劑;

②不同批次粉末培養(yǎng)基含水量不同,一般要求≤6%,含水量越高,顏色越深;

③加工時(shí)球磨時(shí)間越長顏色越深。

 

此次分享,主要是對微生物培養(yǎng)基使用這塊會遇到的常見問題進(jìn)行簡單分析,希望通過短短幾行字,能夠幫助廣大在實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)過此類問題的同仁,文章觀點(diǎn)參考,若有不對的地方忘諸位指正,謝謝圖片圖片圖片!

編輯:songjiajie2010

 
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