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食物中油脂提取方法匯總

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-03-19
核心提示:索氏抽提法巴布科克法和蓋勃氏法(一) 原 理用濃硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白質(zhì),將牛奶中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的重硫酸酪蛋白,脂
 索氏抽提法
巴布科克法和蓋勃氏法
(一) 原 理
用濃硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白質(zhì), 將牛奶中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的重硫酸酪蛋白, 脂肪球膜被破壞, 脂肪游離出來, 再利用加熱離心, 使脂肪完全迅速分離, 直接讀取脂肪層可知被測乳的含脂率。
(二) 適用范圍與特點
這兩種方法都是測定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)方法, 適用于鮮乳及乳制品脂肪的測定。但不適合測定含巧克力、糖的食品, 因為硫酸可使巧克力和糖發(fā)生炭化,結(jié)果誤差較大。 改良巴布科克氏法可用于測定風(fēng)味提取液中芳香油的含量 (AOAC 法 932.11) 及海產(chǎn)品中脂肪 (AOAC 法 964.12) 的含量。
巴布科克氏法和蓋勃氏法的原理相似,蓋勃氏法較巴布科克法簡單快速,多用一種試劑異戊醇。使用異戊醇是為了防止糖炭化。該法在歐洲比在美國使用更為廣泛。
(三) 測定方法
l.巴布科克法
(1) 精確吸取 17.6 mL 牛乳于巴布科克氏乳脂瓶中。
(2) 加入硫酸 (相對密度 1.816 ±0.003, 20℃) 17.5mL, 硫酸沿瓶頸壁慢慢倒入, 將瓶頸回旋, 充分混合至無凝塊并呈均勻的棕色。
(3) 將乳脂瓶離心 5min (約 1000r / min), 脂肪分離升至瓶頸基部。
(4) 加入熱水使脂肪上浮到瓶頸基部, 離心 2min。
(5) 再加入熱水使脂肪上浮到 2 或3刻度處,離心 1min。 
(6) 置 55~60℃水浴 5min 后, 立即讀取脂肪層最高與最低點所占的格數(shù), 即為樣品含脂肪的百分率。
2.蓋勃氏法
(1) 將 l0 mL 硫酸倒入蓋勃氏乳脂瓶中。
(2) 精確吸取 11 mL 牛乳于蓋勃氏乳脂瓶中。
(2) 加入 l mL 異戊醇 (相對密度 0.811± 0.002, 20℃,沸程 128~132℃)。
(4) 蓋緊塞子,振搖至呈均勻棕色液體, 靜置數(shù)分鐘。
(5) 置于 65~70℃水浴中 5min。
(6) 取出擦干, 調(diào)節(jié)脂肪柱在刻度內(nèi), 放入離心機(800~1000r / min)中離心 5min。
(7) 將乳脂瓶置 65~70℃水浴, 5min 后取出, 立即讀數(shù), 即為脂肪的含量。
(四) 說明與討論
1. 硫酸的濃度要嚴(yán)格遵守規(guī)定的要求, 如過濃會使乳炭化成黑色溶液而影響讀數(shù); 過稀則不能使酪蛋白完全溶解, 會使測定值偏低或使脂肪層渾濁。
2. 硫酸除可破壞脂肪球膜, 使脂肪游離出來外, 還可增加液體相對密度, 使脂肪容易浮出。
3. 蓋勃氏法中所用異戊醇的作用是促使脂肪析出, 并能降低脂肪球的表面張力, 以利于形成連續(xù)的脂肪層。
4. l mL 異戊醇應(yīng)能完全溶于酸中, 但由于質(zhì)量不純, 可能有部分析出摻入到油層, 而使結(jié)果偏高。
5. 加熱 (65~70℃水浴中) 和離心的目的是促使脂肪離析。
6. 羅紫一哥特里法、巴布科克法和蓋勃法都是測定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)分析方法。根據(jù)對比研究表明, 前者的準(zhǔn)確度較后兩者高, 后兩者中巴布科克法的準(zhǔn)確度比蓋勃法的稍高些, 兩者差異顯著。
酸水解法原理:樣品經(jīng)酸水解后用乙醚提取,除去溶劑即得游離及結(jié)合脂肪總量。
酸水解法試劑:鹽酸、95%乙醇、乙醚、石油醚、100毫升具塞刻度量筒
酸水解法實驗過程:1、樣品處理: (1)固體樣品:精密稱取約2克水,混勻后再加重。毫升鹽酸。置于50毫升大試管內(nèi),加8毫升;(2)液體樣品:稱取10.0克,置于50毫升大試管內(nèi),加10毫升鹽酸。
2、將試管放70-80℃水浴中,每隔5-10分鐘以玻璃棒攪拌一次,至樣品消化完全為止,約40-50分鐘。
3、取出試管,加人10毫升乙醇,混合。冷卻后將混合物移于100毫升具塞量筒中,以25毫升乙醚分次洗試管,一并倒人量筒中。待乙醚全部倒入量筒后,加塞振搖1分鐘,小心開塞,放出氣體,再塞好。靜置12分鐘,小心開塞,并用石油醚-乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10-20分鐘,待上部液體清晰,吸出上清液于已恒重的錐形瓶內(nèi),再加5毫升乙醚于具塞量筒內(nèi),振搖,靜置后,仍將上層乙醚吸出,放入原錐形瓶內(nèi)。將錐形瓶置水浴上蒸干,置95-105℃烘箱中干燥2小時,取出放入干燥器內(nèi)冷卻0.5小時后稱重。
酸水解法 計算: 
X=(m1-m0)/m2     
X:樣品中脂肪的含量%;
m1:接受瓶與脂肪的質(zhì)量,g;
m2:接受瓶的質(zhì)量,g。
MM_FS_CNG_0390
植物油脂檢驗雜質(zhì)測定法

適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于商品植物油脂中雜質(zhì)含量的測定。
說明
植物油脂中的雜質(zhì)為不溶于石油醚等有機溶劑的殘留物。
3.主要試劑和儀器
3.1.主要試劑
抽氣泵;
抽氣瓶;
安全瓶;
2號玻璃砂芯漏斗;
膠管;
稱量皿;
鑷子、量筒、玻棒;
天平:感量0.0001g。
3.2.試劑
石油醚(沸程60~90
℃);
95%乙醇;
酸洗石棉;
脫脂棉;
定量濾紙(代替石棉用)等。
4.過程簡述
準(zhǔn)備抽氣裝置:用膠管連接抽氣泵、安全瓶和抽氣瓶。用水將石棉分成粗、細兩部分,先用粗的,后用細的石棉鋪墊玻璃砂芯漏斗(約3mm厚),先用水沿玻棒傾入漏斗中抽洗,后用少量乙醇和石油醚先后抽洗,待石油醚揮凈后,將漏斗送入105
℃電烘箱中,烘至前后兩次重量差不超過0.001g為止。
抽濾雜質(zhì):稱取混勻試樣15~20g(W)于燒杯中,加入20~25ml石油醚(蓖麻油用95%乙醇),用玻棒攪拌使試樣溶解,傾入漏斗中,用石油醚將燒杯中的雜質(zhì)干凈地洗入漏斗內(nèi),再用石油醚分?jǐn)?shù)次抽洗雜質(zhì),洗至無油跡為止。
烘干雜質(zhì):用脫脂棉揩凈漏斗外部,在105
℃溫度下烘至恒重(W1)。
5.結(jié)果計算
雜質(zhì)含量按下列公式計算:
雜質(zhì)(%)=
W1
×100


W


式中:W1——雜質(zhì)重量,g;
W——試樣重量,g。

雙試驗結(jié)果允許差不超過0.04%,求其平均數(shù),即為測定結(jié)果。測定結(jié)果取小數(shù)點后第二位。
6.來源:
GB 5529—85
MM_FS_CNG_0386
植物油脂檢驗磷脂測定法

1.適用范圍
本方法適用于商品植物油脂中磷脂的測定。
2.原理概要
油脂中磷脂即由甘油、脂肪酸、磷酸和氨基醇等所組成的復(fù)雜的化合物。
3.鉬藍比色法
3.1.主要試劑和儀器
3.1.1.主要試劑
50%氫氧化鉀溶液;
鹽酸、硫酸、氧化鋅、濾紙;
0.015%硫酸聯(lián)氨溶液;
2.5%鉬酸鈉稀硫酸溶液:量取140ml硫酸注入300ml水中,搖勻,冷卻至室溫,加入12.5g鉬酸鈉,溶解后加水至500ml,搖勻,靜置24h備用;
磷標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取無水的磷酸二氫鉀0.4391g溶于1000ml水中,作為1號液,含磷0.1mg/ml,吸取1號液10ml,加水稀釋至100ml,含磷0.01mg/ml,作為2號液,比色用。
3.1.2.儀器
瓷坩堝或石英坩堝;
分光光度計或帶塞的50ml比色管;
移液管:5、10ml;
電爐、高溫爐;
容量瓶:100、500、1000ml;
表面皿、燒杯、量筒;
恒溫水浴鍋;
漏斗、坩堝鉗、試劑瓶等。
3.2.樣品制備
用坩堝稱取試樣約10g(準(zhǔn)確至0.001g),加氧化鋅0.5g,先在電爐上加熱炭化,然后送入550~600
℃的高溫爐中灼燒至灰化(白色),灼燒時間約2h,取出坩堝冷卻至室溫,用熱鹽酸(1∶1)10ml溶解灰分,并加熱微沸5min,將溶解液過濾注入100ml容量瓶中,用熱水沖洗坩堝和濾紙,待濾液冷卻至室溫后,用50%氫氧化鉀溶液中和至出現(xiàn)混濁,緩慢滴加鹽酸使氧化鋅沉淀全部溶解后,再滴2滴,最后用水稀釋至刻度,搖勻。
3.3.過程簡述
3.3.1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:取5只50ml比色管,編成1,2,4,6,8五個號碼,按號碼順序分別注入磷標(biāo)準(zhǔn)2號液1,2,4,6,8ml,再按順序分別加水9,8,6,4,2ml。接著向5只管內(nèi)各加0.015%硫酸聯(lián)氨溶液8.0ml;各加鉬酸鈉稀硫酸溶液2.0ml,加塞、搖勻。去塞,將5只管置于正在沸騰的水浴中加熱10min,取出冷卻至室溫,用水稀釋至50ml,充分搖勻,經(jīng)10min后,用分光光度計在波長650nm下,用3cm液槽,用水調(diào)整零點,分別測定消化值。以消化值為縱坐標(biāo),以磷量(0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.3.2.比色:用移液管吸取被測液10ml注入50ml比色管中,加入0.015%硫酸聯(lián)氨8.0ml,加2.0ml鉬酸鈉稀硫酸溶液,加塞,搖勻。去塞,將比色管置于正在沸騰的水浴中加熱10min,取出冷卻至室溫,用水稀釋至50ml,充分搖勻,經(jīng)10min后,用分光光度計在波長650nm下,用3cm液槽,用水調(diào)整零點,測定消光值。
3.4.結(jié)果計算
根據(jù)被測液的消光值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得磷量(P),按公式(1)計算磷脂含量:
磷脂(%)=P×
V2
×26.31×
100
……………………(1)


V1

W×1000



式中:P——標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的磷量,mg;
V2——樣品灰化后稀釋的體積,ml;
V1——比色時所取的被測液體積,ml;
26.31——每毫克磷相當(dāng)于磷脂的毫克數(shù);
W——試樣重量,g。
3.5.允許差
雙試驗結(jié)果允許差不超過0.04%,求其平均數(shù),即為測定結(jié)果。測定結(jié)果取小數(shù)點后第二位。
4.重量法
4.1.主要試劑和儀器
4.1.1.主要試劑
丙酮。
4.1.2.儀器
玻璃漏斗、漏斗架;
燒杯:100ml;
錐形瓶、濾紙等。
4.2.過程簡述
取混勻的樣品約100ml,加熱約90
℃時進行過濾。用燒杯稱取試樣25g,加熱至80℃,加水2~2.5ml,充分?jǐn)嚢枋怪谑覝叵蚂o置過夜,或進行離心沉淀,傾出上層清液,用已知恒重的濾紙(或用抽氣裝置抽濾)進行過濾,待濾液全部濾出后,用冷的丙酮把杯內(nèi)殘留的沉淀沖洗入濾紙中,繼續(xù)用丙酮洗滌濾紙和沉淀,洗至無油跡為止。待濾紙和沉淀上的丙酮揮盡后,送入105℃烘箱中烘至恒重。
4.3.結(jié)果計算
重量法測定磷脂含量按公式(2)計算:
磷脂(%)=
W1
×100………………………………………(2)


W



式中:W1——沉淀物重量,g;
W——試樣重量,g。
4.4.允許差
雙試驗結(jié)果允許差不超過0.04%,求其平均數(shù),即為測定結(jié)果。測定結(jié)果取小數(shù)點后第二位。
5.來源:
中國國家標(biāo)準(zhǔn):GB5537—85
MM_FS_CNG_0387
植物油脂檢驗含皂量測定法

1.適用范圍
本方法適用于商品植物油脂含皂量的測定。
2.原理概要
油脂中的含皂量,即油脂經(jīng)過堿煉后,殘留在油脂中的皂化物數(shù)量(以油酸鈉計)。
3.主要試劑
石油醚:沸點60~90
℃;
95%中性乙醇;
0.2%甲基紅乙醇溶液;
0.02N硫酸溶液;
無水碳酸鈉。
4.過程簡述
稱取混勻試樣約10g(W),注入干燥的錐形瓶中,加入乙醇10ml和石油醚60ml,搖動,使試樣溶解后,緩慢加入80
℃的蒸餾水80ml,振搖使成乳狀,滴入3滴甲基紅指示劑,趁熱逐滴加入0.02mol/L(1/2H2SO4)硫酸溶液,每加一滴振搖一次,滴至分層下的溶液顯出微紅色為止。
5.結(jié)果計算
油脂含皂量按下列公式計算:
含皂量(%)=
V×N×0.304
×100


W



式中:V—— 滴定用去的硫酸溶液體積,ml;
N—— 硫酸溶液的(1/2H2SO4)摩爾濃度;
W——試樣重量,g;
0.304—— 每毫克摩爾(1/2H2SO4)硫酸相當(dāng)于油酸鈉的克數(shù)。
兩次試驗結(jié)果允許差不超過0.02%,求其平均數(shù),即為測定結(jié)果。測定結(jié)果取小數(shù)點后第二位。
6.來源:
中國國家標(biāo)準(zhǔn):GB5533—85
編輯:songjiajie2010

 
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