胍西替柳為消炎鎮(zhèn)痛藥，其制劑有膠囊劑及新研制的片劑。胍西替柳膠囊的含量測定方法為酸堿滴定法，先用氯仿提取后，再用酸堿滴定法測定，此方法較繁瑣，測定誤差較大。

 

1 儀器與試藥

 

儀器：依利特P230系列HPLC儀；UV230檢測器。EC2000工作站。試藥：胍西替柳片(大連弘豐制藥廠)，胍西替柳對照品(大連弘豐制藥廠)。甲醇為色譜純。

 

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

 

2.1 系統(tǒng)條件與系統(tǒng)適用性色譜柱：迪馬公司Cl8(150mmx4.6mm，5&mu；m)，流動(dòng)相：甲醇-水(70：30)，流速為1.0ml／min，檢測波長為276nm，柱溫：室溫，進(jìn)樣量：10&mu；l。理論板數(shù)按胍西替柳應(yīng)不低于2800[n=5.54(tR／Wh／2)的平方]。

 

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

 

精密稱取胍西替柳對照品22.04mg，置25ml量瓶中，加甲醇10ml溶解，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取0.2，0.6，1.0，1.4，1.8ml，用流動(dòng)相稀釋至10ml，搖勻，照上述色譜條件測定。以進(jìn)樣量(ug)為橫坐標(biāo)， 峰面積 為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y=922382X一424.9，r=0.99996，結(jié)果表明，在進(jìn)樣濃度依次為0.18～1.59ug范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

 

2.3 回收率試驗(yàn)取相當(dāng)于胍西替柳20mg處方量的80％，100％，120％，精密稱定，分別加入相應(yīng)量的混合輔料，置9個(gè)25ml量瓶，加甲醇溶解并稀釋至刻度。搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，加流動(dòng)相稀釋至10ml，搖勻，照上述色譜條件測定，計(jì)算胍西替柳的回收率。

 

2.4 精密度試驗(yàn)

 

精密稱取同一批號的供試液，按“2。7&”項(xiàng)下方法制備后，連續(xù)進(jìn)樣5次，測定峰面積 ，計(jì)算胍西替柳的含量，考察儀器精密度，結(jié)果表明，儀器精密度良好，其RSD為0.88％。

 

2.5 重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取同一批號5份樣品，

 

按“2.7”項(xiàng)下方法制備后，在上述色譜條件下進(jìn)行分析，計(jì)算胍西替柳的含量，考察方法重復(fù)性，結(jié)果表明，方法重復(fù)性良好，其RSD為0.9％。

 

2.6 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

 

取胍西替柳樣品溶液，室溫下放置，按上述色譜條件，分別于0，2，4，6，8h進(jìn)樣分析，記錄色譜峰面積，胍西替柳峰面積的RSD為0.81％。結(jié)果表明，室溫下供試品溶液在8h內(nèi)是穩(wěn)定的。

 

2.7 樣品測定取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于胍西替柳20mg)，置25ml量瓶中，加甲醇適量，使胍西替柳溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密計(jì)算含量。

 

討論

 

3.1溶劑的選擇經(jīng)試驗(yàn)，胍西替柳在酸、堿中均不穩(wěn)定，在水中不溶，在甲醇中溶解。所以樣品先用甲醇溶解，再用流動(dòng)相稀釋成測定濃度。

 

3.2 檢測波長的選擇取

 

胍西替柳對照品適量，加甲醇制成每1ml中含80&mu；g的溶液，在400～200nm范圍掃描，在276nm波長處有最大吸收且輔料無干擾，故檢測波長定為276nm。

 

3.3 流動(dòng)相的選擇；我們曾先后選擇了甲醇-水(30：70)，甲醇-水-(55：45)，甲醇-水(70：30)作為流動(dòng)相的樣品進(jìn)行分析，結(jié)果最佳的流動(dòng)相為甲醇-水(70：30)