1.利尿藥及抗利尿藥篩選實(shí)驗(yàn):要判斷所試藥物是否有利尿作用,可選用大白鼠、小白鼠、貓或狗進(jìn)行實(shí)驗(yàn),其中以大白鼠較為常用。對(duì)人體有利尿作用的藥物均可在大白鼠實(shí)驗(yàn)中獲得較好的利尿效果,但汞撒利的作用較差。因此篩選利尿藥實(shí)驗(yàn)的首選動(dòng)物雖多采用大白鼠,必要時(shí)還應(yīng)再選用另一種動(dòng)物實(shí)驗(yàn),加以驗(yàn)證。
收集動(dòng)物尿液的方法可分為兩大類:一是用代謝籠收集較小動(dòng)物24小時(shí)以內(nèi)的尿液量,稱為“代謝籠實(shí)驗(yàn)法”,適用于大白鼠及小白鼠。為了防止尿液的蒸發(fā)和糞便的污染,可選用特別的集尿裝置或用濾紙吸導(dǎo)尿液加以稱重,用此類方法時(shí),實(shí)驗(yàn)環(huán)境(氣溫和濕度)的影響較大,應(yīng)予控制,室溫以20℃左右為宜。二是直接自輸尿管或膀胱收集尿滴,適用于貓、狗、家兔和大白鼠,實(shí)驗(yàn)可在較短時(shí)間內(nèi)完成,受外界環(huán)境影響也較少,但動(dòng)物處于麻醉狀態(tài)下,與清醒動(dòng)物還有區(qū)別。欲進(jìn)行清醒動(dòng)物的利尿?qū)嶒?yàn),可采用膀胱瘺法,即預(yù)選給狗或貓進(jìn)行膀胱瘺手術(shù),二周后切口愈合,再將動(dòng)物固定于特制支架上收集尿液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在利尿藥篩選實(shí)驗(yàn)中,家兔不是首選動(dòng)物,但因其價(jià)廉易得,某些初篩實(shí)驗(yàn)也可用家兔代替家犬進(jìn)行直接集尿的實(shí)驗(yàn).過(guò)去曾用膀胱套管法,由膀胱做切口插入套管,再做荷包縫合,但方法復(fù)雜,套管內(nèi)的尿液往往不能順利流出,不如用聚乙烯塑料套管直接插入輸尿管為好。常選用2kg以上健康雄性家兔作實(shí)驗(yàn)。
2.腎清除率測(cè)定實(shí)驗(yàn):腎清除率是檢查腎功能的一項(xiàng)重要方法。它表示腎臟對(duì)血液里某物質(zhì)的清除能力,還可以了解腎血流量,游離水的生成和重吸收等方面的情況。狗和大鼠均可用來(lái)作清除率試驗(yàn)。大鼠較易獲得,較易飼養(yǎng),成本低,實(shí)驗(yàn)時(shí)藥品消耗少,在急性實(shí)驗(yàn)時(shí)較易在清醒狀態(tài)下作清除率測(cè)定。
菊糠清除率實(shí)驗(yàn)常選用大白鼠進(jìn)行。清除率是指每毫升血漿“清除”物質(zhì)的比例。血漿里物質(zhì)大多能被腎小球?yàn)V過(guò),又能被腎小管細(xì)胞分泌或重吸收。唯獨(dú)菊糖僅被腎小球?yàn)V過(guò),而不被腎小管細(xì)胞分泌重吸收,故它的清除率就是腎小球?yàn)V過(guò)率。
游離水清除率實(shí)驗(yàn)常選用健康成年狗進(jìn)行,游離水清除率實(shí)驗(yàn),是一種測(cè)定尿中游離水生成的方法。利用這種方法可以衡量腎臟對(duì)尿液濃縮和稀釋的能力,分析利尿藥對(duì)尿濃縮和稀釋機(jī)制的影響,從而推測(cè)利尿藥的作用部位。
對(duì)氨基馬尿酸清除率實(shí)驗(yàn)常選用大白鼠或狗,但以大白鼠更為常用。對(duì)氨基馬尿酸的清除率可作為有將腎血漿流量的客觀指標(biāo)。
3.截流分析實(shí)驗(yàn):截流分析實(shí)驗(yàn)常選用10kg以上健康狗做實(shí)驗(yàn)。截流技術(shù)系一種分析腎小管各段運(yùn)轉(zhuǎn)功能的方法,利用這種方法可對(duì)利尿藥作用部位進(jìn)行初步分析。
4.腎小管微穿刺實(shí)驗(yàn):腎小管微穿刺(Micropuncture)技術(shù),于1941年開始應(yīng)用于哺乳動(dòng)物腎臟研究,近年來(lái)更獲得很大進(jìn)展,發(fā)展了微量注射,微量灌流等技術(shù),對(duì)離子及其他物質(zhì)在腎小管的不同節(jié)段中的轉(zhuǎn)動(dòng)過(guò)程,作了精確的闡明;用于利尿劑的研究,則可探測(cè)對(duì)單個(gè)腎單位功能的影響以及藥物的作用部位。該實(shí)驗(yàn)常選用大白鼠或狗進(jìn)行。如欲穿刺集合管,可用幼年大白鼠或金地鼠;如欲穿刺腎小球,常用Munich-Wistar大白鼠,因其腎小球位置表淺,易于穿刺。大鼠體重一般采用200~250g較好。