1 原理
用一種能破壞血液中的紅細(xì)胞,但能保護(hù)血小板形態(tài)完整的稀釋液稀釋血液,滴入血細(xì)胞計數(shù)池,在高倍鏡下直接計數(shù)血小板數(shù)。
2 器材和試劑
器材同白細(xì)胞計數(shù)法。稀釋液用許汝和氏尿素稀釋液。許汝和氏尿素稀釋液配制法:尿素10g, 福爾馬林0.1ml, 枸櫞酸鈉0.5g,加水至100ml,溶解后過慮,在冰箱內(nèi)保存。
3 操作步驟
。幔茫玻恚煳軠(zhǔn)確吸取血小板稀釋液0.38ml置小試管中。
。猓畯亩共裳茫埃埃玻恚煳軠(zhǔn)確吸取第一滴血,吹入稀釋液中,并吹吸兩次洗凈吸管壁內(nèi)的血。
c.充分振搖,滴入計數(shù)池,靜置15~20分鐘,使血小板下沉,以便計數(shù)。
。洌诟弑剁R下用計數(shù)紅細(xì)胞所用的5個中方格中的血小板數(shù),乘以1000,即得每立方毫米血中血小板數(shù)。
。澹“逶谙♂屢褐斜憩F(xiàn)為富于折光之小點,約為紅細(xì)胞的1/2~1/3大小。
4 注意事項
。幔⊙獣r動作要迅速,穿刺要深。
b.一定要用第一滴血,以使血小板保持完整,在稀釋液中易于分散。否則,血小板因耳垂受擠壓而破壞較多,形態(tài)也不規(guī)則,在稀釋液中不易分散,這樣,會使計數(shù)結(jié)果偏低。
。悖蛩卦谑覝刂腥菀追稚⒍В氏♂屢罕M可能小量配制,并保存于冰箱之中。
。洌缂t細(xì)胞不完全溶解,影響血小板計數(shù)的準(zhǔn)確性時,可加大稀釋倍數(shù),或另換稀釋液。
。澹缡覝剌^高時,可將滴好的計數(shù)池放在培養(yǎng)皿下,中間放一濕棉球,以防計數(shù)池中的稀釋液干掉。