勻漿緩沖液的問(wèn)題:
蛋白質(zhì)的勻漿緩沖液的一般配方都是大同小異，里面有那么多試劑，我對(duì)其中一些試劑的功能做了查尋：
PMSF：蛋白酶抑制劑
EDTA：金屬離子螯合劑
DTT：保證蛋白SH基團(tuán)不被氧化
礬酸鈉：酪氨酸磷酸酶抑制劑
所以勻漿緩沖液的蛋白酶抑制劑保護(hù)劑對(duì)于保護(hù)蛋白質(zhì)量是非常重要的。
蛋白勻漿以后是否還會(huì)降解？
一般認(rèn)為蛋白質(zhì)勻漿以后，由于蛋白質(zhì)變性，所以不會(huì)容易降解。而且不會(huì)受反復(fù)凍融的影響。但實(shí)際上蛋白樣品反復(fù)凍融幾次后，蛋白量會(huì)明顯減少。所以最好不要使勻漿后的蛋白反復(fù)凍融，并且最好不要比較不同批次勻漿的蛋白樣品。