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反向間接乳膠凝集反應

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

原理

同炭凝,只是載體換為聚苯乙烯乳膠,它是一種由0.6μm~0.7μm的顆粒所組成的膠體溶液,具有良好的吸附蛋白質的性能。

間接乳膠凝集目前已用于鼠疫菌、沙門氏菌、流感桿菌、腦膜炎雙球菌、葡萄球菌腸毒素等的診斷。


材料與試劑

1.聚苯乙烯乳膠

2.免疫血清

3.正常血清

4.標準抗原

5.待檢抗原

6.0.02Mol/L pH8.2硼酸緩沖液

硼砂 6.67g

硼酸 8.04g

H2O 加至 1 000ml

7.生理鹽水


操作方法

1.乳膠液制備 取聚苯乙烯乳膠0.10ml,加滅菌蒸餾水0.40ml,再加pH8.2硼酸緩沖液2ml,混合后即為25倍稀釋的乳膠液。

2.乳膠致敏 在上述乳膠液中滴加稀釋的免疫血清0.20ml~0.70ml,邊加邊搖,當出現(xiàn)肉眼可見的顆粒后,仍繼續(xù)加血清,直至顆粒消失,成為均勻的乳膠懸液為止。鏡下檢查應無自凝。使用時,應與一定稀釋度的相應抗原出現(xiàn)陽性反應,與生理鹽水出現(xiàn)陰性反應為合格。加防腐劑后,于冰箱內保存。注意防止冰凍。

同時以正常血清代替免疫血清進行乳膠致敏,以作對照。

3.取潔凈玻板一塊,用玻璃鉛筆劃成小格,滴加待檢樣品0.10ml,再滴加高免血清致敏乳膠0.01ml,以牙簽或火柴桿混勻,在3min內判定結果。


結果判定

“++++”:全部乳膠凝集,成絮狀團塊,液體清亮。

“+++” : 大部分乳膠凝集成較小的顆粒,液體清亮。

“++” : 半量乳膠凝集成細小顆粒,液體混濁。

“+” : 較少量的乳膠凝集成可見的細顆粒,液體混濁。

“-” : 全部乳膠仍為均勻液體,無顆粒。

以“++”作為該反應滴度的終點。

 

 
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