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平板凝集反應(yīng)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

材料與試劑

以布氏桿菌病平板凝集反應(yīng)為例。

1.玻璃板、刻度吸管等。

2.布氏桿菌平板凝集抗原、布氏桿菌標(biāo)準(zhǔn)陽性血清。

操作方法

1.取潔凈玻板一塊,用玻璃鉛筆劃成方格,并注明待檢血清號(hào)碼。

2.。.ml吸管分別吸取0.08ml、0.04ml0.02ml0.01ml各放入一方格內(nèi)。大規(guī)模檢驗(yàn)時(shí),可只做2個(gè)血清量,大動(dòng)物用0.04ml0.02ml,中小動(dòng)物用0.08ml0.04ml。每檢一個(gè)樣品需換一只吸管。

3.每格內(nèi)加布氏桿菌平板凝集抗原0.03ml,滴在血清附近,而不要與血清接觸。用牙簽(或火柴桿)自血清量最小的一格起,將血清與抗原混勻,每份血清用一根牙簽。

4.混合完畢,將玻板置凝集反應(yīng)箱上均勻加溫或采用別的辦法適當(dāng)加溫,使溫度達(dá)到30℃左右。3min5min內(nèi)記錄結(jié)果。

結(jié)果判定

++++:出現(xiàn)大的凝集塊,液體完全清亮透明,即100%凝集。

+++。河忻黠@的凝集片,液體幾乎完全透明,即75%凝集。

++  :有可見的凝集片,液體不甚透明,即50%凝集。

+  。阂后w混濁,有小的顆粒狀物,即25%的凝集。

-  。阂后w均勻混濁,即不凝集。

以出現(xiàn)++凝集的血清最高稀釋倍數(shù)作為該份血清的凝集價(jià)。大動(dòng)物(牛、馬、駱駝等)以0.02ml出現(xiàn)凝集價(jià)判為布氏桿菌病血清陽性,0.04ml出現(xiàn)凝集價(jià)判為可疑。中小動(dòng)物(豬、山羊、綿羊等)以0.04ml出現(xiàn)凝集價(jià)判為該份血清為布氏桿菌病陽性血清,0.08ml出現(xiàn)凝集價(jià)判為可疑。

注意事項(xiàng)

1.每次試驗(yàn)必須以標(biāo)準(zhǔn)陽性血清和標(biāo)準(zhǔn)陰性血清進(jìn)行對(duì)照。

2.加抗原前必須搖勻。

3.反應(yīng)溫度最好保證在30左右,3min5min內(nèi)判定。如反應(yīng)溫度偏低,可適當(dāng)延

長判讀時(shí)間。

4.如用兩個(gè)血清量作試驗(yàn),任何一個(gè)血清量出現(xiàn)凝集反應(yīng)時(shí),則需要用四個(gè)血清量重檢。

5.平板凝集反應(yīng)最好是用于初篩,如出現(xiàn)陽性或可疑反應(yīng),再用試管凝集反應(yīng)進(jìn)行復(fù)檢,以定性。

6.平板凝集反應(yīng)與試管凝集反應(yīng)的關(guān)系。

表 平板凝集反應(yīng)與試管凝集反應(yīng)的關(guān)系

凝集 應(yīng)

0.08

0.04

0.02

0.01

試管凝集反應(yīng)

125

150

1100

1200

 

 
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