放射免疫測(cè)定胰島素

材料及試劑

1．胰島素標(biāo)準(zhǔn)品(不同濃度的)

2．¹²⁵ I－胰島素

3．抗血清

4．第二抗體

5．分析試劑 為0.05 Mol/L pH7.4 PBS液＋1％正常兔血清。

6． －計(jì)數(shù)儀

7．試管、加樣器、離心機(jī)等

操作方法：

1．按表進(jìn)行。

胰島素RIA測(cè)定方法(單位：μu/ml)

2．測(cè)定和計(jì)算 反應(yīng)完畢后，將各管于室溫3 000 r/ min離心30min，仔細(xì)吸取上清液，收集于放射性廢液貯存容器內(nèi)。用 －計(jì)數(shù)儀分別測(cè)量各管沉淀物(B)的放射性強(qiáng)度(cpm)，以兩管的cpm均值表示。再以第1，2管的cpm值為Bo，分別計(jì)算結(jié)合率(B%，即B/Bo×100%)，用B%為縱坐標(biāo)，不同濃度胰島素標(biāo)準(zhǔn)品為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后根據(jù)待檢管的B%，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中即可查得胰島素的相應(yīng)含量。