01
影響重現(xiàn)性的原因
1、進(jìn)樣墊的松緊程度對(duì)氣相色譜儀的重現(xiàn)性,尤其是氣相ë細(xì)管色譜柱的重現(xiàn)性影響較大,填充柱也會(huì)有影響。
2、樣品溶劑對(duì)氣相色譜儀重復(fù)性也具有比較大的影響。很多時(shí)候,重復(fù)性差的原因并不在于儀器本身的性能,而是在于樣品處理環(huán)節(jié)。選擇的溶劑不合適,很大程度上,會(huì)影響到氣相色譜儀的重現(xiàn)性。
3、襯管不合適與樣品汽化同樣會(huì)影響氣相色譜儀的重復(fù)性。
02
定量不重復(fù)的原因
引起定量不重復(fù)的原因是多方面的,一般可以歸結(jié)為兩大類。
1、單純性靈敏度變化型,即除了定量重復(fù)性不合格外,其它指標(biāo)δ發(fā)現(xiàn)異常。
屬于第一類型故障的原因主要是:進(jìn)樣技術(shù)不佳,注射器有堵©,樣品制備不均勻,進(jìn)樣口污染物堆積以及氣·存在©氣現(xiàn)象等。
2、伴隨性靈敏度變化型,即除靈敏度變化之外還伴隨有其它異常現(xiàn)象出現(xiàn),包括基線不穩(wěn)定性、峰保留時(shí)間變化及產(chǎn)生峰形畸變等異,F(xiàn)象。
屬于第二類型故障的原因主要是:載氣流量變化,檢測(cè)器玷污、過(guò)載,柱溫變化以及檢測(cè)器操作條件(如,氫氣、極化電壓、脈沖電壓等)發(fā)生變化。
考慮到各種故障產(chǎn)生可能性的大小以及故障鑒別的方便性,制定出下述檢測(cè)方案:
1、進(jìn)樣技術(shù)檢查
進(jìn)樣技術(shù)不佳是造成色譜峰不重復(fù)的最可能原因。它通常表現(xiàn)為峰高/峰面積忽大忽小,峰高/峰面積大小變化無(wú)規(guī)則。提高進(jìn)樣重復(fù)性的關(guān)鍵,在于始終保持進(jìn)樣操作各個(gè)步驟的重復(fù)性。這包括取樣操作,取樣到進(jìn)樣期間的空閑時(shí)間,進(jìn)針快慢及拔出注射器的早晚。通常操作人員在經(jīng)過(guò)較多地進(jìn)樣重復(fù)性訓(xùn)練之后,可以達(dá)到所需的要求。
2、注射器檢查
操作人員進(jìn)樣技術(shù)提高后,色譜峰靈敏度仍然無(wú)顯著改觀,需認(rèn)真檢查注射器本身是否有堵塞或泄©現(xiàn)象。必要時(shí)更換一個(gè)好的注射器重新進(jìn)樣試驗(yàn)。
3、樣品均勻性檢查
制備的樣品在樣品瓶中混合不均勻或ÿ次取樣時(shí)注射器對(duì)樣品產(chǎn)生玷污以及樣品揮發(fā)等都會(huì)影響出峰靈敏度的重復(fù)性(不能©過(guò)此項(xiàng)檢查)。定量不重復(fù)由上述三種原因引起的可能性很大,而且都和進(jìn)樣操作密切相關(guān),因此可一起進(jìn)行檢查。只有在上述檢查后無(wú)異常發(fā)現(xiàn)時(shí)才轉(zhuǎn)入接下的檢查步驟。
4、伴隨現(xiàn)象觀察
在檢查靈敏度情況的同時(shí)注意是否有下述異,F(xiàn)象發(fā)生,包括基線是否穩(wěn)定,出峰保留時(shí)間是否重復(fù),峰形是否有畸變?nèi)N情況,如果出現(xiàn)其中一種,應(yīng)先按所出現(xiàn)的故障進(jìn)行排除,再重新進(jìn)行定量重復(fù)性測(cè)試。û發(fā)現(xiàn)伴隨異,F(xiàn)象時(shí),應(yīng)轉(zhuǎn)入下面的檢查步驟。
5、進(jìn)樣口污染及系統(tǒng)©氣檢查
關(guān)斷橋電流(對(duì)TCD而言)后,取下進(jìn)樣口隔墊,觀察進(jìn)樣口內(nèi)是否有污染或堆積物,如果有,需進(jìn)行清除和清洗。清洗完畢裝上隔墊后需對(duì)氣·系統(tǒng)進(jìn)行試©:堵住檢測(cè)器出口,觀察轉(zhuǎn)子流量計(jì)中的轉(zhuǎn)子應(yīng)能下降為零,否則說(shuō)明氣·有泄©。在確信進(jìn)樣口無(wú)嚴(yán)重污染及氣·無(wú)©氣的情況下進(jìn)行(6)的檢查。
6、特種原因檢查
對(duì)有些檢測(cè)器而言,某些原因所伴隨的故障異常不太明顯,易被忽略掉,因此應(yīng)按照此項(xiàng)進(jìn)行檢查,以便不©過(guò)可能發(fā)生故障的因素。
a)對(duì)FID來(lái)說(shuō),極化電壓較低及氫氣流量不穩(wěn),有可能導(dǎo)致靈敏度變化而無(wú)其它明顯異常。對(duì)此可首先測(cè)試極化電壓大小以確定極化電壓是否太低,過(guò)低的極化電壓以及無(wú)極化電壓都屬于故障。正常時(shí)極化電壓為150~300V。如極化電壓正常,則應(yīng)轉(zhuǎn)入放大器的靈敏檔觀察氫焰基始電流的變動(dòng)情況,在氫氣流不穩(wěn)定時(shí)基流應(yīng)能呈現(xiàn)出擺動(dòng)和漂移現(xiàn)象。
b)對(duì)于任何檢測(cè)器,樣品中的某些組分在檢測(cè)器中逐漸冷凝并累積,將會(huì)影響下一次進(jìn)樣后的靈敏度,情況嚴(yán)重時(shí)還會(huì)造成氣·堵塞。通常的解決方法也是適當(dāng)提高檢測(cè)器的溫度,以減少或消除樣品室的冷凝現(xiàn)象。
03
解決辦法
重復(fù)性是方法學(xué)驗(yàn)證的基本要求,也是系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的常用手段。想讓一個(gè)氣相色譜具有較好的重復(fù)性應(yīng)該從以下三點(diǎn)來(lái)說(shuō)。
1、儀器方面
具備了良好的重復(fù)性十分有必要,作為用戶也應(yīng)了解如何調(diào)整儀器達(dá)到最佳狀態(tài)。
最基本的就是良好的進(jìn)樣系統(tǒng):直接進(jìn)樣應(yīng)具有準(zhǔn)確的進(jìn)樣針,惰性較好的進(jìn)樣瓶和瓶隔墊,設(shè)計(jì)良好的洗針?lè)绞健⑽鼧臃绞脚c快速進(jìn)針等;
進(jìn)樣口的汽化效果,吹掃效果與分流效果要好:應(yīng)從襯管型號(hào),隔墊吹掃流量,分流流量,柱頭準(zhǔn)確安裝等方面綜合而定;
色譜柱的質(zhì)量、檢測(cè)器的β吹、載氣和其他氣體的純度和去烷烴去水去氧化物的程度等都會(huì)影響峰面積。
2、方法確立
一個(gè)設(shè)計(jì)再好的儀器,如果在使用時(shí)方法設(shè)立不當(dāng),也不會(huì)有良好的重復(fù)性。這個(gè)方法的設(shè)計(jì),包含的思·和原則比較多,說(shuō)起來(lái)比較復(fù)雜。
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)應(yīng)具備以下特點(diǎn):合適的進(jìn)樣方式(頂空還是直接進(jìn)樣)、正確的洗針溶劑、合適的分流比及隔墊吹掃、合適的色譜柱選用(不合適的固定相會(huì)導(dǎo)致峰拖β影響積分導(dǎo)致重復(fù)性不好)、合適的檢測(cè)器(C、H比例較高的用FID,±族元素比例高的用ECD,N、P較高的用NPD等等)和合適的β吹流量。
3、設(shè)備維護(hù)
包括進(jìn)樣隔墊和襯管的定期更換、柱頭石墨密封圈是否變形、襯管O型圈的狀態(tài)、氣·系統(tǒng)的泄©檢查、捕集肼和變色硅膠的更換、柱溫箱溫度的校驗(yàn)、色譜柱及色譜系統(tǒng)的定期老化和清潔等。