影響微生物檢驗質(zhì)量的因素
1、檢驗人員
2、儀器設(shè)備
3、檢驗培養(yǎng)基試劑
4、檢驗環(huán)境
5、采樣
6、檢驗質(zhì)量
7、檢驗的執(zhí)行
8、參考菌株及其保存
9、檢驗報告及其結(jié)果質(zhì)量控制
1.檢驗人員
(1)微生物檢驗不能完全依賴全自動鑒定儀器,檢驗工作中每一步驟均需要高度的主觀分析判斷能力,與個人的經(jīng)驗、技能和微生物檢驗基礎(chǔ)知識水平密切有關(guān)。
(2)除要求微生物檢驗人員必須具備嚴(yán)肅認(rèn)真的工作態(tài)度,精密細致的觀察和操作習(xí)慣,注重個人衛(wèi)生外,還必須訓(xùn)練掌握微生物檢驗技術(shù)。
(3)檢驗人員應(yīng)執(zhí)行上崗前培訓(xùn)制度,上崗前培訓(xùn)合格方能上崗操作,還要主動參加學(xué)習(xí)、培訓(xùn)、講座、學(xué)習(xí)新技術(shù),掌握微生物學(xué)檢驗方法,標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)法律法規(guī)。
(4)參與編寫測試程序及儀器操作程序,學(xué)習(xí)質(zhì)量保證體系知識和計量學(xué)基本知識。
(5)參加各類水平測試和盲樣測試,提高檢測水平和分析問題、解決問題的能力。
(6)微生物負責(zé)人應(yīng)定期對檢驗人員進行專業(yè)知識和操作熟練程度的考核,提高檢驗人員的素質(zhì)。
2.儀器、設(shè)備
微生物檢驗的主要儀器及設(shè)備
冰箱、生物安全柜、超凈工作臺、冰箱、生物安全柜、超凈工作臺、高壓滅菌器、培養(yǎng)箱、水浴鍋、pH計、顯微鏡、烘箱等。
注意事項:
要求所有的儀器和設(shè)備均應(yīng)按照生產(chǎn)廠家的方法和有關(guān)規(guī)定正確使用。
需要強制性定期檢定的儀器和設(shè)備,經(jīng)符合資歷的計量部門校準(zhǔn)合格后方可使用。
對于常用的貴重儀器和設(shè)備,在使用前應(yīng)加以檢查,使用后要登記,要做到定期維護,以保證儀器處于良好的工作狀態(tài)。
(1)高壓滅菌器
①操作人員應(yīng)了解高壓滅菌器的原理并遵守操作規(guī)則。
②放入的滅菌物品不宜放得過擠。
③使用時放入生物指示條或化學(xué)指示條;每天用水銀留點溫度計進行校準(zhǔn)。
④每季度用生物指示劑進行監(jiān)控。
注意:實驗室需要使用的無菌器具應(yīng)能正確實施滅菌,無菌器具和器皿有明顯標(biāo)識。
(2)培養(yǎng)箱
①箱內(nèi)不應(yīng)放入過熱或過冷的物品,取放物品時應(yīng)隨手關(guān)閉箱門,以維持恒溫。
②如培養(yǎng)物不慎潑灑到箱內(nèi),應(yīng)馬上清潔,并采取必要的消毒措施。
③培養(yǎng)物不宜與培養(yǎng)箱四周及最低層直接接觸。
④每天記錄溫度的變化,如有偏差馬上修正或維修。
3.培養(yǎng)基、試劑
微生物檢驗所用培養(yǎng)基必須由專業(yè)廠家生產(chǎn),產(chǎn)品質(zhì)量必須符合有關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),保存也應(yīng)符合要求,防止潮解、結(jié)塊等。培養(yǎng)基一旦變質(zhì)不得再使用。
(1)培養(yǎng)基的配制應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進行操作,并做好配制記錄。
(2)為保證培養(yǎng)基質(zhì)量,在配制時應(yīng)注意:制備培養(yǎng)基必須在玻璃容器或搪瓷缸中進行,如用銅、鐵等金屬器皿可能會對微生物生長有毒害作用。
(3)使用專用的角匙取樣品避免交叉污染。
(4)配制時必須使用蒸餾水或去離子水,不得使用自來水。
(5)不同類型的微生物對pH值得要求不同,配制時應(yīng)測定pH值,如測定結(jié)果與所需要求不符,則用NaOH或HCL溶液進行調(diào)節(jié)。
(6)制備好的培養(yǎng)基應(yīng)及時使用,使用不完的如無特殊要求可室溫或2-8度冷藏保存。
4.檢驗環(huán)境
微生物檢驗均在檢驗室進行,即不能讓微生物散布出去,又必須使樣品不再受污染,更不能允許病源菌感染檢驗人員,為此檢驗室的環(huán)境要求和衛(wèi)生管理制度非常重要。
(1)微生物檢驗室要求內(nèi)外環(huán)境整潔,布局合理,操作區(qū)與辦公區(qū)域分開。
(2)洗滌室、培養(yǎng)室、消毒間、無菌室應(yīng)分開,設(shè)有專室。
(3)微生物室應(yīng)備有自動或腳踩式洗手池和固定的消毒設(shè)施。
(4)無菌室設(shè)有緩沖間。
(5)定期對操作環(huán)境進行消毒
(6)每天進行空氣落菌實驗。
5.采樣
(1)采樣工具和容器選用耐消毒滅菌的材料,采樣工具不能使用消毒劑消毒,樣品中不得加入防腐劑,以免影響檢驗結(jié)果的正確性。
(2)在嚴(yán)格無菌操作的條件下,按國家規(guī)定的樣品采集標(biāo)準(zhǔn)均勻準(zhǔn)確地采樣,并及時封口,使樣品具有準(zhǔn)確性和代表性。
(3)每件樣品封口后,貼上標(biāo)簽,做好記錄,一般樣品可在保存在2-8度的環(huán)境中,如是冷凍食品應(yīng)保持在冷凍狀態(tài),并及時送件。
(4)采樣數(shù)量不能少于全部檢驗需要量的3倍,以供檢驗、復(fù)檢、備查。
6.檢驗質(zhì)量
除按國家標(biāo)準(zhǔn)方法對所需檢驗項目進行檢測外,在實際工作中應(yīng)還注意以下幾個方面否則會影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性:
(1)在定量檢驗時用重量法還是體積法,檢驗結(jié)果會有誤差,因為比重不等于1的樣品,1ml和1g的檢驗結(jié)果絕不會相等,一般固態(tài)樣品的宜用重量法,液體樣品宜用體積法,但對于粘性液體(如酸牛奶),如用體積法會粘附一定量的樣品在吸管上,因此此類樣品最好用重量法。
(2)如檢樣需用無菌水或無菌生理鹽水稀釋,則最好用勻質(zhì)器處理制成均勻的菌懸液。
(3)樣品稀釋時常會滯留少量樣品在吸管內(nèi)外,應(yīng)多加注意,吸管插入樣品或稀釋液中應(yīng)深淺一致,否則會影響檢驗結(jié)果,吸入液體后,應(yīng)沿管壁慢慢注入遞增的稀釋液中特別注意此時吸管尖端切不可碰到稀釋液中。
(4)在培養(yǎng)基傾注入檢樣、菌懸液時注意培養(yǎng)基溫度宜在45-50度之間,并使培養(yǎng)基與檢樣菌懸液充分混合。
(5)微生物培養(yǎng)時,應(yīng)根據(jù)要求選擇正確的培養(yǎng)溫度和時間。
(6)應(yīng)做空白對照,如果在空白對照中檢出細菌,則可認(rèn)為培養(yǎng)基質(zhì)量存在問題獲在操作過程中存在污染情況。另外采用標(biāo)準(zhǔn)菌種作陽性對照,觀察培養(yǎng)基的質(zhì)量情況。
(7)整個檢驗過程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。
(8)及時檢查結(jié)果,做好原始數(shù)據(jù)記錄。
7.校驗的執(zhí)行
儀器設(shè)備檔案應(yīng)包含以下內(nèi)容:
(1)儀器名稱、編號、啟用日期。
(2)常規(guī)校驗的方法和校驗周期。
(3)可以接受的操作范圍。
(4)儀器功能上的缺陷
(5)常規(guī)維修的曰期
注意事項:
儀器只要不報廢,維修記錄必須保存。
實驗室應(yīng)預(yù)先制定儀器校驗計劃,并按計劃對需要強制性定期檢定的儀器和設(shè)備進行檢定。
8.標(biāo)準(zhǔn)菌株及其保存
(1)標(biāo)準(zhǔn)菌株可以從國際菌種保藏中心(ATCC、AS、MIG等)或室間質(zhì)控活動中獲得,準(zhǔn)確鑒定過的分離株也可使樣。
(2)保存菌株應(yīng)設(shè)專人妥善保管,菌株保存箱應(yīng)加鎖放置,取出使用應(yīng)登記。
9.檢驗報告及結(jié)果質(zhì)量控制
(1)對原始數(shù)據(jù)進行整理,用回歸分析法和方差方法進行處理,去除不必要的誤差,獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。
(2)應(yīng)注意檢驗結(jié)果應(yīng)與衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的表示方法一致,定量檢測以N*10n表示,N為兩位有效數(shù)字。
(3)有關(guān)人員簽字后,加蓋檢驗單位印章,以示有效,才能使檢驗結(jié)果既有法律依據(jù)又有學(xué)術(shù)依據(jù)。
以上是食品微生物檢驗的質(zhì)量控制的9個方面,還有其他因素也會影響檢測結(jié)果的質(zhì)量,需要我們認(rèn)真總結(jié),多多注意。