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【干貨】微生物檢測領(lǐng)域能力驗證注意事項

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2021-04-06
核心提示:一、什么是能力驗證1、能力驗證按照預(yù)先制訂的準(zhǔn)則,通過實驗室間比對,來評價參加者的能力。當(dāng)有的量值的溯源尚難實現(xiàn)或無法實現(xiàn)
 一、什么是能力驗證

1、能力驗證

按照預(yù)先制訂的準(zhǔn)則,通過實驗室間比對,來評價參加者的能力。當(dāng)有的量值的溯源尚難實現(xiàn)或無法實現(xiàn)時,可利用能力驗證來表明測量結(jié)果的可信性。

2、實驗室能力驗證

實驗室能力驗證是利用實驗室間比對來判定實驗室的能力的活動,也是認(rèn)可機構(gòu)加入和維持國際相互承認(rèn)協(xié)議(MRA)的必要條件之一。

二、能力驗證樣品接收及準(zhǔn)備

1、操作前仔細閱讀參指導(dǎo)書,關(guān)鍵是小的備注要注意,很多特殊情況的處理大都在備注里。


2、樣品接收前的檢查很重要,首先對樣品的完整性進行檢查,對信息的閱讀要全面,如果發(fā)現(xiàn)樣品有問題及時溝通,這樣要比做樣品的時候在發(fā)現(xiàn)來的要及時,能節(jié)省不少的時間;


3、作業(yè)指導(dǎo)書的閱讀要到位,很多能力驗證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書,作業(yè)指導(dǎo)書中往往會對本次能力驗證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項等有明確的規(guī)定,熟讀這些對試驗準(zhǔn)備有很好的作用。比如有的會要求將試驗后樣品一塊寄發(fā)組織單位,有的實驗室如果不仔細閱讀的話很容易將測試后樣品立即處理掉,如果寄樣時在看見可就完了。


4、測試前的準(zhǔn)備工作一定要做好,包括設(shè)備的校準(zhǔn)、試運行等,有條件的情況下可以在正式測試前選擇一塊相仿的樣品進行一下預(yù)測試,這樣會將測試過程中的問題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對正式測試的操作有幫助。

三、能力驗證樣品預(yù)處理

1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌。

正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝,再加入剩余水量,混勻后滅菌或分裝。

 

2、混菌法倒皿要充分混勻。

培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈(混勻速度一定要慢,目的是——避免培養(yǎng)基波動到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染),找較水平位置冷卻凝固。

 

3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問題。

覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動,造成片狀生長,無法計數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動性-對于不運動的菌,可以不覆蓋,對于運動的菌覆蓋。

總結(jié)一下:

a長期檢測同一種樣品,不覆蓋并無蔓延現(xiàn)象,不覆蓋;長期檢測蔓延選擇了覆蓋,一直覆蓋。

b未知樣品,進行覆蓋和不覆蓋的比對實驗,然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗。

c能力驗證實驗,覆蓋和不覆蓋的都做,不要吝惜那么一點點培養(yǎng)基或耗材,畢竟能力驗證實驗做的漂亮才是實驗室(是室而不是人。┠芰Φ木C合體現(xiàn)。

 

4、培養(yǎng)過程防止平皿干燥。

培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基可以倒的適當(dāng)厚一些,比如25mL。培養(yǎng)箱底部接一個不銹鋼盆,裝上足量無菌水。


5、 實驗培養(yǎng)過程勤觀察。

微生物培養(yǎng)過程一般需要幾小時到幾十小時,要利用這段時間觀察培養(yǎng)箱及菌生長情況,比如溫度是否穩(wěn)定,培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等,多思多看,準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實驗結(jié)果。

原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗的全過程,原始記錄要包含時間、試驗現(xiàn)象、試驗結(jié)果三個要素,方便試驗出現(xiàn)問題的查找。

四、實驗過程一定要做陰陽對照

陽性對照,是在試驗中,檢驗培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合,如果在實驗中,陽性實驗沒有生長的話,那這個實驗是失敗的。陰性對照主要是檢測培養(yǎng)基是否污染,在沒有加入任何東西培養(yǎng)時,培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會顯示陽性結(jié)果,這就說明培養(yǎng)基滅菌不徹底,染菌了,這樣也會影響實驗結(jié)果的。

五、培養(yǎng)基方面需要注意的地方

1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌。

正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝螅偌尤胧S嗨,混勻后滅菌或分裝。

一定要用震蕩器充分混勻水化液,作為檢測原液,普通手搖混勻與經(jīng)震蕩器混勻的樣品液,計數(shù)結(jié)果相差較大;靹蚝蟮臉悠穱(yán)格按照指導(dǎo)書規(guī)定的時間進行檢驗。

2、混菌法倒皿要充分混勻。

培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈(混勻速度一定要慢,目的是——避免培養(yǎng)基波動到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染),找較水平位置冷卻凝固。

3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問題。

覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動,造成片狀生長,無法計數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動性-對于不運動的菌,可以不覆蓋,對于運動的菌覆蓋。

總結(jié)一下:

a 長期檢測同一種樣品,不覆蓋并無蔓延現(xiàn)象,不覆蓋;長期檢測蔓延選擇了覆蓋,一直覆蓋。

b 未知樣品,進行覆蓋和不覆蓋的比對實驗,然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗。

c 能力驗證實驗,覆蓋和不覆蓋的都做,不要吝惜那么一點點培養(yǎng)基或耗材,畢竟能力驗證實驗做的漂亮才是實驗室(是室而不是人!)能力的綜合體現(xiàn)。

4、 實驗培養(yǎng)過程勤觀察。

微生物培養(yǎng)過程一般需要幾小時到幾十小時,要利用這段時間觀察培養(yǎng)箱及菌生長情況,比如溫度是否穩(wěn)定,培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等,多思多看,準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實驗結(jié)果。

原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗的全過程,原始記錄要包含檢測時間、檢測現(xiàn)象、檢測結(jié)果三個要素,方便檢測出現(xiàn)問題的溯源。

六、結(jié)果判定

結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作,但是對于人為操作如評級、手工操作等結(jié)果可能會因為人員的差別而會有不同的偏差,這樣在判定時最好是找有經(jīng)驗的部門負責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪,這樣的話會減少很多不必要的錯誤。

編輯:songjiajie2010

 
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