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那些年我們曾經(jīng)犯過錯誤的實驗基本操作,一次性幫你弄明白操作要點!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-11-08
核心提示: 一、容量瓶 凡要求準確配制一定濃度的溶液時必須使用容量瓶。容量瓶的容量有大有小,均在瓶上標出(如50ml、500ml等)。瓶
 一、容量瓶 凡要求準確配制一定濃度的溶液時必須使用容量瓶。

容量瓶的容量有大有小,均在瓶上標出(如50ml、500ml等)。瓶頸上有一刻度線,表示當液體加到此刻度時就相當于瓶上所標容量。瓶上并標有溫度,通常為20℃,表示瓶上所標容量是在20℃時的容量。室溫不在20℃時,容量將會有所增減。


配制溶液時,先將溶質(zhì)在燒杯中用少量溶劑溶解,再把溶液沿玻璃棒引入容量瓶;用少量溶劑沖洗燒杯后倒入容量瓶,最后再添加溶劑到刻度線。加溶劑時在接近刻度線前,應(yīng)改用滴管吸取溶劑添加,以免超過刻度線。裝透明溶液時應(yīng)使液體凹面下線與瓶上刻度線重疊;非透明溶液則應(yīng)使液體凹面上線與刻度線重疊。


混勻時,一手握瓶頸并按住瓶塞;一手托瓶底,反復(fù)顛倒、搖動數(shù)次。

為了保證容量瓶的準確度,容量瓶中所裝溶液溫度應(yīng)在20℃左右,不可過高或過低,切不可直接加熱;用后只能以水沖洗或用鉻酸洗液浸泡,切不可放入毛刷直接刷洗;洗凈后倒置放干而不能烘干;容量瓶與其瓶塞是成套固定的,不可任意更換,以免不嚴而漏出液體;當配制蛋白質(zhì)溶液時,先在燒杯內(nèi)溶解后再沿瓶壁緩緩加入,在加到刻度后再混勻,以免產(chǎn)生大量氣泡影響觀察刻度。


二、吸量管是精密的卸量容器。實驗室常用的分三種:


1、刻度吸管:這類吸管的管壁上刻印有多個刻度。刻度分為刻到尖端的及刻度不到尖端的;刻度讀數(shù)有從上而下及從下而上的,用前必須分清楚。

用刻度吸量管量取液體時,若使用刻度不到尖端的,只要小心將液體放至下端最后刻度處即可。若使用刻度到尖端的吸管則要注意使用規(guī)則。一般認為1ml(包括1ml)以上的刻度管,在放出液體后,尖端遺留的液體不應(yīng)吹出,只要使管尖緊靠容器內(nèi)壁轉(zhuǎn)動幾秒鐘即可;1ml以下(不包括1ml)的刻度管則必須把尖端遺留的液體吹入容器內(nèi)。這類管上一般都印有“吹”字。

若遇不明是否該吹的吸管,可作校正后再行使用,以免產(chǎn)生錯誤。


2、移液管:此類管中部有一圓柱狀空泡,只有一個刻度。由于卸出量已經(jīng)固定,所以準確性比刻度吸管大。使用時,將所量取的液體慢慢放出,尖端所余少量液體不應(yīng)吹出,只須在最后將管尖觸及容器內(nèi)壁轉(zhuǎn)動幾秒鐘即可。這類管主要作量卸液體之用。


三、吸量管的使用方法


1、一般使用吸管是用拇指和中指握著管身,刻度數(shù)字對著自己,并使管與地面垂直;以食指堵塞吸管上端開口,用以控制液體的放出速度。

2、吸取液體時,應(yīng)用橡皮球(洗耳球)吸取,不能用嘴吸。特別是濃酸、濃堿及有毒物質(zhì),嚴禁用嘴吸。吸時,應(yīng)把吸管插入液體的適當深度,以免發(fā)生空吸現(xiàn)象。吸取液體的量應(yīng)超過最高刻度少許。

3、當吸管從所吸取的液體中取出后,均須用濾紙片將管外壁抹干凈(特別是吸取血液等粘性液體時更需要如此)以免影響取量。

4、吸管用濾紙抹凈后,將液體放至起始刻度,棄去多余液體,然后再放至所需刻度。讀取刻度時,眼睛要與所讀取的刻度平行?潭纫话銥閳A圈或弧形,平行時只能看到一條線,液體應(yīng)流至液體的凹面底部正好與該條線重疊。釋放液體速度要慢,不可放開食指自由下落,以免液體在管壁內(nèi)附著過多而造成誤差。


5、為減少誤差。要選用恰當?shù)奈,如量?.5ml時應(yīng)選用2ml的刻度吸管,而不可選用5ml或10ml的,以1ml吸管吸取兩次代替2ml也會產(chǎn)生誤差。


6、吸管用畢,應(yīng)立即用水沖洗,特別吸血液、組織勻漿等含蛋白質(zhì)溶液的吸管,因蛋白質(zhì)干固后將堵塞吸管的尖端。水沖后,晾干,再泡入鉻酸洗液中1h以上,最后取出洗凈烘干。

7、使用過程中要防止吸管尖端和上口碰破,尖端碰破殘缺,則吸量不準;上口破殘,則不易控制流量。均不能使用。

四、玻璃儀器的洗滌方法


玻璃儀器的清潔與否,直接影響實驗的結(jié)果,如因為儀器的不清潔或污染引起蛋白質(zhì)變性或抑制酶的活性,造成錯誤的實驗結(jié)果。因此玻璃儀器的洗滌清潔工作是非常重要的。在實驗的過程中每個人都要逐步養(yǎng)成保持所用玻璃儀器清潔、放置整齊的良好習慣。其清洗方法如下:

1、一般玻璃儀器:如試管、燒杯、錐形瓶等。先用自來水沖去污物,浸于洗衣粉或肥皂水內(nèi),用毛刷細心地刷洗內(nèi)外(也可用毛刷抹肥皂或洗衣粉刷洗)務(wù)使多生泡沫,再用自來水沖洗,察看器壁上是否沾有水珠,沾有小水球表示未洗干凈,應(yīng)重復(fù)洗滌,直至不沾水珠為止。最后用蒸餾水少量沖洗2~3次。洗凈后器皿倒置干凈處晾干或烘干。

2、量度玻璃儀器:如吸管、滴定管、量筒和容量瓶等。使用后,應(yīng)立即用清水沖洗除去血液、試劑等殘留物(千萬勿使其干固),晾干后,再浸泡于鉻酸清潔液中4~6h或過夜。然后用水充分沖洗,并察看是否洗凈(方法同前),如已洗凈再用少量蒸餾水沖洗2~3次,除吸管可烘干外,其它只能倒置晾干。

五、洗滌液


實驗室中除用水、洗衣粉和肥皂外,還使用一些化合物的溶液洗滌玻璃儀器。這些溶液稱為洗滌液,其種類很多。先介紹幾種:

1、鉻酸洗液(重鉻酸鉀-硫酸洗液,簡稱洗液)。這是實驗室中使用最廣泛的一種洗液。配方很多,可根據(jù)情況選用。如:

(1)稱取重鉻酸鉀50g,溶于100ml水中,再慢慢邊加邊攪動地加入濃硫酸(工業(yè)用)400ml,若中途溫度過高,則暫停待稍冷后再加。冷卻后即可使用。

(2)稱取重鉻酸鉀5g,加水5ml,攪拌,使其溶解,慢慢加入濃硫酸(工業(yè)用)100ml。待冷卻后即可使用。

鉻酸洗液具有強烈的腐蝕性。皮膚、衣物等要避免與之接觸。洗液應(yīng)保存在密閉容器中,以防吸水。良好的洗液應(yīng)呈褐紅色,如溶液變成黑綠色表示已失效,無氧化能力,應(yīng)更換。

2、10%~20%尿素溶液。是蛋白質(zhì)的良好溶劑,用以洗滌盛過血液等含蛋白質(zhì)的器皿。


3、硝酸洗滌液。用水和濃硝酸按1∶1配成的硝酸溶液,可用以洗滌二氧化碳測定儀等。

六、實驗室常用儀器的使用

(一)離心機 :離心機是利用離心力把溶液中比重不同的物質(zhì)或?qū)⒐腆w和液體分離開的儀器。類型很多,有低速、高速、超速之分。一般實驗室中常用低速離心機,最高速度為4000r/min。分為小型臺式和落地式兩種;静僮魅缦拢

1、使用前先檢查離心管外套管,應(yīng)完整不漏,底部應(yīng)有皮墊。


2、將待離心溶液轉(zhuǎn)移到合適的離心管內(nèi)。盛量以不超過離心管的2/3為宜。再將離心管放入外套管內(nèi)。


3、將裝有離心管的套管放在電子秤上平衡,若不平衡,可在離心管與套管之間加水或調(diào)節(jié)離心管內(nèi)容物的量使之達到平衡。

每次離心時一定要嚴格執(zhí)行此平衡操作。否則不能放入離心機內(nèi)離心。因為若不平衡,離心時將損傷離心機的軸以至造成嚴重事故。應(yīng)十分警惕。


4、將已平衡好的離心管和套管成對地按對稱方向放入離心機中,并取出不用的空套管,蓋上離心機蓋。


5、開動離心機前,應(yīng)檢查變速旋鈕,看是否在“0”位置。再打開電源開關(guān),并慢慢扭動變速旋鈕,逐步增加速度。停止時,將旋鈕慢慢回到“0”位置。待離心機自動停止后,才能打開離心機蓋取出樣品,絕對不能用手阻止離心機轉(zhuǎn)動,以免發(fā)生事故。

6、用畢,倒去套管中的水。取出皮墊,并倒置套管使其干燥。

7、使用時還應(yīng)該注意:

⑴在離心過程中,若聽到特殊響聲,應(yīng)立即停止離心。若是離心管破碎,應(yīng)更換新的,平衡后再行離心。

⑵離心酸堿及腐蝕性溶液時,應(yīng)避免灑落在套管內(nèi)。若遇此情況應(yīng)立即洗凈,以免腐蝕套管。

⑶離心機不宜連續(xù)使用時間過長,約40min后應(yīng)休息約20min,以免過熱。

⑷離心機應(yīng)定期檢修。每年檢查一次離心機內(nèi)電動機的電刷與整流子磨損情況。若有損壞應(yīng)更換。

(二)酸度計:酸度計是測定溶液pH的重要儀器。

1.什么是PH標準緩沖溶液?它有哪些特點?

PH緩沖溶液是一種能使PH 值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿,或者在溶液中的化學反應(yīng)產(chǎn)生少量的酸或堿,以及將溶液適當稀釋,這個溶液的PH值基本上穩(wěn)定不變,這種能對抗少量酸堿或大或稀釋,而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。

pH標準緩沖液有以下特點:

(1)標準溶液的pH值是已知的,并達到規(guī)定的準確度。

(2)標準溶液的pH值有良好的復(fù)現(xiàn)性和穩(wěn)定性,具有較大的緩沖容量,較小的稀釋值和較小的溫度系數(shù)。

(3)溶液的制備方法簡單。


2.如何配制PH標準緩沖溶液?

對于一般pH測量,可使用成套的pH組沖試劑(可配制250mL),配制溶液時,應(yīng)使用去離子水,并預(yù)先煮沸15~30分鐘,以除去溶解的二氧化碳。剪開塑料袋將試劑倒入燒杯中,用適量去離子水使之溶解,并沖洗包裝袋,再倒入250mL容量瓶中,稀釋至刻度,充分搖勻即可。


3.如何正確保存和使用pH緩沖溶液?

緩沖溶液配制后,應(yīng)裝在玻璃瓶或聚乙烯瓶中(堿性pH緩沖液如PH9.18、pH10.01、pH12.46等,應(yīng)裝在聚乙烯瓶中)瓶蓋嚴密蓋緊,在冰箱中低溫(5~10℃)保存,一般可使用六個月左右,如發(fā)現(xiàn)有混頻器濁,發(fā)霉或沉淀現(xiàn)象,不能繼續(xù)使用。使用時,應(yīng)準備幾個50 mL的聚乙烯小瓶,將大瓶中的組沖溶液倒入小瓶中,并在環(huán)境溫度下放置1~2個小時,等溫度平衡后再使用。使用后不得再倒入大瓶中,以免污染,瓶中的緩沖溶液在>10℃的環(huán)境條件下可以使用2~3天,一般pH7.00、pH6.86、pH14.00三種溶液使用時間可以長一些,pH9.18和pH10.01溶液由于吸收空氣中的二氧化碳,其pH值比較容易變化。

4.pH緩沖溶液有何用途?

(1)pH測量前標定校準pH計。

(2)用以檢定pH計的準確性,例如用pH6.86和pH14.00標定pH計后,將pH電極插入pH9.18溶液中,檢查儀器顯示值和標準溶液的pH值是否一致。

(3)在一般精度測量時檢PH計是否需要重新標定。pH計標定并使用后也許會產(chǎn)生漂移或變化,因此在測試前將電極插入與被測溶液比較接近的標準緩沖液中,根據(jù)誤差大小確定是否需要重新標定。

(4)檢測pH電極的性能。


5.pH電極為何要浸泡?如何正確浸泡PH復(fù)合電極?

PH電極使用前必須浸泡,因為pH球泡是一種特殊的玻璃膜,在玻璃膜表有一很薄的凝膠層,它只有在充分濕潤的條件下才能與溶液中的氫離子有良好的影響。同時,玻璃電極經(jīng)過浸泡,可以使不對稱電勢大大下降并趨向穩(wěn)定。PH玻璃電極一般可以用蒸餾水或PH4緩沖溶液浸泡。通常用PH4緩沖溶液浸泡更好上些,浸泡時間至24小時或更長,根據(jù)球泡玻璃膜厚度、電極老化程度而不同。同時,參比電極的液接界也需要浸泡。因為如果液接界干涸會使液接界電勢增大或不穩(wěn)定,參比電極的浸泡液必須和參比電極的外參比溶液一致,即3.3mol/L KCL溶液或飽和KCL溶液,浸泡時間一般幾小時即可。

因此,對pH復(fù)合電極而言,就必須浸泡在含KCL的pH4緩沖液中,這樣才能對玻璃球泡和液接界同時起作用。這里要特別提醒注意,因為過去人們使用單支的PH玻璃電極已習慣于用去離子水或pH4組沖液浸泡,后來使用PH復(fù)合電極時依然采用這樣的浸泡方法,甚至在一些不正確的PH復(fù)合電極的使用說明書中也會進行這種錯誤的指導。這種錯誤的浸泡方法引起的直接后果就是使一支性能良好的PH復(fù)合電極就成一支響應(yīng)慢、精度差的電極,而且浸泡時間越長性能越差,因為經(jīng)過長時間的浸泡,液接界內(nèi)部(例如砂芯內(nèi)部)的KCL濃度已大大降低了,使液接界電勢增大和不穩(wěn)定。當然,只要在正確的浸泡溶液中重新浸泡數(shù)小時,電極還是會復(fù)原的。

另外,pH電極也不能浸泡在中性或堿性緩沖溶液中,長期浸泡在此類溶液中會使pH玻璃膜響應(yīng)遲鈍。

正確的PH電極浸泡液的配制:取pH4.00緩沖劑(250mL)一包,溶于250mL純水中,再加入56克分析純KCL,適當加熱,攪拌至完全溶解即成。

文章(文字)來源:食品實驗室服務(wù)。轉(zhuǎn)載已獲授權(quán)。
編輯:songjiajie2010

 
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