食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號

液質(zhì)聯(lián)用進階,輕松解決各種問題。!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-01-19
核心提示:質(zhì)譜具有很高的靈敏度和分辨率,在定性和定量方面有很有優(yōu)勢,所以現(xiàn)在配置質(zhì)譜的實驗室越來越多,質(zhì)譜相對色譜來說,除了對環(huán)境

質(zhì)譜具有很高的靈敏度和分辨率,在定性和定量方面有很有優(yōu)勢,所以現(xiàn)在配置質(zhì)譜的實驗室越來越多,質(zhì)譜相對色譜來說,除了對環(huán)境的要求更高,操作和維護也更加繁瑣,每個品牌不同系列的維護要求也不同,但質(zhì)譜儀有些基本的維護操作,本文就總結(jié)下質(zhì)譜儀日常需要做到的維護,基本適用大部分的液質(zhì)聯(lián)用儀。

 

液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)又叫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),它以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)。樣品在質(zhì)譜部分和流動相分離,被離子化后,經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開,經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢的互補,將色譜對復(fù)雜樣品的高分離能力,與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點結(jié)合起來,在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。

 

一.質(zhì)譜儀工作環(huán)境


 

1.質(zhì)譜儀環(huán)境要求:

①周圍無強烈震蕩源及電磁感應(yīng)裝置;

②電源要求接地交流電;

③室溫要求15~28℃;

④相對濕度要求20%~80%。

可見使用過程中要特別注意室內(nèi)溫度和濕度的控制。一般沒有外置飛行管的飛行時間質(zhì)譜對環(huán)境的要求更嚴(yán)格,外部環(huán)境會直接影響質(zhì)量軸的準(zhǔn)確性。質(zhì)譜儀采用兩級抽氣結(jié)構(gòu),前級為機械泵,后級為分子渦輪泵工作時先由前級泵,將真空腔內(nèi)的壓強降低幾個數(shù)量級,再由后級泵降至工作所需壓強。

 

二.液質(zhì)原理、分類、特點



 

1、LC-MS原理概述

液質(zhì)聯(lián)用以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)。樣品在質(zhì)譜部分和流動相分離,被離子化后, 經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按荷質(zhì)比分開,經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。

體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢的互補,將色譜對復(fù)雜樣品的高分離能力,與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點結(jié)合起來,在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。

 

2、常用的兩大分類系統(tǒng):

一種是從質(zhì)譜的離子源角度來劃分,包括電噴霧離子源(ESI),大氣壓化學(xué)電離源(APCI),大氣壓光電離源(APPI)和基質(zhì)輔助激光解吸電離源(MALDI)等。

另一種是從質(zhì)譜的質(zhì)量分析器角度來劃分,包括四極桿、離子阱、飛行時間(TOF)和傅立葉變換質(zhì)譜等。ESI、APCI和APPI三種離子源大多與四極桿和離子阱質(zhì)譜聯(lián)用,是目前應(yīng)用最廣泛的幾種液質(zhì)聯(lián)用儀。

 

3、主要分析特點:

LC-MS除了可以分析氣質(zhì)聯(lián)用所不能分析的強極性、難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性的化合物之外,還具有以下幾個方面的優(yōu)點:

分析范圍廣,MS幾乎可以檢測所有的化合物,比較容易地解決了分析熱不穩(wěn)定化合物的難題;

分離能力強,即使被分析混合物在色譜上沒有完全分離開,但通過MS的特征離子質(zhì)量色譜圖也能分別給出它們各自的色譜圖來進行定性定量;

定性分析結(jié)果可靠,可以同時給出每一個組分的分子量和豐富的結(jié)構(gòu)信息;

檢測限低,MS具備高靈敏度,通過選擇離子(SIM)檢測方式,其檢測能力還可以提高一個數(shù)量級以上;

分析時間快,LC-MS使用的液相色譜柱為窄徑柱,縮短了分析時間,提高了分離效果;

自動化程度高,LC-MS具有高度的自動化。

 

三.使用



 

1.開機:

質(zhì)譜儀的開機首先開氣,再開機械泵,再打開質(zhì)譜儀的電源,等真空度達到后再開啟分子渦輪泵,等真空度達到后才可以進行調(diào)諧校正,一般至少需要抽12個小時才能達到。每次開機后都需要校正后才能使用質(zhì)譜儀。

 

2.樣品測試過程:

2.1.與液相色譜聯(lián)用時,流動相需要先用<0.45μm的膜過濾,需要區(qū)別有機膜和水膜,樣品也同樣需要過濾或者用>10000rpm的轉(zhuǎn)速離心去掉固體雜質(zhì)。

2.2.流動相不能用難揮發(fā)的酸或鹽,如磷酸鹽和硼酸鹽,液相常用的TFA會抑制離子電離,也不建議使用;表面活性劑在質(zhì)譜中響應(yīng)很高,尤其是ESI源,所以所有管和器具的清洗不能用洗潔精,用來改善分離和色譜峰形的離子對試劑也應(yīng)慎用。與質(zhì)譜聯(lián)用時建議使用的是甲酸、乙酸、甲酸銨、乙酸銨和氨水等。

2.3.根據(jù)選用的離子源調(diào)整液相方法,ESI源一般用0.3~0.6mL/min,常規(guī)HPLC分析柱的規(guī)格是5μm,4.6×250mm的,一般流速都是1mL/min,可以采用柱后分流的方式來調(diào)整進入質(zhì)譜的流量。同時要根據(jù)進入質(zhì)譜的流量和樣品性質(zhì)調(diào)整霧化氣溫度和霧化氣的流量。

2.4.樣品測試結(jié)束后,需要清洗進樣管路,清洗后停泵,待離子源溫度降低后再選擇待機狀態(tài)。

 

四.液質(zhì)日常定期維護



 

1.使用的穩(wěn)壓電源UPS,保證儀器電源電壓穩(wěn)定持續(xù)(特別是停電時對儀器的影響)。

2.每天用異丙醇溶液沖洗系統(tǒng)和清潔霧化室,定期開震氣閥震氣(對于ESI源,至少每星期做一次;對于APCI源,每天做一次),保證毛細(xì)管潔凈。

3.流動相流速不要過高,ESI離子源不要超過0.5ml/min,APCI不要超過1.0ml/min。

4.機械泵的泵油需要定期更換,一般半年更換一次,如果泵油看起來很臟,需要提前更換。更換泵油的時候需要將泵油全部倒出,再更換新的泵油,不同品牌的泵油不能混用。一般實驗室的質(zhì)譜儀都會在長假的時候進行大的維護。

5.控制好樣品運行的環(huán)境,包括溫度和濕度。

6.實驗完畢后要清洗進樣針、進樣閥等,用過含酸的流動相后,色譜柱和離子源都要用甲醇/水沖洗。

7.定期清洗樣品錐孔,關(guān)閉隔斷閥,取下樣品錐孔,先用甲醇:水:甲酸(45:45:10)的溶液超聲清洗10分鐘,然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10分鐘,待晾干后再安裝到儀器上。

8.流動相要現(xiàn)用現(xiàn)配,最好不要過夜,一定要新鮮。
    9.定期更換電子倍增器。

 
編輯:songjiajie2010

 
分享:
關(guān)鍵詞: 液質(zhì)聯(lián)用
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 檢驗技術(shù)搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關(guān)閉窗口 ] [ 返回頂部 ]
 

 
 
推薦圖文
推薦檢驗技術(shù)
點擊排行
檢驗技術(shù)
 
 
Processed in 0.089 second(s), 14 queries, Memory 0.99 M